超滤法在番木瓜提取木瓜蛋白酶工艺中的应用研究

采用超滤对番木瓜中木瓜蛋白酶粗液进行提取,并通过紫外法测定其酶的活性。研究分析了各种影响因素并确定出几组最佳工艺参数,结果表明：在提取工艺中,L-cys和EDTA添加量分别为0.06 mol/L和0.002 mol/L时对木瓜蛋白酶活性能起到最佳保护作用,操作压力、温度及时间分别为0.175 MPa、60℃及5 min时能获得最佳提取效果。     

软枣猕猴桃多聚半乳糖醛酸酶提取条件的优化

以软枣猕猴桃为实验材料,确定多聚半乳糖醛酸酶最优提取条件和最适活性分析条件。在提取过程中,以酶比活力为指标确定缓冲液的最适pH值、离子浓度、DTT添加量对PG提取效果的影响,通过正交试验确定最佳提取条件。结果表明：最优提取条件为pH5.5、0.05mol/L 乙酸缓冲液为提取液,加入0.1mol/L NaCl、1mmol/L DTT;最适活性分析条件为反应温度40℃、反应时间90min。     

酶法提取金樱子总黄酮的研究

对金樱子黄酮类化合物的酶法提取工艺进行了研究.采用单因素实验考察了纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶、复合酶(纤维素酶+果胶酶+β-葡聚糖酶+半纤维素酶+木瓜蛋白酶)对总黄酮提取率的影响及酶解温度,酶解液pH值,酶解时间和酶用量对总黄酮产量的影响,通过正交试验设计确定了酶法提取金樱子总黄酮的最佳提取工艺条件:酶解温度为50℃,酶解液初始pH=4.5,酶解时间为120min,酶的用量为0.35mg/mL的复合酶(纤维素酶+果胶酶+β-葡聚糖酶+半纤维素酶+木瓜蛋白酶).实验结果表明:在一定条件下,复合酶的酶解效果比单一酶好,纤维素酶酶解效果比果胶酶好,木瓜蛋白酶在单独使用时基本没有效果.根据正交实验确定的最佳酶提取工艺条件与传统的直接醇提取工艺相比,金樱子总黄酮产量提高了26.2%.     

苹果果胶酯酶提取及其酶学性质探究

以国光苹果为原料,通过单因素和正交实验考察了Na Cl浓度、p H、提取温度和提取时间对苹果果胶酯酶酶活的影响,确定了苹果果胶酯酶最佳提取工艺参数,并研究了苹果果胶酯酶的酶学性质。结果表明:在Na Cl浓度为2.5mol/L、p H为8.5、提取温度30℃和提取时间为27h时,苹果果胶酯酶的酶活达到0.98μmol/min·m L;该酶反应的最适温度为40℃,热稳定性较差,最适p H为11;金属离子中Ca2+对果胶酯酶有显著的激活作用,Na+、K+和Fe2+也有一定的激活作用,而Ba2+、Mn2+和EDTA对果胶酯酶有抑制作用。      

木枣多酚氧化酶酶学特性研究

从木枣中提取PPO,采用色谱法对其酶促动力学反应机制进行了研究。结果显示:以邻苯二酚为底物,在其浓度0.1mol/L、温度25℃、p H6.4下,292nm处检测到木枣PPO活性最高;不同激活剂对木枣PPO活性的最适激活浓度分别是Mg Cl_2为0.5mol/L、Cu SO_4为0.4mol/L和乙醇为6%,其中Cu SO_4激活效果明显;不同抑制剂对木枣PPO活性的最佳抑制浓度分别是Ca Cl_2为0.6mol/L、芦丁为0.6%、L-Lys为0.2mol/L、L-Glu为0.2mol/L,其中L-Lys对PPO抑制作用最为明显。结论:PPO是酶促褐变的主要原因,在木枣生产和加工过程中可通过添加激活剂或抑制剂来调节PPO活性。     

