^125I标记重组人血小板生成素大鼠静脉注射后药动学参数

本文目的是建立125I标记重组人血小板生成素(125I-rhTPO)的分析方法并研究大鼠单剂量静脉注射125I-rhTPO后的药动学特性。以Iodogen法制备I-rhTPO,HPLC法及SDS-PAGE法鉴定并测定放化纯度。125大鼠按2μg·kg-1剂量经尾静脉给药,于不同时相取血测放射性计数,并计算相应的血药浓度及药动学参数。制备的I-rhTPO符合药动学研究要求,标记前后化合物所在电泳位置一致,放化纯度>98%,4℃100h后125放化纯度仍大于95%。尾静脉注射2μg·kg-1,在大鼠体内可以二室模型拟合血药浓度的动态变化,T1/2(α)为(1.32±0.35)h,T1/2(为(24.55±1.07)h,AUC0β)→t为(134.26±22.99)ng·h·mL-1。Iodogen法制备125I-rhTPO,经SDS-PAGE检验,标记后的I-rhTPO与rhTPO的纯度、分子量相当,且I-rhTPO在体外稳定性较好。尾125125静脉注射2μg·kg-1,在大鼠体内可以二室模型拟合,半衰期约为25h。     

125Ⅰ标记重组人血小板生成素大鼠静脉注射后药动学参数

本文目的是建立125Ⅰ标记重组人血小板生成素(125Ⅰ-rhTPO)的分析方法并研究大鼠单剂量静脉注射125Ⅰ-rhTPO后的药动学特性.以Iodogen法制备125Ⅰ-rhTPO,HPLC法及SDS-PAGE法鉴定并测定放化纯度.大鼠按2 μg·kg-1剂量经尾静脉给药,于不同时相取血测放射性计数,并计算相应的血药浓度及药动学参数.制备的125Ⅰ-rhTPO符合药动学研究要求,标记前后化合物所在电泳位置一致,放化纯度＞98%,4℃100 h后放化纯度仍大于95%.尾静脉注射2 μg·kg-1,在大鼠体内可以二室模型拟合血药浓度的动态变化,T1/2(α)为(1.32±0.35)h,T1/2(β)为(24.55±1.07)h,AUC0→t为(134.26±22.99)ng·h·mL-1.Iodogen法制备125Ⅰ-rhTPO,经SDS-PAGE检验,标记后的125Ⅰ-rhTPO与rhTPO的纯度、分子量相当,且125Ⅰ-rhTPO在体外稳定性较好.尾静脉注射2μg·kg-1,在大鼠体内可以二室模型拟合,半衰期约为25 h.     

放射性碘化IBZM的快速制备及鉴定

采用自行设计的低浓度过氧化氢乙酸法碘化标记(s)-BZM,Sep-Pak C18小柱分离纯化反应产物,无菌无热原滤器除菌.结果表明低浓度过氧化氢乙酸法是最佳的碘化标记(s)-BZM的方法,其碘化标记率≥90%,无副产物,易于进行无菌无热原处理.纯化产物的放射化学纯度为96.8%±1.4%(n=5),全程产率为81.9%±2.8%(n=5).由此可见采用低浓度过氧化氢乙酸法,配合Sep-Pak C18小柱分离纯化和无菌无热原滤器除菌,能简便、快速、高产率地制备无菌无热原的放射性碘化IBZM,是极具实用的临床方法.     

