固定化酶载体的研究进展

作为固定化酶技术的重要组成部分,载体的结构及性能在很大程度上直接影响着固定化酶的催化活性及操作稳定性。综述了近年来国内外有关固定化酶载体材料的研究现状和发展趋势。     

酶固定化载体材料的研究进展

酶固定化的载体材料必须与酶的非催化活性基团发生有效结合方能使固定化酶发挥其催化酶解作用,载体材料的确定是酶的固定化技术关键。随着化学工业的不断进步,研发出众多具有特殊结构且功能各异的新材料,推动了载体固定化酶技术的发展。结合目前固定化酶技术的研究现状和应用情况,本文介绍了酶的固定化载体常用的高分子材料、磁性材料、纳米材料和介孔材料的研究现状,比较了上述材料与酶的结合机制。简述了固定化酶的制备方法和应用形式,并对固定化酶载体材料的研究进展进行了总结,以期对酶的固定化材料研究提供参考。     

接枝淀粉作为固定化酶载体研究进展

该文综述接枝淀粉用作固定化酶载体应用情况,通过接枝不同类型单体,淀粉将具有不同理化性质。以接枝淀粉为固定化酶载体主要方法有:共价结合法、物理吸附法或包埋法;以接枝淀粉为载体固定化酶主要有:糖化酶、葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶、α-淀粉酶、α-胰凝乳蛋白酶和脲酶等。     

酶固定化技术及载体材料研究新进展

本文介绍了近十年来国内外有关酶固定化技术及载体材料研究的最新研究成果，并对6-疏基壳聚糖、磁性葡萄糖、脂质体和聚醚氨与P（CH2OH）3生成的高聚物膜等多种新型载体的特性、固定化方法以及固定化效果进行了详细讨论。     

酶解淀粉载体固定化脲酶的研究

脲酶是-种来源广泛的植物蛋白酶,能高效、专一的催化尿素分解.本文采用酶解木薯淀粉为载体对脲酶进行固定化,研究了温度,时间、pH,醛基含量等因素对固定化脲酶活力的影响,得出酶解淀粉载体固定化脲酶的最佳条件为:反应温度25℃,反应时间6h,反应pH值7.0,载体与酶的配比为1:1(mL/g).     

甲壳素、壳聚糖作为固定化酶载体的研究进展

介绍了甲壳素、壳聚糖作为裁体的酶的固定化条件及固定化方法,并介绍其活力回收率及稳定性。甲壳素、壳聚糖来源丰富,可以通过多种方法进行处理用作固定化酶载体。     

甲壳素、壳聚糖作为固定化酶载体的研究进展

介绍了甲壳素、壳聚糖作为载体的酶的固定化条件及固定化方法,并介绍其活力回收率及稳定性。甲壳素、壳聚糖来源丰富,可以通过多种方法进行处理用作固定化酶载体。     

高性能淀粉基酶固定化载体的制备研究

本实验采用生物酶法对淀粉进行处理,然后再用高碘酸钠对酶处理淀粉进行氧化,制备出了高性能的淀粉基酶固定化载体.对淀粉水解率、反应时间、温度、pH、高碘酸钠的浓度和高碘酸钠和淀粉的摩尔比等对载体性能的影响进行了研究.制备出的载体具有较强的吸附性能和大量的醛基,对酶具有较强的固定化能力.     

壳聚糖在固定化酶载体上的应用

本文简要地介绍了壳聚糖的简单定义、性质及其在生物催化载体上的应用实例。     

纤维载体固定化酶的制备及其应用

介绍了以纤维为载体固定化酶的制备技术,包括传统固定化技术(物理吸附法、包埋法、离子结合法和共价结合法)和新型的固定化技术(光辐射法和生物分子法),分析了以纤维为载体的酶固定化技术在纺织领域的应用及存在的问题,展望了以纤维为载体的酶固定化技术的发展前景。     

氨基化硅胶作载体固定化α-淀粉酶的研究

采用5 种硅胶作为载体,戊二醛作偶联剂,制备了固定化α- 淀粉酶。对制备固定化α- 淀粉酶的硅胶目数、偶联剂浓度、温度、pH 值的影响因素进行了研究和优化。并对固定化酶和游离酶的酶学性质进行了比较。结果表明：固定化酶的最适温度为75℃,比游离酶提高了10℃,固定化酶的热稳定性优于游离酶。与游离酶相比,其对酸碱的适应性、贮存稳定性、操作稳定性也都有较明显改善。固定化酶的Km 值略低于游离酶,前者为2.13mg/ml,后者为1.02mg/ml。     

新型球形纤维素螯合吸附剂对Cr6+、Ni2+的吸附性能研究

研究了同时含有咪唑基和羧基两种官能团的球形纤维素螯合吸附剂(SCCA)对Cr6+、Ni2+的静态吸附性能,并探讨了SC-CA对Cr6+、Ni2+混合溶液的选择吸附性。结果表明,SCCA对Cr6+具有较强的吸附能力,吸附符合Langmuir吸附等温式,吸附容量随吸附温度的升高而增大,当反应温度为60℃、反应时间为2 h、溶液pH值为1时,饱和吸附容量为53.48 mg/g;SCCA对Ni2+的吸附能力弱,吸附符合Langmuir和Freundlich吸附等温式;吸附过程中,Cr6+和Ni2+扩散初期的速度控制步骤都是由表面扩散和颗粒内扩散联合控制;在Cr6+、Ni2+两种离子共存时,SCCA对Cr6+具有良好的吸附选择性,在30℃条件下,当溶液pH值为1时,其吸附选择系数为26.38。     

Fractionation of Starch by Gel Filtration on Agarose Beads

A chromatographical system consisting of a Sephadex G 200 column and an agarose 2B or 4B column was used for fractionation of native starches. Fractionation of the amylose and amylopectin components was achieved, and the amylose part of starch was subfractionated according to its molecular weight. The molecular weight of amylopectin is beyond the fractionation limit of the agarose and seems to be higher than 20 × 10⁶.     

