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利用显微照相和DNA提取等技术,研究了外源紫杉醇作用于服浮培养南方红豆杉细胞(Taxus chinensis var.Mairei)的凋亡和对紫杉醇(taxol)的耐受性。利用荧光显微照相技术观察到,外源紫杉醇作用下,随培养时间延长,南方红豆杉细胞发生明显核分化,应用DNA电泳观察到细胞DNA断裂形成典型的180bp及其整数倍梯形条带(DNA.ladders) ,应用TUNEL检测发现DNA的3'-OH断端可被特异性标记,证实了加入紫杉醇后南方红豆杉细胞发生了凋亡。研究结果说明南方红豆杉细胞对紫杉醇的耐受性是有限度。并证明了植物细胞有类似于动物细胞的凋亡特征,也表明该体系可以作为研究植物细胞凋亡的实验模型。 相似文献
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硝酸银作用下南方红豆杉细胞悬浮培养生产紫杉醇动力学研究 总被引:4,自引:0,他引:4
研究了诱导子硝酸银对红豆杉细胞培养生产紫杉醇的影响,表明10μmolL^-1的硝酸银量有利于紫杉醇的生成,并通过动力学模型对硝酸银的作用位点进行分析,确定了硝酸银在紫杉醇代谢路径中的作用位点位于BaccatinⅡ和紫杉醇之间。 相似文献
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以红豆杉悬浮培养细胞为材料产紫杉醇,在细胞生长的不同时期分别用脉冲电刺激及微交流电刺激处理。结果表明,两种电刺激均不同程度促进了红豆杉悬浮培养细胞的生长、紫杉醇的产生,其中脉冲电刺激效果优于微交流电刺激。最佳作用时间是在红豆杉细胞生长的衰亡期,微交流电刺激的紫杉醇含量较对照提高3倍多,脉冲电刺激的紫杉醇含量约为对照的7~9倍,最高达到12.24 mg.L-1。脉冲电刺激可有效提高紫杉醇的胞外释放率,达对照的4~5倍。 相似文献
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The production of paclitaxel from suspension culture of Taxus chinensis var,mairei was improved by in situ extraction with organic solvents to avoid feedback repression and product degradation.Oleic acid and dibutyl phthalate were proved to be suitable solvents .The optimal volumetric percentage of organic solvents in the culture medium was found to be around 8%,and the favorable time for their introduction was at the exponential phase of cell growth,Paclitaxel production with the in situ extraction was ca 3-fold of that without extraction. 相似文献
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建立了摇瓶中南方红豆杉细胞两液相培养过程动力学模型 ,提出的有机溶剂毒性参数 1 0 /lgP使建立的模型不仅能确切反映两液相培养细胞生长和紫杉醇生产随时间、不同的有机溶剂 (烷烃、有机酸、醇和酯 )和有机溶剂体积分数等的变化规律 ,而且将有机溶剂毒性参数 1 0 /lgP取为 1、有机溶剂体积分数取为 0时模型可确切反映单液相培养细胞生长和紫杉醇生产的变化规律 .根据模型求解和结果分析 ,深入研究了这些变化规律的机理 . 相似文献
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采用高效液相色谱法对野生和人工栽培南方红豆杉约20年生植株各器官、组织中紫杉醇含量进行检测分析后发现,紫杉醇在南方红豆杉植株中具有极显著向下、向根际积累分布的规律。野生和载培红豆杉,在器官水平,从上部枝叶到根部须根,紫杉醇的积累分别为 0.007 61 %~0.100 54 %和 0.015 25 %~0.061 75 %(干重,质量分数,下同);在组织水平,从形态学上部到根部,木质组织中紫杉醇积累分别为 0.010 95%~0.044 76 %和0~0.017 58 %,周皮组织中紫杉醇的积累量也具有从形态学上部到下部增高的规律,在主枝皮中的含量分别为 0.013 32 %和 0.006 77 %,在根皮中的含量分别为 0.086 33 %和 0.059 74 %。野生南方红豆杉中紫杉醇产量比人工栽培的要高。分析过程中紫杉醇在21~105 mg/L范围内线性关系良好,r2为0.999,平均加标回收率为85.78%,相对标准偏差为1.03%。 相似文献
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运用顺磁共振、电镜、能谱等手段研究了寡聚糖对红豆杉细胞氧化还原生理态势的影响 .结果表明 ,诱导前红豆杉细胞处于相对稳定的生长态势 ,细胞完整 ,细胞器发达 ;氧化还原电势较低 ,活性氧相关酶系统相对稳定 ,细胞初生代谢旺盛 ,紫杉醇合成速率很低 .诱导后红豆杉细胞向产物合成态势转移 ,SOD酶活性迅速提高 ,CAT和POD酶活被强烈抑制 ;细胞出现活性氧迸发 ,4h达最大值 ;细胞的氧化还原电势增高 ,细胞膜上离子通道被激活 ,H+ 和Ca2 + 内流 ,Cl-外流 ;液胞内出现大量含Ca2 + 离子的高电子致密区并呈规律性变化 ,培养环境碱化 ;细胞生长被抑制 ,紫杉醇合成速率升高 ,其产量提高了 5.5倍 ,达 76.1mg·L-1. 相似文献
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固定化对红豆杉细胞膜脂肪酸组分和紫杉醇合成的动态影响 总被引:1,自引:0,他引:1
采用气相色谱法对红豆杉细胞膜的脂肪酸组分进行了测定,研究了在固定化状态下红豆杉细胞膜脂肪酸组分与紫杉醇合成的动态变化关系.结果表明,固定化细胞的停滞期缩短.同时膜脂肪酸代谢也发生了显著的变化,从第20天后,膜亚油酸和亚麻酸的含量开始增多,而硬脂酸的含量开始下降,油酸的含量没有变化,膜脂肪酸组分趋向不饱和化,脂肪酸的不饱和指数(IUFA) 增高.与此同时紫杉醇的含量也大幅度上升.固定化细胞的紫杉醇含量与IUFA变化有较好的同步性,而与硬脂酸的含量变化呈负指数关系. 相似文献
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纯种芳樟及其组培苗叶油的分析报告 总被引:3,自引:1,他引:3
本文介绍了“纯种芳樟”的寻找与发现过程 ,利用组织培养育苗后叶油化学成份变化规律 ,为芳樟的组织培养育苗、栽种提供了令人信服的理论依据 相似文献