顺铂诱导的人肺腺癌多药耐药细胞株辐射敏感性的体外研究

对顺铂（Cisplatin，CDDP）诱导的人肺腺癌多药耐药单克隆细胞株SPC—A-1／CDDP-4及其亲代SPC-A-1细胞体外的辐射敏感性进行研究。分别在有氧和乏氧条件下检测SPC-A-1，CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞内谷胱甘肽（Glutathione，GSH）的含量，对SPC-A-1／CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞体外的辐射敏感性进行研究，观察GSH生物合成抑制剂丁胱亚磺酰亚胺（Buthionine sulfoximine，BSO）对SPC-A-1／CDDP-4细胞和SPC—A-1细胞的辐射增敏作用。实验结果表明：单克隆细胞株SPC—A-1／CDDP-4不仅对化疗药：CDDP、阿霉索（Adriamycin，ADM）、甲氨蝶呤（Methotrexate，MTX）和长春新硷（Vincristine，VCR）具有多药耐药性，而且对^137Csγ射线也具有一定的交叉耐受性；这可能与SPC—A-1／CDDP-4细胞的GSH含量无论是在有氧或乏氧条件下，均高于亲代的SPC-A-1细胞有关；BSO在有氧和乏氧条件下对SPC-A—1/CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞均有辐射增敏作用，但是乏氧条件下的辐射增敏作用大于有氧，对SPC-A-1／CDDP-4细胞的辐射增敏作用大于对SPC—A-1细胞的辐射增敏作用。     

有机硒牛磺酸制剂辐射防护作用小鼠试验研究

采用60Coγ射线全身照射清洁级昆明种小鼠,观察口服给予有机硒牛磺酸制剂对小鼠30天存活情况、骨髓有核细胞数和微核、超氧化物歧化酶（SOD）活力和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）活性、免疫功能的影响。试验结果显示：与单纯照射组相比,给药组小鼠30天存活率提高显著,平均存活天数提高7.9 d;给药组GSH和抗体积数升高显著;中剂量和高剂量SOD活性增强;高剂量脾脏系数升高显著。     

谷胱甘肽含量同肿瘤辐射敏感性的相关性研究

实验从细胞和动物水平研究射线对肿瘤细胞中谷胱苷肽(GSH)合成的影响,分析GSH含量同肿瘤辐射敏感性的相关性;评价GSH合成抑制剂-丁胱亚磺酰亚胺(BSO)的辐射增敏效果,探讨以外周血单核细胞中GSH含量监测肿瘤患者对射线敏感性的可行性。实验结果表明,射线可以引起肿瘤细胞中GSH含量的升高,抑制肿瘤组织中GSH的合成,可以显著增强肿瘤细胞对射线的敏感性,外周血单核细胞和肿瘤中GSH含量变化一致且与肿瘤细胞对射线的敏感性相关。     

增敏化合物BSO对细胞微核率的影响

本文报道用微核胞质分裂阻断法研究BSO(丁胱亚磺亚酰胺,Buthione Sulfoximine)对细胞微核率的影响。研究结果表明BSO对正常人外周血淋巴细胞、BCa-P 37人乳腺癌细胞、中国仓鼠V79细胞和中国仓鼠CHO细胞在用药浓度0.1-2mmol/L情况下,微核发生率与未用药组无显著性差异,在~(60)COγ射线照射下,细胞的微核发生率与辐射剂量呈线性关系,当照射合并BSO时,微核发生率明显增加,表示BSO对细胞具有增加电离辐射的损伤作用。     

X射线辐射对小麦幼苗生长及一些抗氧化酶活性的影响

萌发４８ｈ的小麦幼苗用Ｘ射线处理，高剂量Ｘ射线（８Ｇｙ、１４Ｇｙ）可导致小麦幼苗生长受抑制，鲜重降低，在Ｘ射线照射后第２ｄ和第４ｄ测定幼苗内蛋白质含量、抗坏血酸过氧化物酶（ＡＳＡ－ＰＯＤ）、谷胱甘肽过氧化酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）及谷胱甘肽巯基转移酶（ＧＳＨ－Ｔｓ）活性的变化。结果可知：Ｘ射线可引起小麦幼苗内蛋白质含量的下降，１４ＧｙＸ射线照射的样品低于８Ｇｙ照射的，照射后第４ｄ的蛋白质含量高于照射后第２ｄ的，说明Ｘ射线引起的损伤可随照射后的培养而有所恢复；高剂量Ｘ射线可引起小麦幼苗内一些抗氧化酶活性的升高，且随照射剂量的增加酶活性的升高也越明显，在照射后第４ｄ幼苗的ＡＳＡ－ＰＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性高于照射后第２ｄ的值，ＧＳＨ－Ｔｓ活性略有下降。而低剂量（２Ｇｙ）照射与对照相比，上述指标变化不大，说明Ｘ射线处理后可通过诱导这些抗氧化酶活性的升高起到减轻伤害的作用。     

