天麻多糖提取与自由基清除作用研究

目的:研究活性天麻多糖的提取与自由基清除作用.方法:以水提醇沉法制备天麻粗多糖,CTAB季铵盐络合法、凝胶过滤柱层析进一步纯化;利用Feton体系和邻苯三酚自氧化反应,采用比色法测定天麻多糖对OH·及O2-·自由基的清除作用.结果:通过正交实验获得天麻多糖提取工艺为料水比1:40、浸提温度80℃、提取次数2次,75%乙醇沉淀;在相同的试验体系浓度下,天麻粗多糖及纯化多糖对OH·的IC50分别为1.18、1.62 mg/mL;对O2-·的IC50分别为0.81、1.03 mg/mL.结论:天麻多糖对氧自由基具有较佳清除能力.     

两种羊肚菌胞内多糖体外抗氧化性

用水提醇沉法提取北京羊肚菌(MB)和淮阴羊肚菌(MH)菌丝体胞内多糖(IPS1),经脱色及脱蛋白得纯化多糖(IPS2)。采用水杨酸法测定IPS1 和IPS2 对·OH 的清除作用;邻苯三酚自氧化法测定IPS1 和IPS2 对O2·的抑制作用。结果表明： IPS1 和IPS2 均能明显地清除·OH 和抑制O2·的能力,在1～5mg/mL 质量浓度范围,抗氧化活性随质量浓度的增加而增加。MB 和MH 提取的IPS1 和IPS2 清除O2·能力差异不显著,MB 和MH 提取的IPS1清除·OH 能力的差异也不显著,MH 提取的IPS1 和IPS2 之间清除·OH 能力差异显著,质量浓度为5mg/mL 时,IPS1 清除能力只有22.57%,而IPS2 清除能力高达46.27%,表明MH 的胞内多糖的清除·OH 能力明显高于MB 胞内多糖。     

密楝和吴茱萸果实多糖的体外抗氧化和抑菌活性研究

采用水提醇沉法提取密楝和吴茱萸果实中粗多糖,苯酚-硫酸法测定粗多糖含量。在体外化学模拟条件下,测定密楝和吴茱萸果实粗多糖对羟自由基(·OH)、H2O2和DPPH自由基的清除作用。细胞培养板液体稀释法测定密楝和吴茱萸粗多糖最小抑菌浓度。同时,将密楝果实多糖的抗氧化活性和抑菌活性与吴茱萸果实多糖的活性进行对比。体外实验结果表明：蜜楝果实多糖对·OH、H2O2和DPPH自由基清除能力EC50分别为0.8、0.25mg/mL和0.9mg/mL;吴茱萸果实中粗多糖对·OH、H2O2和DPPH自由基清除能力EC50分别为1.0、0.1mg/mL和0.8mg/mL。两种多糖均表现出较强的清除活性,对H2O2和·OH清除活性尤其明显,而且在相同质量浓度下对H2O2的清除活性明显高于VC。抗菌实验表明,吴茱萸粗多糖的抑菌、杀菌活性强于密楝粗多糖的活性。     

大球盖菇多糖超声波提取及抗氧化活性

以大球盖菇为原料,通过正交试验L9(34)研究超声波提取多糖的工艺条件。结果表明,最佳提取工艺条件为提取温度65℃、提取时间1.0 h、超声波功率600 W、料液比1∶35(g/mL),此条件下,大球盖菇多糖得率为8.16%。提取效果影响大小的先后顺序为提取时间>提取温度>提取功率>料液比。应用化学发光法对大球盖菇粗多糖的清除·OH和·O2-自由基的能力进行了研究,结果表明:大球盖菇粗多糖对·OH和·O2-自由基均具有明显的清除能力,清除·O2-自由基的IC50为108.60μg/mL,清除·OH自由基的IC50为345.98μg/mL,大球盖菇粗多糖对·O2-自由基的清除能力是对·OH自由基的清除能力的3.2倍。     