木瓜蛋白酶酶解牦牛血红蛋白制备氯化血红素关键工艺研究

利用牦牛血中丰富的血红蛋白来制备氯化血红素。以新鲜牦牛血为原材料,通过预处理获得血红蛋白,之后进行酶解获取氯化血红素,在单因素实验的基础上,利用Box-Benhnken中心组合旋转实验和响应面分析法,确定了酶解血红蛋白制备氯化血红素的（酶解温度、酶解时间、p H、酶添加量）最适工艺条件,结果表明,提取氯化血红素的最佳工艺为:酶解温度55℃、酶解时间94 min、p H8.0、酶添加量0.08 g。木瓜蛋白酶对酶解牦牛血红蛋白制备氯化血红素有实际意义,在此工艺条件下,氯化血红素的浓度可达6.47μg/m L。      

木瓜蛋白酶酶解牦牛血红蛋白制备氯化血红素关键工艺研究

利用牦牛血中丰富的血红蛋白来制备氯化血红素。以新鲜牦牛血为原材料,通过预处理获得血红蛋白,之后进行酶解获取氯化血红素,在单因素实验的基础上,利用Box-Benhnken中心组合旋转实验和响应面分析法,确定了酶解血红蛋白制备氯化血红素的(酶解温度、酶解时间、p H、酶添加量)最适工艺条件,结果表明,提取氯化血红素的最佳工艺为:酶解温度55℃、酶解时间94 min、p H8.0、酶添加量0.08 g。木瓜蛋白酶对酶解牦牛血红蛋白制备氯化血红素有实际意义,在此工艺条件下,氯化血红素的浓度可达6.47μg/m L。     

复合处理对煮熟瘦猪肉嫩化的影响

通过化学试剂和外源酶的作用,根据感官评定、蒸煮损失和剪切力的测定结果,确定嫩化效果明显的一组试剂,再通过单因素实验和正交优化实验,确定最优的实验条件和最优作用时间。通过单因素实验得到木瓜蛋白酶的最佳作用温度为30℃,最佳作用时间为1.5 h,最佳作用质量浓度为0.5 g/L,碳酸钠的最佳质量浓度为m(Na2CO3):V(H2O)=6 g/d L,复合磷酸盐的添加量为肉质量的0.5%;复合磷酸盐的质量比为:m(多聚磷酸钠):m(焦磷酸钠):m(六偏磷酸钠)=2:2:1。并通过正交优化实验确定最适的添加量为木瓜蛋白酶0.7 g/L,温度30℃,碳酸钠质量浓度6 g/d L,聚磷酸钠、焦磷酸钠、偏磷酸钠的质量比为2∶2∶1,添加量为肉质量的0.5%,然后在此条件下确定最适作用时间为1.5 h,达到了猪肉煮熟嫩化的目的。     

鳕鱼皮中硫酸皮肤素的提取工艺

以鳕鱼皮为原料,采用木瓜蛋白酶和胰酶混合酶的方法,从鳕鱼皮中提取硫酸皮肤素,并通过乙醇沉淀的方法得到最终产品。研究料液比、酶添加量、p H、时间和温度等单因素对提取率的影响,并通过正交试验法对混合酶法提取硫酸皮肤素工艺条件进行优化。结果表明,混合酶提取硫酸皮肤素的最佳工艺为:料液比1∶25 mg/m L、酶添加量0.5%、p H8.5、提取时间22 h、提取温度50℃。采用此工艺条件提取率达到4.409%。     

扇贝加工废液多糖提取优化及生物活性的研究

目的优化扇贝加工废液多糖的提取条件,并研究其生物活性。方法以多糖纯度为指标,对比胃蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶及碱性蛋白酶对扇贝加工废液中多糖酶解的效果。在单因素试验的基础上,采用正交试验法对扇贝加工废液多糖提取工艺进行优化。结果木瓜蛋白酶为最佳反应酶,最佳酶解条件为酶解时间4 h,酶解pH 6,酶解温度60℃,加酶量为2.5%,此条件下提取物多糖纯度为62.23%。采用膜分离技术,对所提取多糖进一步纯化,得到纯度为84.75%的扇贝废弃液多糖。在多糖浓度为8mg/mL时,废弃液多糖对-OH的清除能力达到87.53%,对DPPH自由基的清除能力达到53.36%;在废弃液多糖浓度为800μmol/L时,巨噬细胞NO生成量达到了13.05μmol/L。结论扇贝蒸煮液可提取得到较高纯度多糖,并具有较强的抗氧化作用及良好的免疫调节作用。     

