5''''-磷酸二酯酶的研究进展

5'-磷酸二酯酶是水解磷酸二酯键生5'-磷酸物质的酶,用于水解核酸得到5'-核苷酸,随着核苷酸产业的发展,该酶的研究和应用也愈发显得重要起来,重点论述了在5'-核苷酸生产中常用的5'-磷酸二酯酶的作用方式、酶的性质和酶的制备及应用.     

5′-磷酸二酯酶的提取

主要研究了桔青霉与麦芽根提取5′-磷酸二酯酶的方法，并对二者进行了比较。用快速登高法确定了麦芽根提取5′-磷酸二酯酶的最优区域。在此区域内浸提的5′-磷酸二酯酶酶活力可达300U／ml。酶液经超滤浓缩、冷冻干燥可制备得率较高的粗酶粉。     

5''''-磷酸二酯酶的提取

主要研究了桔青霉与麦芽根提取5′-磷酸二酯酶的方法,并对二者进行了比较.用快速登高法确定了麦芽根提取5′-磷酸二酯酶的最优区域.在此区域内浸提的5′-磷酸二酯酶酶活力可达300U/ml.酶液经超滤浓缩、冷冻干燥可制备得率较高的粗酶粉.     

麦芽根提取5′-磷酸二酯酶对RNA酶解工艺研究

从麦芽根提取中的5′-磷酸二酯酶,原酶液酶活达到300U/mL。将提取的酶液用于水解酵母RNA,得到5′-AMP、UMP、CMP、GMP四种核苷酸,并系统研究了麦芽根5′-磷酸二酯酶对核酸的酶解条件。结果表明,最佳反应条件为:底物浓度3%,酶用量5%,温度68℃,pH6.5,水解时间为4～5h,在此条件下,酶解率可以达到84%。在酶解2h内补加RNA底物可提高酶利用率。      

利用发芽大麦提取5′-磷酸二酯酶的初步研究

文章研究了利用发芽的饲料级大麦来提取5′-磷酸二酯酶的工艺条件。试验结果显示,在25℃温度下,发芽64 h,麦芽中5′-磷酸二酯酶活性最高。利用此麦芽提取5′-磷酸二酯酶时,粉碎度为60目,在温度为50℃,提取液pH值为5.0,并且加入15%的NaCl,料液比为1∶10的条件下提取120 min,可以得到酶活力最高的提取酶液。     

麦芽根提取5'-磷酸二酯酶对RNA酶解工艺研究

从麦芽根提取中的5′-磷酸二酯酶,原酶液酶活达到300U/mL。将提取的酶液用于水解酵母RNA,得到5′-AMP、UMP、CMP、GMP四种核苷酸,并系统研究了麦芽根5′-磷酸二酯酶对核酸的酶解条件。结果表明,最佳反应条件为:底物浓度3%,酶用量5%,温度68℃,pH6.5,水解时间为4～5h,在此条件下,酶解率可以达到84%。在酶解2h内补加RNA底物可提高酶利用率。     

麦芽根中5'-磷酸二酯酶的提取及制备

主要研究了麦芽根中 5 ' 磷酸二酯酶的提取方法。采用细度 40目的原料 ,通过正交试验确定最佳提取工艺为 :加水 6倍 ,pH5 .0 ,在 4℃条件下浸提 2 0h后 5′ 磷酸二酯酶活力达到 1 6 0u/mL。不同浸提液种类、浓度、添加无机盐皆对酶活有影响 ,加入纤维素酶、果胶酶、Viscozyme对麦芽根破壁具有协同作用。酶液经超滤浓缩可制备得率较高的粗酶粉     

桔青霉发酵制备核酸酶P1研究进展

核酸酶P1是一种重要的工业酶制剂,可用于水解核酸生产5’-核苷酸。本文综述了利用桔青霉发酵得到核酸酶P1的菌种选育、培养基优化、发酵工艺控制、浓缩、相关应用和国内外市场状况。      

磷酸二酯酶-5抑制剂检测方法研究进展

3种获准上市的磷酸二酯酶-5抑制剂药物(西地那非、伐地那非和他达那非)在市场上获得了巨大成功。不法商人把这些药品违法添加到植物保健品和药品中谋取利益,对公众的健康构成了威胁。不断出现的PDE-5抑制剂的结构类似物导致问题变得更加复杂。目前,在标准品的参照下,TLC、HPLC、LC-MS和MECC等检测方法可以实现对已知PDE-5药物的检测。只有液相/离子阱串联质谱能够同时检测合法的药物和未知的PDE-5抑制剂类似物。免疫学检测方法正成为快速、灵敏、高效检测PDE-5药物的新方法。     