决明子水溶性多糖的纯化及抗氧化活性研究

本研究采用水提醇沉法提取决明子粗多糖,并通过二次醇析和H2O2氧化脱色对其进行了精制,H2O2氧化脱色能有效地去除决明子粗多糖中的蛋白性杂质。决明子多糖抗氧化实验表明:决明子多糖清除Smirnoff反应产生羟自由基(·OH)具有一定的清除作用;决明子多糖体系浓度达到0.022mg/ml时对邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基(O2·)产生明显抑制作用。     

大白桩菇多糖的结构鉴定及清除自由基活性

利用水提醇沉法提取大白桩菇粗多糖,用酸性乙醇分级、SepharoseCL-4B以及Sephadex G-100柱层析分离纯化得到大白桩菇多糖（DBZG4-b）。采用高效液相色谱法检测DBZG4-b均一性及相对分子质量。经气相色谱、纸层析、红外光谱、甲基化、气相色谱-质谱、核磁共振方法解析DBZG4-b的结构。结果显示,DBZG4-b为均一性多糖,相对分子质量约为6 864;DBZG4-b为多分支结构多糖,主链由Glc和Gal构成,均以1→6糖苷键连接,Glc在3位上有分支,Gal在4位上有分支;支链由Ara、Glc、Gal构成,其中Ara以1→3连接,Glc以1→3连接,Gal以1→4连接,Ara、Xyl、Rha、Man、Glc、Gal都有一部分构成分子的末端残基。清除·OH与1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基实验表明,DBZG4-b具有良好的清除自由基能力。     

黄伞菌丝体多糖的分离鉴定及其抗氧化性研究

黄伞菌丝体烘干后经热水提取,乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖经Sevag 法除蛋白后DEAE- 纤维素柱层析,分离得到两种多糖组分PAMP Ⅰ和PAMP Ⅱ。红外光谱分析表明PAMP Ⅰ和PAMP Ⅱ均为含有葡萄糖醛酸的β-D-吡喃葡聚糖。采用化学比色法测定黄伞菌丝体多糖在体外的总抗氧化能力、抑制活性超氧阴离子自由基的能力、清除羟自由基的能力及对小鼠肝组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的的影响。结果表明：一定浓度范围内不同纯度的黄伞菌丝体多糖均有总抗氧化能力,能清除O2·和·OH 及抑制MDA 的生成,且呈现一定剂量关系。表明黄伞菌丝体多糖在一定浓度范围内具有抗氧化作用。     

平菇菌丝体多糖的分离纯化和体外抗氧化活性

采用酶法提取平菇菌丝体多糖,通过L9(34)正交试验考察加酶量、温度、时间、pH 值对平菇菌丝体多糖提取率的影响,确定其最佳提取条件;通过DEAE-32 离子交换层析和Sephadex G100 凝胶过滤纯化平菇菌丝体多糖,DPPH 自由基清除作用测定抗氧化活性,紫外光谱扫描和薄膜电泳方法鉴定多糖的纯度;利用化学比色法检测其对O2－·和·OH 的清除能力和对小鼠红细胞溶血抑制程度。结果表明：平菇菌丝体多糖最佳提取条件为加酶量1.0%、温度55℃、时间2h、pH5.3,最佳条件下多糖提取率为(4.91 ± 0.15)%;纯化后的多糖能清除O2－·和·OH 及抑制红细胞溶血的生成,且呈现一定剂量关系。表明平菇菌丝体多糖在一定浓度范围内具有体外抗氧化作用。     