细胞质受照射的遗传损伤效应

通过使用精确单粒子微束装置照射人与中国仓鼠杂交AL细胞细胞质,显示α粒子照射细胞质只有轻微的致死率,照射16个α粒子后仍有76％的细胞可以存活。诱变试验结果发现,尽管单个α粒子照射细胞质在CD59基因位点诱变频率较低,但8个或多于8个α粒子可诱导出高于未受照射对照3倍的诱变频率聚合酶链式反应（PCR）分析发现,照射细胞质诱导的CD59^-基因突变子其11号染色体上Wilms肿瘤（WT）、过氧化氢酶（CAT）、（H－rasRAS)、甲状旁腺激素（PTH）、（脱脂蛋白－A1 APO－A1）等基因缺失率很小,其突变谱类似于自发突变子的突变谱。DMSO或BSO处理细胞的研究显示,自由基清除剂DMSO可降低照射细胞质所诱发的CD59基因突变频率;与此相反,能与细胞内的谷胱甘肽结合的BSO可增加突变频率。结果表明,自由基很可能是照射细胞质诱发突变的主要原因之一。此外,用IF7单克隆抗体进行的8－羟基脱氧鸟苷免疫过氧化物酶染色反应发现照射细胞质可在核内引起DNA的氧化损伤。     

小剂量照射的抑癌增强作用及其对皮肤组织的影响

本文采用H22肝癌小鼠肿瘤模型探讨小剂量照射的抑癌增强作用的优化剂量和作用机制。实验结果剂量辐射具有抑癌增强作用，与化疗组相比联合治疗组种瘤生长速度显著降低（P＜0．01），腹水癌细胞死亡率显著增加（P＜0．01）。小剂量照射与环磷酰胺协同杀伤癌细胞可能是其机制之一。^60Coγ线照射对荷瘤小鼠皮肤Zn含量有一定程度的影响。本实验条件下既有抑癌增强作用又地皮肤Zn含量影响较小的优化剂量为14cGy。     

大鼠尿液中γ辐射损伤特征代谢物

目的：探讨γ辐射对大鼠尿液代谢物的影响,初步筛选与γ辐射损伤密切相关的特征尿代谢物。方法采用核磁共振技术对60 Coγ射线单次照射（剂量率0．7 Gy/min ,剂量6．0 Gy ）后不同时间点（照射前1天及照射后第1、2、3、4、8、18、30、45天）和分次照射后不同累积剂量点（剂量率18 mGy/min ,累积剂量分别为0、0．2、0．4、0．6、0．8、1．0 Gy ）大鼠尿液的代谢成分进行检测。主成分分析法（PCA ）和偏最小二乘法（PLS-DA ）分析检测数据。筛选单次照射和分次照射所致辐射损伤的共同特征代谢物。结果单次照射后,大鼠尿牛磺酸、脯氨酸相对含量在照后第1～45天持续偏高;分次照射后,尿牛磺酸、脯氨酸相对含量均有随剂量增加而增加的趋势。结论γ辐射可导致大鼠长期代谢紊乱。尿牛磺酸、脯氨酸相对含量与照射剂量有相关性,可作为γ辐射损伤的特征代谢物。     

60Coγ射线对AT细胞SOD活性和MDA含量的影响研究

研究毛细血管扩张性共济失调症（AT）患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA（AT细胞）的应对电离辐射导致细胞氧化损伤的能力。以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM063（GM细胞）为对照,采用超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（Malondialdehydc,MDA）测定试剂盒,AT细胞和GM细胞经60^Coγ射线0、1、2、3、4Gy照射后,观察比较它们的SOD活性和MDA含量的差异,并分别进行曲线拟合。结果显示在1、2、3、4Gy剂量照射下,AT和GM细胞中SOD活性均随受照剂量增加而明显降低（P〈0．01）,同一剂量点的AT细胞中SOD活性明显低于GM细胞（P〈0．05）;AT和GM细胞中MDA含量均随受照剂量增加而升高（P〈0．05）,同一剂量点的AT细胞中MDA含量明显高于GM细胞（P〈0．05）。AT细胞和GM细胞的SOD活性和MDA含量均与照射剂量呈线性关系。结果表明由于AT细胞中SOD活性降低,导致AT细胞应对辐射的氧化损伤能力不足,引起AT细胞中MDA含量增加,是AT细胞高辐射敏感性的原因之一。     

