金黄色葡萄球菌生物被膜的控制方法研究进展

金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性病原菌.金黄色葡萄球菌能够形成生物被膜,使其更加难于根除.文中对金黄色葡萄球菌生物被膜的控制方法进行了全面综述,包括去除已形成的生物被膜、杀灭生物被膜中的金黄色葡萄球菌和抑制生物被膜的形成3个主要方面,旨在为食品工业领域生物被膜的控制提供借鉴.     

金黄色葡萄球菌肠毒素在食源性微生物中的研究进展

由细菌污染引起的食源性疾病依然是影响人类公共健康和食品安全的最大问题之一。其中,金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,引起许多严重感染。金黄色葡萄球菌属于革兰氏阳性球菌,广泛分布于自然界,是引起化脓性疾病的重要病原菌,也是引起食品污染和细菌性食物中毒的一种重要细菌。食品受金黄色葡萄球菌污染后,不仅会腐败变质,而且部分菌株产生金黄色葡萄球菌肠毒素（Staphylococcal enterotoxins,SEs）而引起食物中毒,由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的首位。所以,对SEs的研究以及快速、精确的检测和筛查,成为关键环节。本文拟对金黄色葡萄球菌肠毒素生物学性状、致病．洼、检验方法等方面的研究进展进行综述。当然,对金黄色葡萄球菌及其主要致病因子肠毒素的研究有待进一步深入与发展。     

酸奶制作中金黄色葡萄球菌污染的模拟实验研究

金黄色葡萄球菌是乳制品中检出率较高的食源性致病菌.该论文采用模拟实验的方式,探讨了在金黄色葡萄球菌污染的情况下,酸奶制作过程中乳酸菌和金黄色葡萄球菌消长的动态规律,并初步估计了被污染酸奶中金黄色葡萄球菌耐热肠毒素的危害水平.研究结果显示,当发酵温度偏低、奶粉添加量偏高和金葡菌污染程度较高时,金黄色葡萄球菌生长速率和最大菌数明显提高.参考有关文献进行估算,对于一个体重为61kg的成人来说,如果酸奶食用量少于1300mL,一般不会有酸奶金黄色葡萄球菌耐热肠毒素中毒的危险;但对于儿童来说则有一定风险.本研究对于酸奶制作工艺控制及酸奶的安全消费具有参考意义.     

鉴定金黄色葡萄球菌的多重PCR方法

建立了一种快速鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。利用金黄色葡萄球菌的特异基因、耐甲氧西林基因和4种肠毒素基因nuc、mecA和sea、sec、sed、see建立6重PCR反应体系,并对PCR体系,引物浓度进行优化。6对PCR引物均能特异地扩出相应的目的基因。对47株金黄色葡萄球菌的检测结果与应用单重PCR鉴定结果完全一致。实验所建立的多重PCR方法能在一个反应体系中鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌,为食品中金黄色葡萄球菌的快速检测提供了一种有效的检测手段。     

食品中金黄色葡萄球菌计数方法的比较研究

比较食品中金黄色葡萄球菌计数的两种方法,寻找再现性较好的金黄色葡萄球菌计数方法。采用Baird-Parker琼脂倾注法与涂布法,对含一定浓度的金黄色葡萄球菌标准菌液、加菌样液进行计数,通过结果分析两种方法哪一种稳定性、重复性更好。金黄色葡萄球菌计数方法,利用Baird-Parker琼脂倾注法操作简便、结果稳定、再现性好。金黄色葡萄球菌计数方法,采用Baird-Parker琼脂倾注法,更加简便,便于推广。     

几种中草药对金黄色葡萄球菌体外抑制作用的研究

研究了板蓝根、五倍子、鱼腥草等10种常见中草药对金黄色葡萄球菌的抑菌作用.用平皿打孔法、两倍稀释法等不同方法分别测定不同浓度的中草药提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈的大小、最小抑菌浓度和最小杀菌浓度.抑茵圈的结果表明五倍子的抑菌效果最好,其次依次为黄芩、板蓝根、金银花、甘草、黄连、鱼腥草、虎杖与芦荟、黄芪;最小抑菌浓度和最小杀菌浓度结果显示金黄色葡萄球菌对所测试中草药的敏感程度不同,按抑菌浓度由小到大的顺序排列依次为五倍子、黄芩与金银花、板蓝根、甘草与黄连、虎杖与鱼腥草、黄芪、芦荟.可见所测试中草药对金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用.     