Immobilization of Glucose Isomerase on Radiation-Modified Gelatine Gel

Whole-cell glucose isomerase immobilization on radiation-modified gelatine gel was demonstrated. The enzyme was stabilized within the cells by heat-treatment at 70°C. The heat-treated cells were mixed with radiation-modified gelatine gel and cross-linked by glutaraldehyde. Immobilized enzyme exhibited 70–75% activity as compared to the free cells. Several properties of immobilized glucose isomerase were studied under various reaction conditions. A continuous isomerization was performed using a column packed with cell granules. It has been found, that the half-life of the immobilized glucose isomerase amounted to 650 h at 60°C.     

壳聚糖-铜(Ⅱ)配合物固定化青霉素G酰化酶

目的壳聚糖与CuSO4络合为壳聚糖铜后以高分子配位键法固定化青霉素G酰化酶,考察固定化酶的性质。方法单因素优化固定化条件,对Cu^2＋浓度、络合时间、pH、温度、加酶量进行L16（4^5）的正交试验,获得最佳固定化条件,并研究固定化酶的最适反应温度、pH及批次稳定性。结果最佳固定化条件为：壳聚糖直接与Cu^2＋络合制备壳聚糖铜载体,Cu^2＋浓度／0．1g·mL^-1,络合时间16h;载体0．3g,酶量1mL,pH4．9,温度30℃,固定化25h。最高固定化酶活性为65U／g湿载体,固定化酶最适反应温度60℃,最适pH9．0,固定化酶具有较好的保存稳定性。结论壳聚糖-铜（Ⅱ）配合物固定化青霉素G酰化酶的活性高,具有一定的应用潜力。     

一种复合酶的固定化及应用研究

以壳聚糖为原料制备了壳聚糖微球,并通过扫描电镜对微球的形态和结构进行了表征。以自制的壳聚糖微球为载体固定化复合酶,分别通过单因素试验和正交试验,对影响酶固定化效果的因素及固定化酶的酶学性质进行了考察,并采用HPLC对其应用于催化京尼平苷制备京尼平的效果行了研究。结果表明:壳聚糖微球平均粒径约为2 mm,表面呈多孔结构。酶固定化最优化条件为:吸附时间4 h,交联时间1 h,交联剂质量分数0.2%。固定化酶的最适温度为60℃,游离酶最适温度55℃,且固定化酶温度稳定性比游离酶高;固定化酶与游离态酶的最适pH5.0,且固定化酶pH稳定性比游离酶高;固定化酶在使用8次以后剩余酶活力仍在50%以上;固定化酶湿态储存适合短期内使用和储存,干态储存适合长期储存。采用此固定化方法制得的固定化酶催化京尼平苷水解制备京尼平效果良好。     

壳聚糖固定化海藻糖合酶

利用壳聚糖作为载体,将大肠杆菌BL21异源表达且纯化后的海藻糖合酶(TreS),采用吸附法制备成固定化酶。固定化单因素实验结果表明,最适海藻糖合酶与壳聚糖的加入量为32.0 mg/g,最适吸附时间为2.5 h。固定化酶最适反应温度为40 ℃,最适反应pH为6.0,酶活回收率为40.17%,重复使用9次后,固定化酶酶活残留率为64.64%,重复使用性良好。在4~60 ℃范围内放置20 min后,固定化酶的相对酶活均高于87%,与游离酶相比温度稳定性没有明显变化。在pH3.5~8.5范围内放置20 min后,固定化酶的相对酶活均高于60%,酸碱稳定性优于游离酶。反应进程试验结果表明,2 h时海藻糖得率达最大,为61.4%。     

聚乙烯醇复合凝胶固定化黑曲霉细胞研究

以聚乙烯醇(PVA)复合凝胶为载体,利用冻融法固定产α葡萄糖转苷酶的黑曲霉M1菌丝。由于PVA冻胶的多孔性,高分子底物可以穿透载体与细胞酶直接反应。细胞经过固定化后,机械性能和化学稳定性都得到提高,可以重复多次对甲基αD葡萄糖苷进行水解反应。同时对该自由细胞和固定化细胞进行酶学特性研究。发现2者的最适pH值同为pH6.0,最适反应温度分别为55℃、60℃。固定化细胞的Vm值为2.84μmol/(L·min·g),大于自由细胞的Vm1.71μmol/[L·(min·g)],固定化细胞的Km(11.88mmol/L)小于自由细胞的Km(20.50mmol/L)。细胞经固定化,提高了细胞酶的操作、温度和贮藏稳定性。