巢湖蓝藻酸性多糖的理化性质及其体外抗氧化作用

目的：以从巢湖蓝藻中分离纯化的一种多糖（acidic polysaccharide from Cyanobacteria of Chaohu,CHAP）为研究对象,对其纯度、分子质量、光谱特征、单糖组成、抗氧化作用进行研究,旨在为水华蓝藻资源进行综合开发利用提供有价值的参考。方法：采用60 ℃的热水抽提蓝藻,采用硫酸铵去除其中蛋白质,粗多糖经DEAE-52阴离子交换层析柱分离并用Sephadex G-150进行纯化得到纯化多糖CHAP。结果：CHAP中多糖和蛋白质含量分别为91.49%和0.18%,紫外-可见光谱表明CHAP不含核酸,高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）测定CHAP的分子质量为2.209×105 D,离子色谱（ion chromatography,IC）表明CHAP由6.36%的阿拉伯糖、35.47%的葡萄糖、5.03%的木糖、17.09%的半乳糖、27.36%的甘露糖及一种未知单糖构成。红外光谱表明CHAP是具有α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰的吡喃糖,CHAP的抗氧化作用表明：CHAP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和超氧阴离子自由基（O2－·）有较强的清除能力,其IC50分别为276 μg/mL和186.05 μg/mL。CHAP对羟自由基（·OH）的清除能力较弱,清除率不到10%。     

贵长猕猴桃多糖提取工艺及体外抗氧化功能

研究贵长猕猴桃果肉多糖、果皮多糖的提取工艺及体外抗氧化能力。采用正交试验优化贵长猕猴桃果肉、果皮多糖提取工艺参数,蒽酮-硫酸法测定多糖含量;用邻苯三酚自氧化及Fenton反应法测定贵长猕猴桃多糖抗氧化活性。结果表明：果肉多糖最优提取工艺参数为提取温度80 ℃、提取时间2 h、料液比1∶35（g/mL）,重复提取3 次,多糖提取率可达1.74%;果皮多糖最优提取工艺参数为提取温度70 ℃、提取时间2 h、料液比1∶25（g/mL）,重复提取3 次,多糖提取率可达1.16%。贵长猕猴桃果肉粗多糖、果皮粗多糖对O2 － •和•OH均具有很好的清除作用,果肉多糖清除O2 － •和•OH的IC50分别是12.4、41.3 μg/mL,果皮多糖清除2 种自由基的IC50分别是84.1、50.8 μg/mL。     

红薯叶黄酮分离纯化工艺及抗氧化性研究

本实验以红薯叶为原料,研究了黄酮类化合物分离纯化工艺,并研究了粗提物与纯化产物对羟基自由基、1,1- 二苯基-2- 苦基肼自由基(OPPH·)的清除作用。结果表明,红薯叶黄酮最佳提取工艺为60% 乙醇水溶液90℃回流提取60min,料液比1:40,粗提物中总黄酮含量为101.3mg/g。提取液用HPD500 大孔树脂进行纯化效果好,最佳纯化工艺为：吸附条件：上样原料液黄酮含量1.8mg/ml,pH3 上样流速为3BV/h;洗脱条件：50% 乙醇、流速3BV/h,流量4BV,在此条件下,纯化产品黄酮含量为488.7mg/g;粗提物与纯化产物均具有对自由基的清除作用,是一种有效的天然抗氧化剂新资源。     

天麻水提物活性成分分析及其抗氧化活性

目的:测定天麻水提物中营养成分含量及其抗氧化活性。方法:采集湿天麻,炮制后烘干粉碎,热水回流提取,脱色,冷冻干燥得到天麻水提物干粉,进而测定天麻水提物中水分、灰分、淀粉、粗蛋白、粗脂肪、总多糖、碳水化合物、总多酚、总黄酮、原花青素和天麻素等成分含量,并通过4种方法评价了天麻水提物的抗氧化活性。结果:天麻水提物中水分、灰分、淀粉、粗蛋白、粗脂肪、总多糖和碳水化合物的含量分别是4.60、1.55、40.30、9.21、4.01、38.24、79.80 g/100 g,矿物质中钾元素的含量最高,为25477.45 mg/kg;天麻水提物中总多酚、总黄酮和原青花素含量分别为17.0、9.0、3.3 mg/g,天麻素和对羟基苯甲醇的含量为2.87%和0.64%。通过超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)检测到7种多酚成分,其中荭草素的含量最高,为161.96 mg/100 g。天麻水提物具有一定的还原能力和对自由基的清除能力,且随着提取物浓度的升高,其还原力和对自由基的清除能力以剂量依赖性方式增强。在实验范围内其最大浓度的抗氧化活性最强,其中天麻水提物浓度为0.2、10、1、0.1 mg/mL时,总还原力、DPPH·清除率、OH·清除率、O₂-·清除分别达到1.05、90%、76%和58%。结论:天麻水提物具有较高的营养价值和一定的抗氧化活性,开发和应用前景广阔。     

