玉米蛋白粉中叶黄素和玉米黄素对口腔癌细胞DNA的损伤作用

研究玉米蛋白粉中叶黄素和玉米黄素对人口腔癌KB细胞的作用机制。在人口腔癌KB细胞的细胞培养液中分别加入40μL/L、60μL/L叶黄素和30μL/L、40μL/L玉米黄素,分别培养48h、72h。用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测叶黄素和玉米黄素对人口腔癌KB细胞DNA损伤程度。玉米蛋白粉中叶黄素和玉米黄素可引起KB细胞DNA链断裂,细胞尾长、尾DNA百分含量和尾矩显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。叶黄素和玉米黄素能导致人口腔癌细胞KB的DNA损伤,抑制肿瘤细胞生长。     

番茄红素对体外肿瘤细胞抑制作用的研究

以纯度≥99%的番茄红素晶体为研究对象,通过体外培养入宫颈癌细胞（Hela）、人黑色素瘤细胞（LiBr）进行抑制肿瘤能力试验。MTT法、细胞生长曲线测定、平板克隆形成试验结果显示,番茄红素对体外培养Hela、LiBr细胞有显著的抑制作用（p＜0．01）,培养96h后半数抑制浓度(IC50)分别为10．2μmol/L和10．8μmol/L．存在显著的剂量-效应、时间-效应关系。培养10d后Hela各处理孔未见细胞集落形成,LiBr各处理孔仅有少量细胞集落形成。培养48h后,两种细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）水平显著升高,番茄红素使Hela、LiBr细胞膜损伤,提示番茄红素对Hela、LiBr细胞的抑制与直接杀伤有关。     

枸杞多糖诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的形态学研究

采用热水法提取药材枸杞子中的枸杞多糖。本研究通过MTT 实验发现3.125～200mg/L 质量浓度范围内的枸杞多糖能显著抑制宫颈癌Hela 细胞的增殖;采用荧光显微镜、透射电镜和激光共聚焦扫描显微镜观察发现经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现出典型的凋亡特征;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法进一步证实经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现凋亡特征。结果提示枸杞多糖是一种潜在的抗癌复合物,其关键作用机制是诱导癌细胞凋亡。     

辣木生物碱抑制宫颈癌Hela细胞增殖和诱导其凋亡的作用

研究辣木(Moringa Oleifera. Lam)叶生物碱对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。通过采用MTT法、克隆形成法、流式细胞术和western blot法检测经不同浓度辣木生物碱(20~320μg/mL)处理48 h后的Hela细胞增殖、凋亡情况和蛋白表达水平。研究结果表明,随着辣木生物碱浓度的增加,Hela细胞的存活率逐渐下降,当辣木生物碱浓度为160μg/m L时,细胞的存活率为35.87%(p<0.001),人正常结肠细胞NCW460的存活率为91.91%;克隆形成实验表明,辣木生物碱(40~160μg/mL)显著抑制Hela细胞克隆形成,抑制率分别为26.04%(p<0.05)、37.19%(p<0.01)和67.77%(p<0.001);当浓度为80μg/m L时,Hela细胞形态发生明显变化;进一步流式细胞术分析得知,Hela细胞内的凋亡细胞数随着辣木生物碱浓度的增加而增加,当细胞经160μg/mL辣木生物碱处理48 h后,其细胞内凋亡细胞数为42.10%(p<0.001),通过对凋亡蛋白表达水平检测发现,Bax/Bcl-2比率和Caspase9表达水平随着辣木生物碱浓度的增加而增加,当辣木生物碱浓度达到80μg/mL时,与对照相比有显著性差异。此外,辣木生物碱显著降低Stat3蛋白磷酸化水平和Cyclin D1蛋白表达水平,当辣木生物碱浓度达到160μg/m L时,与对照相比有显著性差异。以上实验结果表明,辣木生物碱具有抑制Hela细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制Stat3信号通路活化相关。     

γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用

为了探讨γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,采用MTT、分裂指数、集落形成、形态学观察法测定细胞活力,Hoechst 33258荧光染色法和DNA ladder法检测检测细胞凋亡。结果表明:γ-生育三烯酚能够显著抑制HT-29细胞的增殖(P0.05),且存在剂量-效应关系,其48 h半数抑制浓度(IC 50)为35.45μmol/L;形态学观察和DNA ladder结果显示受试物能够诱导HT-29细胞凋亡。γ-生育三烯酚对人结肠癌HT-29细胞具有生长抑制作用,此作用可能与其凋亡诱导效应有关。     

垫状卷柏总黄酮的抗氧化和抗肿瘤活性

目的:研究垫状卷柏总黄酮的抗氧化能力,以及对人宫颈癌细胞Hela、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人前列腺癌细胞PC-3M的生长抑制作用。方法:采用Fenton法、邻苯三酚自氧化法、DPPH法和还原力测定法评价垫状卷柏总黄酮的体外抗氧化能力。CCK-8法检测垫状卷柏总黄酮的抗肿瘤细胞增殖活性。结果:在总黄酮质量浓度为20~100μg/m L之间,垫状卷柏总黄酮对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除率随总黄酮质量浓度升高而增高,半数清除率EC_(50)分别为111.86、89.24、26.51μg/m L;对Hela、PC-3M和MDA-MB-231细胞的抑制作用在总黄酮质量浓度为6.59~79.02μg/m L范围内均呈剂量依赖性,作用时间为72 h的抑制率高于48 h的抑制率。结论:垫状卷柏总黄酮抗氧化活性作用能力强,对Hela、PC-3M和MDA-MB-231细胞具有显著的增殖抑制作用。     