基于黄嘌呤氧化酶活性抑制和斑马鱼高尿酸血症模型的降尿酸功效食药材筛选

结合体外（黄嘌呤氧化酶活性抑制）和体内（斑马鱼高尿酸血症模型）方法,对15种食药材乙醇粗提物的降尿酸活性进行筛选。体外实验设置空白组、酶反应组、抑制剂组、对照组,酶标仪295 nm测定吸光度,计算15种食药材对黄嘌呤氧化酶（XOD）活性的抑制率;体内实验随机选取受精后第5 d（5dpf）的斑马鱼,设置空白组、模型组（200 μmol/L PO+10 μmol/L XSS）、食药材给药组（200 μmol/L PO+10 μmol/L XSS+不同浓度提取物）、阳性对照组（200 μmol/L PO+10 μmol/L XSS+APL 2 mmol/L）,水溶浸泡,28.5 ℃培养箱中孵育24 h,测定尿酸含量,对具有良好XOD抑制活性的食药材做进一步降尿酸活性验证。体外试验结果表明,15种乙醇粗提物均具有XOD抑制活性,其中8种在400 μg/mL时抑制率达到50%以上,分别为:红景天、兔耳草、牡丹皮、败酱草、黄柏、绿萝花、决明子、雪菊。体内试验结果表明,8种处理组尿酸水平与模型组相比显著降低（P<0.05或P<0.01）,均显示出降尿酸活性。     

树脂法提取纯化草莓色素的研究

研究以草莓为原料、用大孔树脂提取和纯化草莓色素的工艺条件.试验结果表明,最佳的工艺条件是:提取液为0.1 mol/L的盐酸溶液;最佳树脂是AB-8树脂;最佳吸附条件是:50℃,pH=1.5的条件下吸附,吸附流速为1 BV/h;最佳解吸条件是:用pH=1.5时,50%的乙醇在室温条件下洗脱,洗脱流速为0.5 BV/h.     

油菜素内酯对豇豆冷害的控制

为研究油菜素内酯(Brassinolide,BR)处理对豇豆冷害现象的控制,将豇豆分别用0.5、1、2、4、8μmol/L BR溶液浸泡10 min后沥干,用0.03 mm厚度的PE保鲜膜包装后置于4℃冷库中贮藏,每2 d测定豇豆的感官评分和冷害率,通过此研究发现1μmol/L BR处理效果最佳;然后将豇豆用1μmol/L BR溶液浸泡10 min后沥干、用0.03 mm厚度的PE保鲜膜包装后置于4℃冷库中贮藏,每2 d测定与成熟衰老相关生理生化指标。结果表明,与对照组相比,1μmol/L BR处理能够延缓失重率、相对电导率、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的上升,抑制可溶性固形物(TSS)含量的下降,提高过氧化氢酶(catalase,CAT)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活性,抑制多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)和脂氧合酶(lipoxygenase,CAT)活性,保鲜效果显著(p<0.05)。      

