阿魏酸酯酶的制备

阿魏酸酯酶是一种新型酶制剂,在食品、饲料和造纸工业中都有着广阔的应用前景,但目前还没有工业化产品。文中研究了超滤和冷冻干燥制备阿魏酸酯酶的工艺条件,结果表明,酶液pH值为8.06时有利于酶蛋白截留;装液厚度为6mm时,酶粉剂冷冻干燥时间为24h;添加1%～2%的聚乙二醇可以保护酶液在冷冻干燥过程中不失活;阿魏酸酯酶的液体和固体产品在保存过程中均表现出了较好的稳定性。     

阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程的影响

以晒青毛茶为原料,研究阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程中活性物质的影响。利用高效液相色谱法以及分光光度计法测定茶叶中各种活性物质含量的变化。实验结果表明,发酵8 d后茶叶的水浸出物、还原糖、阿魏酸及低聚木糖均比晒青毛茶高,茶汤的p H值及游离氨基酸含量下降。在晒青毛茶中同时添加3 m L(75 U/m L)阿魏酸酯酶和3 m L(75 U/m L)木聚糖酶,在发酵第8天阿魏酸及低聚木糖分别可达838. 9μg/g及3. 78μg/g,比不添加任何酶的茶样分别高20. 9%及38. 6%。在晒青毛茶发酵过程中,同时添加阿魏酸酯酶与木聚糖酶有利于提高茶叶的品质,从而提升茶叶的附加值。该研究结果对发酵型茶的保健功效提供一定的理论依据。     

小麦与小麦芽阿魏酸酯酶酶活力的测定及其酶学性质研究

以阿魏酸乙酯作为底物,确定了阿魏酸酯酶的酶解工艺条件:酶解时间100 min;酶液与底物的体积比为0.75;提取液pH值6.2。针对阿魏酸酯酶酶学性质的研究表明:最适温度60℃,30～35℃范围内热稳定性较强,保温60 min后其活力可保持在80%以上;最适反应pH值5.0,在pH值5.0～5.6范围内对阿魏酸酯酶的破坏力相对较小,保温60 min其活力仍可保持在80%以上;Cu2+和Zn2+对阿魏酸酯酶有强烈的抑制作用,而ED-TA则对其有明显的促进作用。对5种小麦及其麦芽的阿魏酸酯酶酶活力进行测定:麦芽中的阿魏酸酯酶酶活均高于小麦,其中以烟2415、鲁麦21、郑麦004变化较大。     

阿魏酸酯酶对麦汁过滤性能的影响

研究比较了过滤性能良好的Scope大麦麦芽与存在过滤问题的单二麦芽的水溶性蛋白质组差异,发现参与阿拉伯木聚糖降解的阿拉伯木聚糖呋喃糖苷酶、阿魏酸酯酶存在较大差异,对水溶性阿拉伯木聚糖成分分析发现,单二麦芽中具有较高含量的阿魏酸,推测阿魏酸酯酶缺失是单二麦芽过滤性能缺陷的原因之一,通过添加纯化的阿魏酸酯酶,可有效提高麦汁的过滤速度,降低麦汁浊度和黏度。进一步研究发现,阿魏酸酯酶可有效去除阿拉伯木聚糖侧链上的阿魏酸,从而使得其氧化交联减弱,多聚阿拉伯木聚糖含量降低。     

微颗粒对黑曲霉产阿魏酸酯酶酶活的影响

通过向黑曲霉ZJUQH液体深层发酵培养基中添加不同质量浓度的滑石粉、氧化铝和高岭土,探究添加微颗粒对黑曲霉产阿魏酸酯酶酶活的影响.结果 表明:添加微颗粒提高了黑曲霉产阿魏酸酯酶的酶活,其中添加0.5 g/L滑石粉、氧化铝和高岭土使黑曲霉产阿魏酸酯酶的比酶活达到最高.该研究提供了一种优化和设计高产量丝状真菌形态的新途径,...     

液相色谱法测定发酵液中阿魏酸酯酶的活力

基于高效液相色谱法测定产物阿魏酸含量的方法,建立了阿魏酸酯酶酶活力的测定方法。实验采用ZORBAX Eclipse Plus C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, Agilent),以甲醇∶1%乙酸=70∶30作为流动相,等度洗脱(柱温35℃,流速1.0 ml/min,进样量10μl),在254 nm下测定阿魏酸含量。结果表明,该法测定酶反应产物阿魏酸含量的检测限为69.15μg/L,定量限为234.78μg/L,且在10～100 mg/L范围内呈良好的线性关系,R²=0.999 9,重复性RSD小于1%,加标收回率为99.25%。在此基础上进一步确定阿魏酸酯酶酶活力测定时的酶反应终止液为30%的乙酸溶液。当阿魏酸生成量在15～25 mg/L时,酶反应处于动力学上的线性区。试验待测酶样的最适温度为55℃,最适pH5.0。经检验,该酶活力检测方法的精密度RSD小于3.0%,达到酶活力检测要求。     