Annexin V的~(125)I标记及其在正常小鼠体内的分布

采用Iodogen法对Annexin V进行了125I标记,并观察了其在正常小鼠体内的分布情况。标记结果显示,125I-Annexin V标记率达94.9%,纯化后放化纯度达99%;室温放置72 h后,放化纯度仍保持在92%以上,表明其体外稳定性较好。生物分布结果显示,125I-Annexin V在肾脏中放射活性最高,其次为血液、肝脏、心、肺、脾;脑不吸收125I-Annexin V;肌肉、骨骼组织摄取亦较少;各组织、器官放射性摄取在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降。表明125I-Annexin V适合用作核医学诊断试剂。     

Annexin V的125I标记及其在正常小鼠体内的分布

采用Iodogen法对Annexin V进行了^125I标记,并观察了其在正常小鼠体内的分布情况.标记结果显示,^125I-Annexin V 标记率达94.9%,纯化后放化纯度达99%;室温放置72 h后,放化纯度仍保持在92%以上,表明其体外稳定性较好.生物分布结果显示,^125I-Annexin V在肾脏中放射活性最高,其次为血液、肝脏、心、肺、脾;脑不吸收^125I-Annexin V;肌肉、骨骼组织摄取亦较少;各组织、器官放射性摄取在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降.表明^125I-Annexin V 适合用作核医学诊断试剂.     

131I-epidepride的制备与SD大鼠体内分布特性研究

采用双氧水标记法和氯胺 -T法进行13 1I -epidepride标记 ,考察标记物的纯度及稳定性 ,并进行SD大鼠体内分布特性研究。实验结果表明 ,双氧水法和氯胺 -T法标记率分别为 97.4 %和 5 2 .9%。标记物的生理盐水溶液室温放置 4h ,放化纯大于 90 %。大鼠静脉注射13 1I -epide pride的生理盐水溶液后 ,纹状体与小脑比值在注射后 32 0min时高达 2 37:1。13 1I -epidepride进入血液后很快被组织摄取 ,其中以肺的早期摄取最高 (2 .11± 1.0 5 ) %ID·g- 1,各脏器的清除均较快 (T1/2 <4h) ,甲状腺的摄取率随时间的延长而增加。     

^131I标记肿瘤血管靶向多肽的实验研究

设计合成含精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）序列的多肽,并用氯胺-T法对其进行^131I标记,标记率约60％,放化纯度〉99％。体外放置24h放化纯度仍≥90％。肿瘤对^131I标记多肽的摄取在注射后明显高于其他器官,注药后24h,肿瘤对^131I-多肽的摄取约为0．65％ID／g,肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T／NT）达9．08。以上结果表明：通过氯胺-T法对该多肽进行^131I标记是可行的,标记物可在体外稳定存放24h;^131I-多肽可以靶向肿瘤血管,有进一步研究的价值。     

125I示踪法检测西夫韦肽在生物体内的代谢过程

采用 Iodogen法标记了西夫韦肽(sifuvirtide)，并用S-100 HR凝胶柱分离纯化标记物。125I-sifuvirtide放化纯度＞99.0%，比活为3.9 GBq•g-1；标记后的蛋白仍具有一定生物活性。三氯醋酸(TCA)沉淀法测定125I-sifuvirtide在生物样品中含量，血浆中125I-sifuvirtide 的放射性活度为286.5-26125.5 Bq•mL-1时，线性为0.9998±0.0005，回收率为72.3%±6.9%。猕猴静脉和皮下推注125I-sifuvirtide后，血浆TCA酸沉放射性浓度时间曲线符合二房室模型；皮下给药后平均消除半衰期为95.83 h，达峰时间平均为3.35 h，平均绝对生物利用度为85.2%。     

同位素法体内示踪HSA-IFNα2b的方法学研究

采用氯胺-T法制备了125I-HSA-IFNα2b,标记率为82.72%,放射化学纯度>95%,放射性比活度为0.26MBq/μg。体外WISH/VSV 系统抗病毒活性分析表明125碘标记对HSA-IFNα2b的生物学活性几无影响。125I- HSA-IFNα2b的血清回收试验和组织回收试验结果均表明回收率均符合方法学考核要求。125I-HSA-IFNα2b的溶液干扰、血清样品干扰和组织样品干扰实验的研究结果表明溶液、血清和组织样品对测定均无干扰,可以直接进行测定。因此,可以采用125I-HSA-IFNα2b同位素示踪法进行HSA-IFNα2b的体内分布排泄研究。     