金黄色葡萄球菌溶血素基因分布的研究

目的:研究α-溶血素基因(hla)、β-溶血素基因(hlb)在金黄色葡萄球菌菌株中的分布情况,为金黄色葡萄球菌的防治及追溯提供依据.方法:以分离自人化脓组织、生牛乳以及生鲜肉等8类不同来源的376株金黄色葡萄球菌菌株为研究对象,利用PCR技术检测金黄色葡萄球菌溶血素基因的分布情况.结果:365株金黄色葡萄球菌被检出含有溶血素基因.总检出率为97.07%,其中α-溶血素基因总检出率为95.21%,β-溶血素基因的总检出率为73.93%.结论:各来源间金黄色葡萄球菌溶血素的检出率不同.且同一来源的菌株的hla和hlb检出率也不同,表明不同来源以及不同溶血素的基因型在金黄色葡萄球菌中的分布存在差异.     

噬菌体编码的金黄色葡萄球菌肠毒素A的 研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种人畜共患的食源性致病菌,并且能够产生不同种类的毒素,其中金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)是引起食物中毒的一类主要毒素。金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)在食物中毒事件中的检出率最高,毒性最强,成为目前研究的热点。编码金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因sea是由噬菌体携带并在菌体之间传播的。本研究主要综述了编码SEA的噬菌体与SEA之间的关系、SEA的分类、在不同的食品基质中环境因子对SEA产生量、sea基因相对表达量的影响及SEA新型的检测方法等,并介绍了目前金黄色葡萄球菌肠毒素研究的难点及研究方向的分析。     

不同金黄色葡萄球菌选择性分离平板效果比较及探讨

针对GB 4789.10-2010中Baird-Parker平板对金黄色葡萄球菌特异性低,选择性弱等问题,文章引入金黄色葡萄球菌显色平板进行补充和改进,结果显示显色平板上金黄色葡萄球菌菌落形态典型,颜色特异,具有良好的特异性和较强的抗干扰能力。定量比对结果显示Baird-Parker平板与显色平板上金黄色葡萄球菌数值无显著性差异,将显色平板应用于金黄色葡萄球菌的定量检测具有良好的适用性和较高的可行性。     

单冻生虾仁中金黄色葡萄球菌的风险评估

金黄色葡萄球菌对水产品的污染比较严重,大部分中毒事件来自于金黄色葡萄球菌产生的肠毒素.本文参照国际上风险评估的经验,按照CAC的规定,从危害识别、暴露评估和危害特性等方面客观地对单冻生虾仁中金黄色葡萄球菌进行了风险评估.最后对水产品加工企业提出了一些建议.     

肉制品微生物检测中金黄色葡萄球菌监测数据分析

现有的金黄色葡萄球菌监测数据分析方法存在精度低、完整度差的缺陷。针对上述问题,提出肉制品微生物检测中金黄色葡萄球菌的监测数据分析方法。根据金黄色葡萄球菌监测数据分析的需求,采用荧光定量PCR法对肉制品中的金黄色葡萄球菌进行快速检测,对检测中的金黄色葡萄球菌数据进行提取并分析。通过模拟实验进行数据分析,与现有的金黄色葡萄球菌监测数据分析方法相比较,发现提出的金黄色葡萄球菌监测数据分析方法极大的提升了分析的准确度与完整度,结果表明,所提出的金黄色葡萄球菌监测数据分析方法具有较好的分析性能。     

叶绿素镁钠盐对液态食品中Staphylococcus aureus的光动力杀菌研究

以叶绿素镁钠盐为光敏剂,研究了其对几种液体食品中金黄色葡萄球菌的光动力杀菌效果。结果表明,叶绿素镁钠盐对几种液态食品中的金黄色葡萄球菌具有很强的杀菌效果,其中以10-5mol/L的叶绿素镁钠盐杀菌效果最佳,10 min金黄色葡萄球菌减少了4.5个对数;随着光照时间的延长,液态食品中的金黄色葡萄球菌的致死率明显增加,特别是在起始10 min内;一般透光性好的食品包装材料对液态食品中金黄色葡萄球菌光动力杀菌效率没有影响,但液态食品的pH对其杀菌效率有一定的影响。对于不同的液态食品,在澄清或酸性的食品中叶绿色镁钠盐的光动力杀菌效果较好,但当食品中含固体颗粒或较浑浊时,其杀菌效率显著降低。     