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化

通过初筛、复筛从茯砖茶中筛选到了1株产阿魏酸酯酶活力较高的菌株,经个体形态和菌落特征初步鉴定其为冠突散囊菌;以阿魏酸酯酶酶活为衡量指标,选取黑毛茶含水量、接种量、培养温度、培养时间为因子,研究确定筛选出来的冠突散囊菌进行固态发酵黑毛茶的产酶条件。结果表明:黑毛茶固态发酵实验中,黑毛茶含水量26%,接种量1‰,温度30℃条件下培养4d,其酶活力最高可以达到142m U/g。     

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化

通过初筛、复筛从茯砖茶中筛选到了1株产阿魏酸酯酶活力较高的菌株,经个体形态和菌落特征初步鉴定其为冠突散囊菌;以阿魏酸酯酶酶活为衡量指标,选取黑毛茶含水量、接种量、培养温度、培养时间为因子,研究确定筛选出来的冠突散囊菌进行固态发酵黑毛茶的产酶条件。结果表明:黑毛茶固态发酵实验中,黑毛茶含水量26%,接种量1‰,温度30℃条件下培养4d,其酶活力最高可以达到142m U/g。      

阿魏酸酯酶与纤维素酶协同水解麦麸释放阿魏酸的研究

研究了重组阿魏酸酯酶和纤维素酶协同作用水解去淀粉麸皮对阿魏酸释放量的影响。以高效液相色谱法检测阿魏酸的提取量,结果显示,底物的超声预处理最佳条件为350 W,20 min,是未经超声处理的底物阿魏酸释放率的1.45倍,单独使用阿魏酸酯酶(re Ao Fae A)30 U时阿魏酸的释放率仅为4.1%,单独使用纤维素酶(r Au Cel12A)并不释放阿魏酸,当两种酶协同作用时,阿魏酸的释放率明显提高,经单因素试验确定双酶协同作用的最佳条件为:re Ao Fae A的最适添加量为30 U,r Au Cel12A的最适添加量为70 U,水解时间为10 h,水解温度为40℃,水解p H为5.0,料液质量体积比为1 g:30 m L,此时阿魏酸的释放率为23.6%。该结果表明,去淀粉麸皮中纤维素的降解,对提高阿魏酸酯酶水解释放阿魏酸效率具有重要作用。     

阿魏酸酯酶的研究与应用

阿魏酸酯酶指能水解阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯和多糖阿魏酸酯中的酯键,将阿魏酸游离出来的一种酶.它能切断细胞壁中多糖-多糖、多糖-木质素间的交联,有利于细胞壁物质中多糖的降解和木质素的释放,因此在食品、饲料和造纸工业具有广阔的应用前景.本文介绍了阿魏酸酯酶的结构特征、酶学特性、产酶微生物及其在食品、饲料和造纸工业中应用的前景.     

微生物发酵产阿魏酸酯酶及释放阿魏酸研究概述

对微生物发酵法产阿魏酸酯酶以及释放阿魏酸的国内外研究进展进行综述,重点介绍阿魏酸酯酶的微生物来源、理化性质及阿魏酸酯酶分子克隆专利,同时对释放阿魏酸的生产工艺及影响因素进行简单总结,为探讨新产品的生产工艺提供参考信息。     

Partial Purification of Ferulic Acid Esterase from Malted Barley

A partial purification of ferulic acid esterase, which degrades feruloyl glycerol, has been achieved from barley malt in small yields. Coloured and viscous materials were removed from the malt extract using batch‐elution anion exchange chromatography. Further steps included gradient elution anion exchange chromatography and gel filtration chromatography. Estimations of the molecular weight varied greatly from 22KDa to 158 KDa, possibly because the protein interacted with the matrix of the gel exclusion chromatography column and because multiple forms of the enzyme were present. The partially purified feruloyl esterase had an apparent Km of 0.46% feruloyl glycerol. However more than one enzyme may be present and the substrate contains two isomers and so Michelis‐Menten kinetics may not be appropriate.     