N-乙酰半胱氨酸对HT22细胞辐射诱导氧化应激及增殖和凋亡的影响

为探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)对辐射相关氧化应激和海马神经元HT22细胞的增殖及凋亡的影响。首先选用不同剂量(0、2、4、6、8、10、12 Gy)的X射线分别照射HT22细胞,筛选出最佳照射剂量(10 Gy),然后进行实验分组:空白对照(Control)组,单纯照射(RT)组,照射+NAC(RT+NAC)组,照射后继续培养24 h后,CCK-8法检测细胞增殖、AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平以评估细胞内氧化应激程度,比色法测定细胞内谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性,Western blot检测Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达变化。结果表明,(1)2 Gy的照射对细胞增殖的影响不明显,当辐射剂量大于2 Gy时,随着辐射剂量的增高,HT22细胞增殖率明显降低(p<0.05);辐射剂量达10 Gy时,细胞增殖抑制率接近50%,因此将10 Gy作为实验最佳辐射剂量。(2)给予10 Gy X射线照射前给予NAC预处理可明显增加HT22细胞的增殖率(p＜0.01)。(3)给予10 Gy X射线照射可明显增加细胞内ROS、MDA含量(p＜0.01),减少细胞内GSH含量和SOD的活力(p＜0.01),促进凋亡蛋白Bax、Cleaved-caspase-3的表达(p＜0.01),细胞凋亡率显著增加(p＜0.01);NAC可减少照射后细胞内ROS和MDA含量(p＜0.01),提高GSH水平及SOD活性(p＜0.01),显著减少凋亡蛋白的表达和细胞凋亡。以上结果表明NAC可抑制辐射相关氧化应激,减少辐射对HT22细胞增殖抑制,减少细胞凋亡。     

细胞谷胱甘肽含量与放射增敏研究

谷胱甘肽（ＧＳＨ）是一种内源性放射防护物质，在正常状况下大部分以还原型存在于细胞和组织中，本研究结果表明，通过外源性化学修饰剂丁胱亚磺酰亚胺（ＢＳＯ），可用效地抑制细胞内ＧＳＨ的生物合成，从而使内源性ＧＳＨ含量下降，在１ｍｍｏｌ／ＬＢＳＯ作用后２４ｈ，可使原有ＧＳＨ含量从４．６７６８４×１０＾－１２ｍｍｏｌ／ｃｅｌｌ下降至０．５０９２×１０＾－１２ｍｍｏｌ／ｃｅｌｌ为对照组的１．０９％，ＢＳＯ的抑     

组织对辐射脂质过氧化应激反应的特点

为了探讨不同组织对辐射脂质过氧化应激反应的特点,测定了不同剂量(500、1000和2000rad)照射和照后不同时间小鼠红细胞(RBC),血浆、小肠等的SeGSH-Px活性。实验结果说明,各组织的反应类型各不相同,可以归纳为四类:(1)不能合成SeGSHPx的组织,如成熟RBC。它的变化特点是,照后酶活性降低,降低的程度随着照射剂量的增加而增加,大剂量(2000 rad)照射还随着照后时间的延长而增加;(2)能合成SeGSHPx的非辐射敏感组织如肝,它能对脂质过氧化损伤产生反应,但当剂量大到足以损伤肝细胞时,SeGSHPx活性的增加程度就小,严重损伤时(2000 rad照射)酶活力相反地降低;(3)辐射敏感组织如脾,由于照射脾细胞的大量坏死,它的SeGSHPx活性变化似乎受网状细胞相对含量的影响,反映的不完全是淋巴细胞SeGSHPx活性。辐射敏感组织小肠在2000 rad照射时,由于肠粘膜的广泛脱落表现为酶活性的降低。但当受损的敏感组织新生时(1000 rad照射)可以显示酶活性增加,(4)血浆SeGSHPx活性的变化主要是照后降低,一个时期的升高主要是由于大量脾细胞破坏而致的酶的释放。     

乳腺癌术后放疗时靶外组织剂量的研究

本文借助非均匀组织等效拟人体模型,模拟成年女性左侧乳腺癌术后放疗,研究了医用电子直线加速器产生的９ＭｅＶ电子束和６ＭＶ Ｘ射线对乳腺癌放疗时靶外组织的受照剂量。结果表明,单次照射剂量２．０Ｇｙ时,在胸壁照射区域,电子束照射时体表的受照剂量较高,位于野内左后壁的剂量明显低于野外右乳腺的剂量,野外组织受照剂量波动较大,Ｘ射线照射时野外组织受照剂量波动较小,受照剂量最高的具有一定深度的纵隔;     

