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开发了以磁性多孔微粒作为载体固定化脂肪酶的方法,进行了载体的FTIR、XRD、SEM、TEM、BET、TGA和VSM等测定与分析,考察了固定化时间、酶载量和缓冲液pH值等因素对固定化酶在有机相中催化烯丙醇酮转酯化反应性能的影响。结果表明,制备的磁性微粒是以Fe3O4为磁核,呈现多孔,比表面积12.16 m2 /g,平均孔径为171.7 nm,磁铁含量38%并为超顺磁性;在酶与载体质量比为1∶1、pH值8.0及固定化时间6 h制得固定化酶的效果最佳,固定化酶的活力回收率可达240%。以其作为载体制备获得固定化酶操作稳定性得到显著提高,重复利用30批次后残余活力为74.5%,而游离酶7批次后仅为37.1%。 相似文献
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磁性微粒对青霉素G酰化酶的固定化研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将无机磁性粒子Fe3O4与有机材料海藻酸钠结合起来制成一种复合的磁性微粒,并将其进行表面修饰,通过化学共价法来固定青霉素G酰化酶。通过扫描电镜等对微粒进行形态学观察,并用傅立叶红外图谱表征微粒表面修饰基团。酶学性质研究表明,该微粒固定化的青霉素G酰化酶的最适pH值为7.5,最适温度为40℃。固定化酶与底物的亲和力有所降低,但是稳定性显著提高。重复催化研究结果表明,固定化酶具有比游离酶更广泛的温度及pH值适用范围,并且具有良好的热稳定性、可循环使用性和贮存稳定性。 相似文献
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以化学共沉淀法合成Fe3O4纳米粒子为磁核,采用乳化交联法制备磁性壳聚糖微球,并对其形貌、结构和磁饱和强度等性质进行了表征。以磁性壳聚糖微球作为载体,固定化猪肺粗提物中的血管紧张素转化酶,并对固定化条件进行研究。结果表明,固定化血管紧张素转化酶的最佳条件为:pH值为8.3,最佳温度为50 ℃,最佳时间为1.5 h,最佳酶溶液蛋白浓度为6 mg/mL,此时固定化酶活力最高为0.048 U/g微球。与游离酶相比,固定化酶的pH值稳定性和热稳定性均得到提高。固定化酶重复使用10次,仍然保持40%以上相对活力,说明磁性壳聚糖微球是固定化血管紧张素转化酶的良好载体。 相似文献
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《应用化工》2019,(11):2550-2554
采用水热法制备得到磁性Fe_3O_4纳米粒子,以壳聚糖、制备的Fe_3O_4为原料,采用乳化交联法成功制备了磁性壳聚糖微球,并通过SEM、FTIR、VSM、XRD对其进行表征。进一步以制备的磁性壳聚糖微球为载体,采用吸附法制备磁性壳聚糖微球固定化乳糖酶。以酶活力为考察指标,研究了不同固定化条件对制备固定化酶的影响,以及固定化酶的酶学性质。结果表明,乳糖酶的最佳固定化条件为:固定化时间4 h,pH为7.0,乳糖酶酶液浓度为0.6 mg/mL,固定化酶相对于游离酶的pH稳定性和温度稳定性均有一定程度的提高,固定化酶重复使用5次后,酶活仍保留65%以上。 相似文献
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《化工学报》2017,(4)
通过化学共沉淀法结合高锰酸钾氧化制备羧基化Fe_3O_4磁性微球,以该磁性微球作为载体,固定化谷氨酸脱羧酶。利用热重分析(TGA)、透射电镜(TEM)及振动样品磁强计(VSM)对羧基化磁性微球进行表征,结果表明该磁性微球磁含量约为95.1%,粒径均一,呈近似球形且具有超顺磁性。通过对固定化酶进行傅里叶红外光谱(FT-IR)、VSM和X射线衍射(XRD)分析,确定磁性微球载体与谷氨酸脱羧酶分子间形成酰胺键,实现共价结合且固定化酶前后粒子晶形完整,均具有良好的磁响应能力和超顺磁性。与游离谷氨酸脱羧酶相比,固定化酶的热稳定性和酸碱耐受性均有不同程度的提高,且制备的固定化酶重复使用10批后相对酶活力仍大于90%。 相似文献
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通过化学共沉淀法结合高锰酸钾氧化制备羧基化Fe3O4磁性微球,以该磁性微球作为载体,固定化谷氨酸脱羧酶。利用热重分析(TGA(、透射电镜(TEM(及振动样品磁强计(VSM(对羧基化磁性微球进行表征,结果表明该磁性微球磁含量约为95.1%,粒径均一,呈近似球形且具有超顺磁性。通过对固定化酶进行傅里叶红外光谱(FT-IR(、VSM和X射线衍射(XRD(分析,确定磁性微球载体与谷氨酸脱羧酶分子间形成酰胺键,实现共价结合且固定化酶前后粒子晶形完整,均具有良好的磁响应能力和超顺磁性。与游离谷氨酸脱羧酶相比,固定化酶的热稳定性和酸碱耐受性均有不同程度的提高,且制备的固定化酶重复使用10批后相对酶活力仍大于90%。 相似文献
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磁性琼脂糖复合微球固定化纤维素酶的研究 总被引:11,自引:0,他引:11
以磁性琼脂糖复合微球为载体,采用物理吸附法,制备出磁性固定化纤维素酶。确定了固定化工艺条件:pH2-2,吸附时间8 h,酶用量为150 mg/g 微球,在最佳固定化条件下,磁性固定化酶的活力为191-7 U/g 微球,蛋白载量为100 mg/g 微球,比活为1-9 U/mg 蛋白,活性回收率为73-1 % 。并对磁性固定化酶的理化性质进行了研究:磁性固定化酶的最适温度(55 ℃) 与天然酶相同,最适pH(5-0)较天然酶提高1-0 个单位,磁性固定化酶Km 值(4-1×10 -3g/L)较天然酶Km值(7-8×10-3 g/L) 小,热稳定性较天然酶有所提高,磁性固定化酶重复使用10 次,其相对活性保持在60 % 。 相似文献
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