~(125)I-SOD氯胺T法和Iodogen法标记条件的研究

选用正交设计L_(16)(4~5)表对影响~(125)I-SOD氯胺T标记法的5个影响因素(即标记温度、氯胺T加入量、标记反应时间、PB缓冲溶液的浓度和体积),每个因素分4个水平进行了研究。标记产物~(125)I-SOD用Sephadex G25色层柱进行分离,并测定了标记率和相对活性,仅做16组试验就得出了最佳标记条件。在此基础上又用正交设计L_9(3~4)表对~(125)I-SOD Iodogen固相标记法进行了研究。取Iodogen加入量、标记温度和反应时间3个因素,每个因素3个水平,仅做9组试验,就确定了最佳标记条件:对20μg SOD而言,Iodogen为50μg,标记温度为15℃,反应时间为15min时,~(125)I的标记率可达79.0％,~(125)I-SOD的放化纯度达95.7％,相对活性达98.2％,比活度达2.92×10~5Bq/μg,明显优于氯胺T法。     

纤维蛋白显像剂131I-YSSCREKA肽的制备及对早期血栓定位的研究

合成了一种可特异性结合纤维蛋白-纤维连接蛋白的早期血栓显像剂¹³¹I-YSSCREKA肽（酪氨酸-（D）丝氨酸-（D）丝氨酸-半胱氨酸-精氨酸-谷氨酸-赖氨酸-丙氨酸），对其标记、SPECT显像及初步生物学性能进行研究。结果表明：YSSCREKA八肽在室温下通过氯胺-T法反应5 min的标记率为(77.2±1.1)%（n=3），放射化学纯度为(90.0±3.1)%（n=3），体外稳定性较好。新西兰家兔SPECT显像显示在¹³¹I-YSSCREKA肽注射后20 h血栓能较清晰地显像，血栓/血放射性比值为1.36。SD大鼠生物分布实验显示：20 h ¹³¹I-YSSCREKA肽在血栓中的摄取率为(0.19±0.06)ID%/g（n=5），血栓/肌肉及血栓/血放射性比值分别为3.80和1.90。¹³¹I-YSSCREKA肽有可能作为早期血栓的显像剂，但其在血栓中的摄取率有待于进一步提高。     

直接法制备188Re-碘化油

探讨直接法制备188Re-碘化油的实验条件及标记物性质.在温度为75～120℃和不同实验条件下,直接标记法制备188>Re-碘化油,观测标记物标记率在室温和37℃人血浆体系中随时间的变化情况;采用红外光谱仪分析标记对碘化油分子结构的影响;用肿瘤模型动物显像验证碘油对188Re的包埋效果,以及在生物体内的稳定性半定量分析.直接法制备188Re-碘化油,在最佳标记条件下,标记物标记率可达(99.1±0.4)%;标记物在室温和37℃人血浆体系中放置3 d,标记率可保持在(90.9±1.9)%和(92.8±1.2)%.红外光谱结果显示本标记方法不改变碘化油的分子结构;荷S180骨肉瘤鼠显像表明,瘤内注射标记物48 h后,肿瘤部位仍有明显的放射性浓聚.188Re直接标记碘化油易于操作,标记物标记率高,体外稳定性好,碘油对放射性核素铼的包裹效果良好.     

Preparation of an imaging agent for cerebral muscarinic acetylcholine receptor, (R,S)(131)~I-QNB

The method to synthesize a high affinity muscarinic receptor antagonist (R,S)I-QNB[(R)-(-)-l-azabicyclo [2,2,2]oct-3-yl-(S)-(+)-α-hydroxy-α-(4-[127I]iodophenyl)-a-phenyl acetate] from 4-nitrobenzophenone with improvement compared to literatures was reported in this article. IR, MS and 'HNMR characterized the final product. (R,S)131I-QNB was prepared using Cu(I) assisted iodine exchange labeling, and showed by TLC that the radiolabeling yield(RLY) was over 80%, and radiochemical purity(RCP) was over 95%. Stability of the labeled compound was also determined. It was found that (R,S)131I-QNB dried by nitrogen blowing can stay at 4-10℃ for a week without change of RCP.     