低剂量碳离子诱导的哺乳动物细胞适应性反应的研究

研究了高ＬＥＴ的碳离子对Ｖ７９细胞和Ｂ１６细胞的低剂量效应。细胞经０．０２Ｇｙ和０．０５Ｇｙ的诱导剂量处理后,继续培养４ｈ,再经１Ｇｙ攻击剂量处理,从存活率和微核率两方面研究了细胞的适应性反应。结果表明：经０．０２Ｇｙ诱导剂量处理以后,两种细胞在存活率和微核率方面分别表现为明显的提高和下降,相反,经０．０５Ｇｙ诱导剂量处理以后,细胞 存活率方面没表表现出有统计学意义的差别,在微核率方面表现出协同损     

人卵巢癌耐药细胞株的放射敏感性研究

为了研究具有耐药性的卵巢癌细胞系对放射线治疗的影响,以人卵巢癌细胞株A2780及其紫杉醇耐药株A2780/Taxol为研究对象,以MTT法检测细胞的药物敏感性并评判分析细胞放射敏感性;克隆形成实验分析细胞放射抗拒性;实时荧光定量PCR分析照射前后细胞耐药基因MDR1的变化。实验结果显示：A2780／Taxol的耐药指数为43．96;随着放射剂量增大,A2780细胞和A2780／Taxol细胞的相对存活率明显下降,以A2780细胞明显（p〈0．05）;A2780细胞及其耐药A2780／Taxol细胞仇值分别为4．90和6．06,D0越大,放射抗拒性越强,表明耐药A2780／Taxol细胞的放射抗性强于A2780细胞（p〈0．01）;照射前及不同剂量照射作用后,耐药基因MDR1在A2780／Taxol细胞中的表达均明显高于A2780细胞（p=0．000）。这些结果揭示耐药卵巢癌细胞株A2780／Taxol对辐射具有耐受性,表明卵巢癌细胞系具有放化疗交叉耐受性,并且射线和药物诱导卵巢癌细胞耐药基因MDR1的过表达,可能是引起放化疗交叉耐受性的原因之一。     

聚乙烯辐射交联与结晶结构的变化

通过傅里叶变换红外光谱、激光拉曼光谱、小角激光散射以及凝胶渗透色谱等，研究了室温辐照聚乙烯的结晶结构变化。辐照交联聚乙烯的红外光谱表明，作为聚乙烯晶区特征吸收的７３０ｃｍ＾－１吸收峰，１４６３ｃｍ＾－１和１４７４ｃｍ＾－１劈裂吸收峰均随辐照剂量而变化。拉曼光谱的峰位不随剂量而改变，但其强度却随之减小。经硝酸腐蚀的试样，其凝胶渗透色谱测得的数均分子量，随着辐照剂量的增加而增加，表明晶区内分子数减少。     

辐射后NFS-60细胞G-CSF受体特性的研究

为深化造血细胞辐射损伤分子机制的认识，应用受体放射分析法观察不同剂量照射的NFS—60细胞照射后不同时间粒细胞集落刺激因子(G—CSF)受体特性的变化。结果表明，NF5—60细胞照射后30min G—CSF受体的Kd值和Bmax值随着照射剂量的增大而增加，其中Kd值增加更为显著；照射后24h，1Gy照射细胞的Kd值及Bmax值已有恢复，3、5Gy照射细胞的Kd值未见下降，其Bmax值反而较照射后30min增加更为显著。提示照射后G—CSF受体Kd值的增加可能是造血细胞辐射损伤的原因之一。     

SOD对肿瘤细胞凋亡影响和抗氧化损伤的研究:Ⅲ.SOD对受分次照射的荷瘤小鼠肿瘤细胞脂质过氧化影响及分子机制

以荷瘤小鼠为动物模型,研究了全身照射下注射超氧化物歧化酶(SOD)对肿瘤细胞脂质过氧化、肿瘤组织端粒酶活性、肿瘤原癌基因c-Jun蛋白表达的影响。研究发现,SOD能增加S180肉瘤及Lewis肺癌组氧化产物丙二醛(MDA)含量,降低S180肉瘤谷胱甘肽(GSH)含量及血清超氧化物歧化酶总活力(T-SOD)、匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX-Px)活力;降低Lewis肺癌组GPX-Px及T-SOD活力,不影响GSH含量;降低H22肝癌组GPX-Px的活力,不影响MDA、GSH含量及T-SOD活力。SOD明显降低接受电离辐射的S180肉瘤及H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织中端粒酶的阳性表达率,减少原癌基因c-Jun蛋白在S180肉瘤、Lewis肺癌荷瘤鼠中的表达。这一辐射增敏作用因肿瘤的种类而不同,可能与SOD在不同肿瘤中对癌基因c-Jun蛋白表达和端粒酶活性影响及药物在不同器官的代谢差异有关。