金黄色葡萄球菌基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱的鉴定与聚类分型

目的 建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption lonization-time of flight mass spectrometer, MALDI-TOF MS)快速鉴定金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus)并自建数据库, 进行聚类分型。方法 基于MALDI-TOF MS技术, 对经全自动微生物分析仪(VITEK2 COMPACT)鉴定为S. aureus的25株分离株和1株标准菌株(ATCC 25923)进行鉴定。并进一步采集26株S. aureus特征性蛋白质指纹图谱, 使用flex Analysis软件进行分析, 汇总成标准图谱并构建本地分离株S. aureus的鉴定数据库, 命名为Staphylococcus aureus。结果 经标准菌株ATCC 25923验证, 自建数据库对S. aureus鉴定结果的可信度较设备自带数据库明显提高, 鉴定分值由2.251提高到了2.845。自建数据库进一步对26株S. aureus进行聚类分型, 在差异水平100时, 24株不同来源S. aureus被聚类成24个分支, 将食品中不同来源分离的S. aureus分为24个型。结论 MALDI-TOF MS作为一种快速、准确、高通量的全新微生物鉴定技术, 实现了对S. aureus的特异性快速鉴定与分型, 能够满足公共安全卫生、突发食品安全事件和口岸快速通关方面的需求。     

熟食肉制品中金黄色葡萄球菌风险评估基础研究

通过对上海市场所监测的396份散装熟食肉制品样品进行金黄色葡萄球菌及其肠毒素分析检测,样品中金黄色葡萄球菌阳性数70分,检出率为17.7%,金黄色葡萄球菌阳性样品中,金黄色葡萄球菌肠毒素阳性数60份,检出率85.7%。按样品种类和样品来源进行分析,金黄色葡萄球菌阳性数比例最高的样品是熏烧烤制品,为23.9%;农贸市场样品金黄色葡萄球菌阳性数比例最高,为22.1%。熟食肉制品中存在金黄色葡萄球菌及其肠毒素污染而且污染程度较高,因此有必要建立熟食肉制品中金黄色葡萄球菌及肠毒素的剂量-反应关系和风险评估模型,加强对熟食肉制品中金黄色葡萄球菌及肠毒素的检验和对食品企业生产安全监管。     

生乳中金黄色葡萄球菌产肠毒素特性及耐药性分析

了解生乳中金黄色葡萄球菌污染状况、产肠毒素特性及耐药性，为乳及乳制品的生产及制定HACCP以保证食品安全提供依据。采集省内20个奶牛场共209份生乳样品进行金黄色葡萄球菌的分离、产肠毒素（SEA—SEE）试验及耐药性试验。共检出金黄色葡萄球菌34株，检出率为16．27％，21株产肠毒素试验阳性，阳性率为61．76％，对青霉素、缸霉素、四环素、苯唑西林凝固酶阴性耐药性分别达88．24％、41．48％、35．29％、35．29％，并出现21种耐药谱。生乳中金黄色葡萄球菌的污染率及产肠毒素率较高，耐药性结果对人及畜的安全用药有指导性作用。控制生乳中金黄色葡萄球菌的污染对奶及奶制品食用安全有意义。     

肉鸡屠宰环节金黄色葡萄球菌污染定量评估研究

目的解析某大型肉鸡屠宰场中金黄色葡萄球菌的风险和关键防控点,为肉鸡屠宰过程金黄色葡萄球菌污染的科学防控提供指导。方法通过某大型肉鸡屠宰场金黄色葡萄球菌的监测和调研,应用@RISK 7软件建立金黄色葡萄球菌污染的定量评估模型,对肉鸡屠宰四个环节(烫洗煺毛、净膛、清洗预冷和分割传送)进行定量评估。结果初步探明了鸡肉中金黄色葡萄球菌在屠宰加工过程中的消长变化规律,清洗预冷环节和分割传送环节是金黄色葡萄球菌污染的主要风险环节,预冷池水中金黄色葡萄球菌浓度和工人手部带菌程度是肉鸡屠宰加工过程中金黄色葡萄球菌的关键风险点(相关系数分别为0.62和0.50)。结论对肉鸡屠宰环节的金黄色葡萄球菌进行关键控制点识别和精准采取控制措施,可有效保障终端鸡肉产品的卫生安全。     