丰年虫蛋白质的分类提取工艺优化及抗氧化活性

目的:对丰年虫蛋白质进行分类提取和抗氧化活性比较,并对抗氧化活性最强的蛋白质进行提取工艺优化。方法:从丰年虫脱脂粉中分离出水溶性、碱溶性、酸溶性和醇溶性蛋白,并对其进行体外抗氧化活性研究,选择一种抗氧化活性最强的蛋白质,利用中心组合试验设计对其提取工艺进行优化。结果:丰年虫脱脂粉中最主要的蛋白是水溶性蛋白和碱溶性蛋白,其次是醇溶性蛋白,最少的是酸溶性蛋白,该4类分别占脱脂粉的25.03%、26.98%、1.83%、0.53%;通过体外抗氧化研究发现水溶性蛋白抗氧化活性最强;得到提取水溶性蛋白的最优工艺条件是料液比1:7.5、提取温度49.8℃、提取时间2.8h,预测值和实测值的偏差为0.88%。结论:丰年虫水溶性蛋白的抗氧化活性最强,优化的提取工艺条件具有可行性。     

多壁碳纳米管修饰电极测定烟酰胺

研究多壁碳纳米管修饰电极的制备及其对烟酰胺的电催化检测。考察支持电解质种类、酸度和扫速等因素对烟酰胺响应的影响。在优化实验条件下,采用示差脉冲伏安法测定烟酰胺,其浓度在5.0×10-5～1.0×10-3mol/L范围内与其还原峰电流呈良好的线性关系,检出限为2.49×10-5mol/L。共存的多种离子、蔗糖、乙醇等不干扰测定。     

乙醇熏蒸对鲜切菊芋保鲜效果的研究

对鲜切菊芋褐变机理和控制进行了探索,研究了不同体积分数的乙醇熏蒸处理对鲜切菊芋的保鲜效果。结果表明:乙醇熏蒸处理可延迟鲜切菊芋表面褐变,使产品在贮藏过程中保持优良品质;浓度为450μL/L的乙醇熏蒸处理5h效果最好,4～5℃条件下贮藏16d品质保持最佳。     

玫瑰花红色素提取工艺研究

研究了天然玫瑰花红色素总含量的测定方法以及溶剂法的提取工艺.玫瑰花红色素属于花色苷类物质,它在不同溶剂中最大吸收波长不同,在同一溶剂中不同pH值下最大吸光值不同,所以采用经典的pH值示差法测定总含量.本实验测定了缓冲液中玫瑰花红色素最大吸收波长,选择出合适的提取剂,由单因素试验,正交试验得出最佳提取条件：在55%乙醇水溶液,pH值1.5,料液比为1g：35 mL条件下,浸提25 min.提取2次.     

无乳链球菌产CMP-唾液酸合成酶发酵培养基优化

为获得低成本高酶活的产CMP-唾液酸合成酶(Cytidine 5'-monophosphate N-acetylneuraminic acid synthetase,NmCSS)培养基,对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)产CMP-唾液酸合成酶发酵生产培养基进行优化。通过单因素试验筛选发酵温度、碳源、氮源、pH,确定对NmCSS酶活具有明显影响的因子及水平值;采用响应面法(Box-Behnken)确定以氮源浓度、碳源浓度、pH为三个主要影响因子的最适条件。结果表明,当培养温度为34℃时,蔗糖浓度为0.10%,氮源浓度为2.50%,pH为7.5、Na₂HPO₄ 2.5 g/L、NaCl 5.0 g/L时,NmCSS酶活为(5.895±0.005)×10⁷ U/mol,较基础发酵培养基的酶活(0.507±0.002)×10⁷ U/mol提高了10.627倍,显示出了良好的优化效果。响应面方法优化得到的低成本高酶活培养基为无乳链球菌产NmCSS及其应用奠定了基础。     

采后钙处理对香菇多糖和细胞稳定性的影响

以采后香菇子实体为原料,采取CaCl2溶液真空渗透法,研究Ca2+处理对采后香菇多糖、β-1,3-葡聚糖酶活性、膜透性和MDA的影响。结果表明：0.12mol/L CaCl2处理的效果最好,β-1,3-葡聚糖酶活性为20.54U/mg,香菇多糖含量为0.38%,膜电导率为85.11%,MDA含量为2.48μmol/L,均优于对照。不同浓度Ca2+处理均能抑制香菇采后β-1,3-葡聚糖酶活性,降低香菇多糖贮藏期间的损耗,并有效维持细胞膜结构的完整性。