玉米蛋白粉中玉米黄素对人口腔鳞癌细胞株KB增殖的抑制

研究了玉米蛋白粉中玉米黄素的抗肿瘤活性。采用体外培养的人癌细胞株——人口腔鳞癌KB细胞作为对象，观察玉米黄素对抑瘤活性、细胞周期的影响，发现玉米黄素对KB细胞24h的半数抑制浓度IC50为35μmol／L，在20μmol／L时即明显抑制KB细胞的对数生长；细胞周期分析显示时相左移，G1期细胞百分率增多，S期、G2＋M期百分率降低．DNA凝胶电泳显示30μmool／L玉米黄素作用72h能使KB细胞的DNA发生明显的降解．因此从玉米蛋白粉中提取的玉米黄素能明显抑制KB细胞生长，其抗肿瘤活性强，对细胞周期的影响提示G0期阻滞．     

普洱茶水提物抗肿瘤的实验研究

应用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测普洱茶水提物对6种不同肿瘤细胞株生长抑制作用以及流式细胞仪分析普洱茶水提物对Hela细胞凋亡的影响;采用裸鼠移植瘤模型,观察普洱茶水提物对宫颈癌的治疗作用。体外细胞毒活性检测显示,普洱茶水提物对人肝癌BEL-7402、胃癌MGC-823、乳腺癌MCF-7、子宫颈癌He La及结肠癌HT-29均有抗肿瘤作用,其中普洱茶水提物200μg/m L浓度下肿瘤细胞生长抑制率可达79%以上。普洱茶水提物能诱导Hela细胞发生凋亡,当浓度为100μg/m L,细胞凋亡率为(50.92±5.38)%。荷瘤鼠实验结果显示:连续给药28 d,普洱茶水提物1.0 g/kg剂量组、0.5 g/kg剂量组对人宫颈癌Hela移植瘤抑制率分别为40.3%、22.4%。普洱茶水提物在体外和体内均具有一定的抗肿瘤作用。     

蛋清源活性肽对过氧化氢诱导的HEK293细胞谷胱甘肽抗氧化系统的影响

研究了蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN、AD的体外氧自由基吸收能力(ORAC活性),以及其对过氧化氢诱导的HEK293细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、GSH/GSSG比值以及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的影响。结果表明,浓度为5.0μmol/L的蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN的ORAC活性均强于Trolox,AD没有ORAC活性。过氧化氢诱导的HEK293细胞氧化损伤模型组细胞中GSH含量由(173.52±2.87)μmol/L降至(115.85±2.03)μmol/L(P0.01),GSSG含量由(0.90±0.08)μmol/L升至(33.23±0.68)μmol/L(P0.01);细胞中加入不同浓度的蛋清源活性肽,GSH含量与损伤组相比,显著升高(P0.05),GSSG含量与损伤组相比明显降低(P0.01),在0.5μmol/L WNWAD作用下GSSG含量由(33.23±0.68)μmol/L降至(0.96±0.02)μmol/L (P0.01),接近对照组细胞中GSSG含量;GSH/GSSG比值由损伤组的3.49±0.68提至174.22±0.13(P0.01)。蛋清源活性肽处理过的细胞中γ-GCS mRNA表达量相对于损伤组有不同程度增加,其中5.0μmol/L WN处理过的细胞中γ-GCS m RNA表达量最大,为8.53±0.06。以上研究结果表明,蛋清源活性肽能有效清除活性氧,减少GSH消耗,从而使细胞内γ-GCS含量减少。蛋清源活性肽能促进γ-GCS mRNA的表达,使GSH的合成增加,起到氧化应激抑制作用。     

枸杞蜜的抗氧化活性及其对DNA氧化损伤的保护作用

以青海枸杞蜜为研究对象,在测定其总酚、总黄酮含量和抗氧化活性基础上,采用彗星电泳技术,研究了枸杞蜜对羟基自由基诱导的小鼠淋巴细胞DNA氧化损伤的保护作用。结果表明,枸杞蜜不仅能够有效地清除自由基,而且具有较强的抗氧化活性,枸杞蜜的抗氧化活性与其总酚含量有关(p<0.05),Fe2+络合力与其总黄酮含量相关(p<0.01)。彗星电泳结果表明,枸杞蜜能够显著降低羟基自由基诱导的小鼠淋巴细胞DNA的氧化损伤,与模型组相比,加入枸杞蜜的保护组彗星尾部DNA比例、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)显著降低(p<0.05),且与枸杞蜜浓度存在明显的剂量-效应关系,线性回归方程决定系数依次为:R2=0.9775,R2=0.9341,R2=0.9425。本文的研究结果将为枸杞蜜功能性食品的开发利用提供依据。