酶-超声辅助提取苦荞秆中总黄酮及抗氧化活性研究

以秦巴山区苦荞秆为原料,通过单因素结合正交试验研究了纤维素酶-超声辅助提取苦荞秆中总黄酮的工艺条件,并考察其对羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基正离子的清除活性及还原能力。结果表明,苦荞杆总黄酮的最佳提取工艺为：纤维素酶10 mg/g,乙醇体积分数40%,超声温度40 ℃,超声时间30 min,料液比为1∶40（g∶mL）,该条件下总黄酮的得率为2.30%,苦荞秆总黄酮对羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基正离子的半抑制浓度IC50值分别为0.18 mg/mL、0.24 mg/mL和2.24 μg/mL,强于同浓度条件下天然抗氧化剂维生素C。     

剑麻花提取物的抗氧化活性研究

本实验分别就剑麻花乙醇提取物石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相以及剑麻花多糖对DPPH·、·OH和O2·三种自由基的清除率进行了测定,并与合成抗氧化剂TBHQ、BHT进行对比。结果表明,剑麻花提取物各相对DPPH·、·OH和O2·三种自由基均有一定的清除效果。且清除率与浓度存在剂量依赖关系。其中以乙酸乙酯相对DPPH·的清除效率最高,而正丁醇相对O2·清除率最高;在浓度为64μg/ml下剑麻花提取物石油醚相对·OH的清除率最高,而乙酸乙酯相和正丁醇相对·OH的清除率与合成抗氧化剂TBHQ和BHT相近。提示剑麻花提取物石油醚相是一种潜在的羟自由基清除剂。另外,在相同浓度下,剑麻花多糖对·OH 和O2·的清除率均低于剑麻花乙醇提取物各相。     

亚麻籽双液相萃取中醇相组分体外抗氧化活性研究

采用体外实验方法对亚麻籽双液相萃取中乙醇相的氯仿、正丁醇和水三种提取物进行抗氧化活性研究。结果表明:乙醇相三个萃取组分中,以正丁醇提取物抗亚油酸氧化能力最强,比BHT略弱。氯仿提取物次之,强于VC,水提取物最弱。在对[DPPH·]自由基的清除能力上,正丁醇提取物最强,IC50为3.1μg/ml,比芦丁(IC50=3.38μg/ml)强。水提取物略弱于BHT,氯仿提取物最弱;正丁醇提取物对[·OH]自由基的清除能力最强,IC50为18.15μg/ml,比芦丁(IC50=7.96μg/ml)弱。氯仿提取物次之,水提取物最弱;正丁醇提取物螯合Fe2+的能力最强,氯仿提取物次之,而水提取物最弱。     

天麻藤茶红茶复合饮料工艺优化及其抗氧化活性研究

以天麻、藤茶、红茶为主要原料,研究天麻浸提液、藤茶浸提液、红茶浸提液、白砂糖和柠檬酸添加量对天麻藤茶红茶复合饮料感官品质的影响,以感官评分为指标,采用响应面法优化天麻藤茶红茶复合饮料工艺,并对其营养成分和抗氧化活性进行测定。结果表明,最优工艺条件:天麻浸提液添加量12%,藤茶浸提液添加量45%,红茶浸提液添加量5%,白砂糖添加量6%,柠檬酸添加量0.06%。该条件下复合饮料总黄酮(0.127±0.0083)mg/g,总酚(0.131±0.0079)mg/g,可溶性糖(23.709±0.295)mg/g,还原力(3.524±0.031)mg/mL,羟基自由基清除率32.1%±1.86%,DPPH自由基清除率89.4%±2.07%,表明该复合饮料抗氧化能力良好。本试验制得复合饮料口感好、色泽均匀、呈淡黄色,具有天麻藤茶红茶复合饮料独特的香气。     