麦芽根中5′-磷酸二酯酶的高效提取

研究了从麦芽根中5＇-磷酸二酯酶的提取条件,通过正交确定最佳方法：提取pH6,加水比1∶8,40℃提取3h后酶活可达537.86U/mL,浸提液中添加缓冲液,无机盐对酶活均有影响;并对酶液性质进行了初步探讨。     

5'-磷酸二酯酶的制备及其在酵母抽提物生产中的应用

本文着重讨论了从工业废料－麦芽根中提取５’－磷酸二酯酶的方法,通过正交试验认为其最佳提取工艺为：麦芽根加七倍水量,在４℃下浸提２０ｈｒ,可得到活力１４０μ／ｍｌ的５’－磷酸二酯酶,将上述５’－磷酸二酯酶加入经煮沸并冷却至７０℃,ｐＨ５．２－５．４的酵母悬浮液中作用３ｈｒ,有显著提高抽提物中（Ｉ＋Ｇ）含量,增加产品鲜味。     

5＇-磷酸二酯酶的应用与进展

5’-磷酸二酯酶是一种能将单链DNA和RNA水解为5’-核苷酸的磷酸二酯酶，也是酶法生产5’-核苷酸的主要工业用酶。文章对5’-磷酸二酯酶的来源、制备方法、应用及研究进展进行了综述。     

5'-磷酸二酯酶的应用与研究进展

5'-磷酸二酯酶是一种能将单链DNA和RNA水解为5'-核苷酸的磷酸二酯酶,是酶法生产5'-核苷酸的主要工业用酶.文中对5'-磷酸二酯酶的来源、制备方法、应用及研究进展进行了综述.     

烟曲霉5’-磷酸二酯酶的分离纯化和酶学性质的研究

研究了烟曲霉5’-磷酸二酯酶的纯化及性质。烟曲霉固体发酵提取的胞外核酸酶的粗酶液经0.22μm微滤膜过滤、截留分子量为10ku和4ku的膜超滤、硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和DEAE-Sepharose CL-6B层析等方法分离。结果表明,5’-磷酸二酯酶酶液的比活力为1036.76U/mg、纯化倍数为82倍,纯化回收率为7.82%。纯化的酶经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测显示为单一条带,该酶经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Sephadex G-100凝胶层析测定,其相对分子质量约为9.5ku,由单一亚基组成。酶学性质研究结果表明,该酶反应最适pH为5.0,在pH5.0⁹.0之间酶活稳定;最适反应温度为60℃,在低于55℃下酶活较为稳定;该酶的Km为13.60mg/mL,Vmax为0.71mmol（/mg·min）;Fe3+、Fe2+和Zn2+对该酶有抑制作用,而K+对该酶有轻微的促进作用。      

麦芽根中5''-磷酸二酯酶的高效提取

研究了从麦芽根中5'-磷酸二酯酶的提取条件,通过正交确定最佳方法:提取pH6,加水比1:8.40℃提取3h后酶活可达537.86U/mL,浸提液中添加缓冲液,无机盐对酶活均有影响;并对酶液性质进行了初步探讨.     

麦芽根中5′-磷酸二脂酶的提取及制备

要主要研究了麦芽根中5’—磷酸二酯酶的提取方法。采用细度40目的原料，通过正交试验确定最佳提取工艺为：加水6倍，pH5.0，在4℃条件下浸提20h后5’—磷酸二酯酶活力达到160μ/mL。不同浸提液种类、浓度、添加无机盐皆对酶活有影响，加入纤维食酶、果胶酶、viscozyme对麦芽根破壁具有协同作用。酶液经超滤浓缩可制备得率较高的粗酶粉。     

提高酵母抽提物5''''-GMP含量的研究

对新鲜麦芽根中5-磷酸二酯酶的提取及酶解条件进行了研究,并利用所得5-磷酸二酯酶应用于酵母抽提物的生产中以提高5-GMP的含量。     

桔青霉高产核酸酶P1的固态发酵条件研究

以本实验室从土壤中分离筛选到的一株高产核酸酶P1的桔青霉GX-K为生产菌种,研究了该菌固体发酵产核酸酶P1的发酵条件。结果表明其最佳产酶条件为：以麸皮作为固态发酵基料,添加4％的蔗糖,料水比为1：0．9,30℃培养72h。该条件下核酸酶P1产量达5783．41U／g干基。     

双载体固定化桔青霉产生核酸酶P1的研究

以玉米芯颗粒吸附桔青霉(Penicillium citrirum)孢子,再用1．5％的海藻酸钠包埋吸附固定化细胞玉米芯颗粒。于摇瓶中进行分批培养,实际结果表明：在固定化细胞产酶的条件下,培养基中淀粉水解糖浓度为9g/L,蛋白胨浓度为1g/L,摇瓶转速为180r/min,产酶发酵周期为50h,发酵液中核酸P1的活力高达503U／ml。双载体固定化细胞经30批次连续重复发酵产酶稳定在较高水平,固定化细胞粒子机械强度高。