Extraction and Assay of Ferulic Acid Esterase From Malted Barley*

Ferulic acid esterase activity was detected in extracts of barley malt using an assay employing a novel artificial substrate, mono‐feruloyl glycerol. Mono‐feruloyl glycerol has been synthesized and analysed to determine its degree of substitution and purity. It consists of a mixture of the two isomers 1‐feruloyl glycerol and 2‐feruloyl glycerol. The extraction of ferulic acid esterase and its assay conditions have been optimised. The presence of both a detergent and reduced glutathione in the extraction medium increased the amount of enzyme extracted. A pH of 7.5 was optimal for enzyme activity. The enzyme in solution was only stable up to 30°C. The crude extract containing the enzyme released free ferulic acid from both soluble and insoluble cell wall materials. After extraction of the soluble enzyme, insoluble enzyme, capable of releasing free ferulic acid from feruloyl glycerol, was detected in the residual grain solids.     

酶解麦麸制备低聚糖和阿魏酸的研究

本研究以黑曲霉(Aspergillus niger)作菌种,采用液体深层发酵法制备出含有阿魏酸酯酶(FAE)和阿拉伯木聚糖酶(AX)的混合酶制剂,探讨了它们协同作用麦麸制备阿魏酸和低聚糖的工艺条件.结果表明,FAE和AX协同作用的最适反应pH为4.4,最适反应温度为50℃.采用混合酶制剂作用于去淀粉麦麸(DSWB)发现,通过3次降解后,麦麸降解率达55.46%,大大高于文献报道的、采用单一酶作用的结果.扫描电子显微镜(SEM)观察发现,DSWB在酶处理前后的微观结构发生了显著变化.     

两种丝状真菌发酵小麦麸皮中酚酸的释放及与阿魏酸酯酶和木聚糖酶的关系

为了评价两种丝状真菌对小麦麸皮降解能力,以及对酚酸释放能力的差异,本实验在不同时间进行总酚和9种酚酸组分的变化监测并且结合阿魏酸酯酶和木聚糖酶活性,电镜观察小麦麸皮表面结构对黑曲霉和棒曲霉进行综合评估。黑曲霉发酵7 d阿魏酸含量达到416.56μg/g麦麸。次之是没食子酸,从7.71μg/g麦麸增加到105.77μg/g麦麸。棒曲霉阿魏酸含量达到200.81μg/g麦麸。次之是丁香酸,没食子酸,对羟基苯甲酸和香豆酸,从分别从原麦麸中含量14.7μg/g麦麸、7.71μg/g麦麸、8.57μg/g麦麸和5.62μg/g麦麸增长至88.4μg/g麦麸,60.38μg/g麦麸,55.56μg/g麦麸,52.93μg/g麦麸。黑曲霉对麦麸的降解能力及对阿魏酸和没食子酸的释放能力都显著优于棒曲霉,而对丁香酸的释放能力略差于棒曲霉。电镜结果显示,黑曲霉降解能力优于棒曲霉。     

阿魏酸对小麦淀粉理化特性的影响

以小麦淀粉为原料,分别通过扫描电镜分析、傅里叶红外图谱分析、X-衍射图谱分析、差示扫描量热仪分析及快速黏度测试仪(RVA)分析,研究了添加0、5%、10%、15%、20%(w/w淀粉干基)阿魏酸后小麦淀粉的微观形貌、结晶性质、热力学特性及糊化特性。结果表明:随着阿魏酸含量的增加,淀粉表面不规程度增加,致密性降低;阿魏酸添加量至10%时,T₀(糊化初始温度)、T_P(糊化峰值温度)、T_C(糊化最终温度)和ΔH(糊化焓值)发生显著降低(p<0.05),说明阿魏酸的添加降低了小麦淀粉的稳定性;红外光谱表明,添加阿魏酸后,小麦淀粉在(1045/1022) cm^-1峰强度比值减小,说明添加阿魏酸后小麦淀粉有序性降低;X-衍射图谱表明,糊化后小麦淀粉由原来的A型变为B+V型,并表现出酸的衍射峰明显,说明阿魏酸与小麦淀粉未形成包合物。RVA分析表明,添加阿魏酸降低了小麦淀粉的峰值粘度、保持粘度、最终粘度和回升值降低,而崩解值增大,说明阿魏酸抑制了小麦淀粉的老化进程,扫描电镜分析也证明了阿魏酸抑制了淀粉的老化过程。     

浓香型白酒酿造过程中一株产阿魏酸酯酶菌株的筛选和鉴定

本研究分别从浓香型白酒的大曲、窖泥和糟醅中筛选出一株产阿魏酸酯酶的细菌,并对其生理生化特性进行了研究.通过平板划线对目的菌株进行了分离纯化,再根据形态特征和16S rRNA 同源序列分析对分离菌株进行鉴定.结果表明,所分离筛选的产阿魏酸酯酶的菌株为考氏科萨克氏菌(Kosakonia cowani),产阿魏酸酶活为25....