海芦笋提取物体外抗氧化活性的研究

通过测定海芦笋水提物、醇提物、海芦笋粗多糖和精多糖还原能力及对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)的清除能力,研究海芦笋提取物的抗氧化活性。结果表明：海芦笋水提物、醇提物和多糖对·OH 都有较强清除作用,但清除能力均低于对照物VC;在相同浓度下,各提取物的还原能力和对·OH 的清除能力呈相同趋势,均是海芦笋水提物较醇提物强,粗多糖较精多糖强。但海芦笋水提物和多糖在实验所选浓度范围内,对邻苯三酚自氧化没有抑制作用,而醇提物显示出一定抑制活性。     

葡萄酒泥酵母制备水溶性β-D-葡聚糖工艺优化及其纯化后抗氧化性分析

以诱导自溶后的葡萄酒泥酵母细胞壁为试材,采用蛋白酶水解法,通过响应面分析法确定制备水溶性β-D-葡聚糖的最佳工艺条件,将粗品经Sephacryl S-400 HR凝胶柱层析纯化后,对其抗氧化性进行分析。结果表明,酶解制备水溶性β-D-葡聚糖的最佳工艺条件为浸提温度60℃、加酶量247 U/m L、p H 7.5、浸提时间1.5 h,得率为80.91%。凝胶柱层析纯化后得到3种组分,比例依次为组分Ⅰ68.08%、组分Ⅱ13.97%、组分Ⅲ8.79%,其中组分Ⅰ分子质量为100 065.18 D。纯化后的水溶性β-D-葡聚糖清除ABTS~+·、羟自由基、DPPH自由基、O_2~-·和螯合Fe~(2+)的EC50值分别为2.035、6.352、16.773、5.238、1.061 mg/m L,具有良好的抗氧化活性。     

核桃饼粕多酚纯化工艺及其抗氧化活性的研究

研究大孔树脂纯化核桃饼粕多酚的工艺,比较AB-8、HPD-100、D101、X-5、NKA-9五种大孔树脂对核桃饼粕多酚的分离纯化效果。结果表明,HPD-100为分离纯化核桃饼粕多酚的最佳大孔树脂,其最佳纯化工艺为上样液pH值为4.0,质量浓度4.0 mg/mL,流速2 BV/h,体积1.8 BV,以体积分数为75%乙醇洗脱,洗脱流速4 BV/h,洗脱体积3 BV。用该工艺纯化后,核桃饼粕多酚的纯度从26.63%提高到81.10%,回收率为87.33%。纯化后的核桃饼粕多酚对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟基自由基（·OH）、过氧化氢（H2O2）和超氧阴离子自由基（O-2·）清除作用均呈现量效关系,半数抑制浓度IC50分别为481.18 μg/mL、151.43 μg/mL、8.19 μg/mL和202.83 μg/mL,对DPPH和·OH清除能力较VC强,具有深入研究的价值。     

天麻酵素的发酵工艺优化与品质评价

以天麻粉为原材料制备天麻酵素，通过单因素试验结合响应面试验优化天麻酵素发酵条件，并评价发酵处理对天麻品质的影响。结果表明，天麻酵素的最佳发酵工艺条件为发酵剂用量0.3%、糖添加量11%、发酵温度35 ℃、发酵时间14 d。此优化条件下制得的天麻酵素具有一定的功能性成分和抗氧化活性，天麻酵素中对羟基苯甲醇的含量为0.69 g/L，功能性成分γ-氨基丁酸、对羟基苯甲醛含量分别为0.010 4 mg/mL、0.023 mg/mL，1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率、超氧化物歧化酶（SOD）活力、总抗氧化能力（T-AOC）分别为82.37%、5.31 U/mL、2.19 μmol/mL。天麻酵素颜色呈橙红色、体系透明、香气浓郁、滋味协调。