^125I标记氧化低密度脂蛋白抗体

采用Iodogen法对氧化低密度脂蛋白抗体（OxLDL—Ab）进行了^125I标记,并对标记条件进行了优化;采用PD-10柱对标记抗体进行分离纯化,并对^125I-OxLDL—Ab的体外稳定性和活性进行评价。结果表明,^125I-OxLDL-Ab标记率〉80％,放化纯度〉95％,比活度达73．3TBq／g;^125I-OxLDL-Ab分别在生理盐水、含2％BSA的生理盐水和人血清中4℃放置96h,放化纯度降低均小于5％;^125I-OxLDL—Ab在体外与OxLDL结合的Ka为10．6±1．3GL／mol。以上结果提示^125I-OxLDL-Ab体外稳定性好,与OxLDL结合活性高,^125I标记对其活性影响小,可以用于体外放免诊断试剂盒的研究。     

Preparation of liposome-coated oligonucleotide labeled with 99mTc and its uptake in vascular smooth muscle cells

To explore the preparation method of liposome-coated 99mTc-labeled antisense oligonucleotide (ASON),targeteing the proliferating cell nuclear antigen (PCNA), and to explore the biological characteristics and the uptake kinetics of a radiolabeled probe in vascular smooth muscle cells, an 18-base single-stranded antisense oligonucleotide targeting PCNA mRNA and the complementary strand (sense oligonucleotide, SON) were synthesized. The ASON (SON) was labeled with 99mTc, by conjugating the bifunctional chelator (hydrazino nicotinamide, HYNIC), and purified through a gel filtration column of Sephadex G-25. The product was then encapsulated in cationic liposome (oligofectamineTM). The radiolabeling efficiency, radiochemical purity, stability of the liposome-coated 99mTc-HYNIC-ASON in a phosphate buffered solution (PBS), and fresh human serum and its uptake rate were studied. There was no significant difference between the 99mTc radiolabeling efficiencies of HYNIC-ASON and HYNIC-SON, which were 60.04% ± 1.92% and 59.60% ± 2.53%, respectively (P ＞ 0.05, n = 5). The radiochemical purity of the liposome-coated 99mTc-HYNIC-ASON was 94.70% ± 1.90% (n = 5). And after incubation with PBS and fresh human seAt 90 min after transfection, the uptake rate of the liposome-coated 99mTc-HYNIC-ASON reached its peak of 83.8% ±5.92% in vascular smooth muscle cells (VSMCs) and was much higher than that of the nonliposome-coated 99mTc-HYNIC-ASON, which was 11.16% ± 0.54% (P ＜ 0.01, n = 4). The labeling method of PCNA ASON (SON) conjugated by HYNIC has been proved successful. The liposome was able to enhance the ASON (SON) uptake in VSMCs,and could be widely used as a safe, convenient, effective gene transfer carrier.     

荷人肺腺癌裸鼠的^99Tc^m-CD44-McAb放射免疫显像

采用^99Tc^m直接标记法标记抗CD44的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;利用^99Tc^m-CD44-McAb对荷人肺腺癌裸鼠进行放射免疫显像及体内分布研究。结果显示,^99Tc^m-CD44-McAb的标记率为92．3％±4．1％,比活度为2．9±0．5TBq／g,放化纯度为96．2％±3．1％。放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对^99Tc^m～CD44-McAb有较高的摄取,通过感兴趣区（Regional Interest,ROD技术测得肿瘤部位与对侧相应部位的放射性摄取比（T／NT）为2．29±0．56,明显高于对照组（P〈0．05）。标记抗体的小鼠体内分布结果与显像结果基本一致。以上研究结果说明,^99Tc^m-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的T／NT,CD44是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原之一。     