冷诱导金黄色葡萄球菌环境胁迫耐受性及生物被膜控制

为研究金黄色葡萄球菌经冷诱导后对其他环境胁迫耐受性的变化,将耐冷冻能力较强的分离株S.aureus W3与标准菌株S.aureus CICC10201分别在4 ℃下冷胁迫5 h后,测定其在高温、酸碱、氯化钠、过氧化氢、酒精的胁迫下存活率变化。同时对分离株S.aureus W3的生物被膜形成及控制进行了研究。结果表明,经-20 ℃冷藏8周后,S.aureus W3的存活率显著高于S.aureus CICC10201(p<0.05)。经冷诱导后,S.aureus W3在45~60 ℃环境下存活率提升至18.5%。冷诱导使金黄色葡萄球菌对酸敏感性增强但对碱产生交叉抗性。冷诱导后的两株菌在氯化钠中的存活率均降低,S.aureus W3最低下降了24.09%。另外,冷诱导后金黄色葡萄球菌对酒精的耐受性增强。分离株S.aureus W3在冷诱导前后过氧化氢耐受性没有明显变化(p>0.05),但标准菌株S.aureus CICC10201敏感性增强,存活率显著下降(p<0.05)。分离株S.aureus W3较S.aureus CICC10201具有更强的生物被膜形成能力,运用1% 84消毒水能有效清除其生物被膜。本研究为冷冻食品中金黄色葡萄球菌的安全控制提供理论依据。     

Location of Staphylococcus aureus within the experimentally infected bovine udder and the expression of capsular polysaccharide type 5 in situ

The objective of this study was to locate Staphylococcus aureus in the bovine udder and to investigate the expression of capsular polysaccharide type 5 (CP5) in situ in both the early and chronic stages of experimental intramammary S. aureus infections. Bovine udder tissue was obtained in early and chronic stages of intramammary infection; i.e., 24 to 96 h and 122 d after experimental intramammary infection with S. aureus Newbould 305. The presence and location of S. aureus was investigated by Gram staining of tissue sections. The expression of CP5 by S. aureus in situ was investigated by immunochemical staining of tissue sections with specific antibodies against CP5. Both in the early and chronic stages of infection, S. aureus was located within the lumen of alveoli or lactiferous ducts, in association with the epithelium, and within phagocytic cells. The staphylococci were mainly observed in clusters and often in the presence of polymorphonuclear neutrophils. Expression of CP5 by S. aureus was observed both in the early and chronic stages of infection. In general, CP5-positive S. aureus were located in alveoli and in association with the mammary epithelium. In the chronic infection, CP5-positive S. aureus were also located deep in the interstitial tissue. These results indicate that--both in early and chronic stages of experimental S. aureus mastitis--colonization of the mammary epithelia and invasion into the interstitial tissue occurs and that CP5 is expressed by S. aureus Newbould 305 in situ. The invasion of S. aureus in the interstitial tissue and the expression of CP5 probably help the bacteria to withstand the host defense mechanisms.     

Diagnosis of Staphylococcus aureus intramammary infection by detection of specific antibody titer in milk.

The diagnostic value of the determination of Staphylococcus aureus antibody titer in milk as a method for identification of mammary quarters with S. aureus IMI was evaluated. Ten cows with a history of S. aureus IMI and 9 cows with no history of S. aureus IMI were sampled daily for 10 d. Quarter and composite milk samples were collected and processed by standard methods for concentration of S. aureus, S. aureus antibody titer (percentage of positive laboratory control), and SCC (cells per milliliter). Microbiologic culture identified 13 S. aureus-infected quarters from the 10 cows with a history of S. aureus IMI. Only 2 of the 130 samples (1.5%) from these infected quarters had undetectable concentrations of S. aureus. Antibody titers in milk from infected quarters of infected cows were below the previously established level considered to be indicative of IMI in 6 of 130 samples (4.6%). Four samples from infected quarters of infected cows had titers considered to be in the suspect range. The sensitivity of the antibody test was 83% (13% SE) when the suspect samples were included and 86% (12% SE) when they were not. Milk from uninfected quarters of cows with S. aureus IMI tended to have S. aureus antibody titers greater than the test's positive control, which would suggest that the quarters were infected with S. aureus. Antibody titer was below the infection threshold level in all pooled samples of uninfected cows, suggesting that the test correctly identified all cows free of S. aureus IMI.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

金黄色葡萄球菌在生乳与灭菌乳中生长状况分析

目的 了解并比较金黄色葡萄球菌(S.aureus)在生乳与灭菌乳中的生长状况.方法 采用GB/T4789.37-2008<食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验>,测定不同温度下金黄色葡萄球菌在生乳和灭菌乳中的生长情况,利用MicroFit 1.0软件对所测数据进行分析,利用SPSS统计软件对该菌在生乳与灭菌乳中生长参数进行统计分析.结果 金黄色葡萄球菌在生乳中的最大生长速率明显低于在灭菌乳中的最大生长速率,二者的迟滞期、代时无明显差异.结论 金黄色葡萄球菌在生乳与灭菌乳中的生长情况差异显著.有统计学意义(P<0.05).