DTPA-2SN的合成及其99Tcm标记

合成了DTPA-2SN（二乙烯三胺二乙酰二磺胺），并对其化学结构进行了鉴定；制备了DTPA双酸酐（DTPAA），通过DTPAA与磺胺反应合成DTPA-2SN，并对其进行了99Tcm标记。采用n(K222):n( K2CO3)薄层层析法测定标记率，Sep-Pak C18小柱纯化，鉴定放化纯度。并观察其体外稳定性。结果显示DTPAA产率为85%，DTPA-2SN的产率为80%，二者经鉴定与其化学结构式相符。DTPA-2SN易于被99Tcm标记，标记率可达90%±3%。连续观察4h 99Tcm-DTPA-2SN放化纯度均大于90%，稳定性良好。     

Experimental study of triplex-forming oligonucleotide targeted to the initiator of S gene of HBV labeled with 125Ⅰ

This study is used to investigate the feasibility of employing the Iodogen method to label triplex-forming oligonucleotide (TFO) targeted to the initiator of the S gene of HBV with 125Ⅰ. A 17-mer oligonucleotides sequence was synthesized and grafted at the 5' terminal with a tyramine group. Radioiodination of the tyramine-TFO with 125Ⅰwas then performed using the Iodogen method. After TFO was labeled with 125Ⅰ using the Iodogen method, the labeling rate, the radiochemical purity, stability and bioactivity were determined, respectively. The results show that the radiolabeling rate and the radiochemical purity were 93% and 99%, respectively; and the radiochemical purity is more than 90% in vitro at -20℃ on the 5th day after labeling; and the rate of 125Ⅰ-tyramine-TFO binding to HepG2.2.15cells was (37.2±1.4) % and statistically different from the rate of HepG2 (p＜0.5). Hence, it is concluded that the labeling of oligonucleotides conjugated with tyramine using the Iodogen method is successful and is characterized with a high labeling rate, high stability, and a low loss of bioactivity of the labeled agent.     

细胞凋亡显像剂99Tcm-HYNIC-AnnexinV的制备及其生物评价

合成了双功能螯合剂琥珀酰亚胺-6-肼基吡啶-3-甲酸(Annexin V。并将HYNIC成功地应用于Annexin V的偶连和标记中：每个Annexin V的蛋白分子能偶连2个HYNIC，标记率为98.8%，标记物的放化纯度在6 h后仍然保持95.1%；99Tcm-HYNIC-Annexin V在动物模型中能有效检测细胞凋亡并有望成为效检测肿瘤治疗效果的显像剂     

Gd—DTPA—Dimeglumine的^99Tc^m标记及其生物学特性

以氯化亚锡为还原剂,^99Tc^m一步法标记了顺磁对比剂Gd—DTPA-Dimeglumine（钆喷酸二甲葡胺）,得到^99Tc^mGd-DTPA-Dimeglumine。薄层色谱法（TLC）分析标记物的标记率〉95％,可在室温稳定存放6h,放化纯度〉90％;三氯乙酸沉淀法测定^99Tc^m-Gd—DTPA-Dimeglumine的体外血浆蛋白结合率为2．25％±0．21％。小鼠体内生物分布结果显示,^99Tc^m-G＆DTPA—Dimeglumine主要经肾脏排泄,脑和肌肉组织摄取最少,所有脏器在注射后1min摄取达高峰,注射后5min滞留率下降大于50％,注射后30～60min标记药物在主要脏器内滞留很少,家兔肾动态显像结果显示,^99Tc^m-Gd—DTPA-Dimeglumine主要经肾脏排泄,达高峰时间约5min 半排时间约7min。^99Tc^m标记Gd-DTPA—Dimeglumine方法简单,标记效率高,Gd-DTPA—Dimeglumine经^99Tc^m怀记后其生物学性质基本未改变。本实验表明可以通过双功能螯合剂DTPA同时链接放射性核素^99Tc^m和顺磁性金属元素Gd,并有望在此基础上合成一种具有较好靶向性又可同时进行核医学SPECT和MRI增强扫描的显像剂。