牛乳铁蛋白及乳铁素的生产与应用现状

牛奶中的乳铁蛋白和其水解产物乳铁素具有多种生物活性功能。综述了国外的乳铁蛋白和乳铁素生产、分离和纯化的方法,并介绍了乳铁蛋白和乳铁素作为食品保存剂、抗氧化剂、营养强化剂、免疫强化剂、免疫调节剂等应用的现状。展望了我国乳铁蛋白和乳铁素生产的前景。     

乳铁蛋白活性多肽的抑菌性能

概述了乳铁蛋白活性多肽的结构、制备方法、抑菌谱、抑菌机理及抑菌活性的影响因素.     

乳铁蛋白及乳铁素对嗜酸乳杆菌生长影响的研究

本实验主要针对乳铁蛋白和乳铁素对嗜酸乳杆菌的生长影响进行研究。结果表明,在37℃恒温培养下,添加一定浓度的乳铁蛋白或乳铁素,可促进嗜酸乳杆菌生长繁殖。乳铁蛋白的最适添加浓度为2.5mg/ml,乳铁素的最适添加浓度为0.15mg/ml,培养26h后活菌数分别达到6.7×108CFU/ml和8.0×108CFU/ml。     

牛初乳中乳铁蛋白的分离纯化与免疫功能检测

牛初乳经离心、盐析后获得乳铁蛋白粗提物，通过CM-Sephadex C50离子交换色谱和Heparin-Sepharose CL-6B亲和色谱纯化获得纯度分别为76．98％和92．75％的乳铁蛋白，经SDS-PAGE检测乳铁蛋白存在分子质量分别为76000Da和78000Da的两种异构体，免疫电泳说明提纯样品与乳铁蛋白标准品具有相同的免疫原性。小白鼠喂养和免疫实验说明乳铁蛋白可提高机体免疫功能。     

牛乳铁素对几种免疫细胞因子的影响

通过对灌胃牛乳铁素(LfcinB)后小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10 和TNF-α水平的变化,评价其免疫调节作用。结果表明,灌胃牛乳铁素后3h 采血,分离其血清,用ELISA 试剂盒检测细胞因子,与阴性对照组相比,对细胞因子IL-2 和TNF- α产生极显著促进作用(P ≤ 0.01),对抗炎细胞因子IL-4 有极显著的抑制作用(P ≤ 0.01),对IL-6 有显著的抑制作用(P ≤ 0.05),对抗炎细胞因子IL-10 的分泌影响也极显著(P ≤ 0.01),并且IL-10 随TNF-α的增强而增强,起到平衡作用。因此,口服牛乳铁素对实验小鼠具有免疫增强和调节作用。     

米糠类阿片拮抗肽的氨基酸序列分析

采用氨基酸分析仪、LC-MS对米糠类阿片拮抗肽的结构进行了分析，米糠类阿片拮抗肽由Asp、Gly、Ser、Val和Arg组成，它的氨基酸序列为Asp-Gly-Ser-Val-Arg。     

牛乳中骨桥蛋白的分离纯化与鉴定

从新鲜牛乳中分离纯化骨桥蛋白,并对其进行鉴定。运用生物化学技术,通过离心脱脂后,再经过离子交换层析、疏水层析、透析等技术达到分离纯化目的;随后对分离纯化得到的产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹技术鉴定。分离纯化得到分子质量约为60 ku、纯度95%以上的高活性骨桥蛋白。通过上述方法可以得到纯度较高的骨桥蛋白,为将来进一步对骨桥蛋白活性及结构研究奠定了基础。     

不同来源乳铁蛋白及乳铁蛋白素对小鼠脾淋巴细胞增殖影响的比较

以牛乳清乳铁蛋白（bovine whey lactoferrin,LFW）、牛初乳乳铁蛋白（bovine colostrum lactoferrin, LFC）、人乳铁蛋白（human lactoferrin,LFH）、牛乳铁蛋白素（bovine lactoferricin,LfcinB）和人乳铁蛋白 素（human lactoferricin,LfcinH）为研究对象,研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响并比较不同来源乳铁蛋白 （lactoferrin,LF）及乳铁蛋白素（lactoferricin,Lfcin）作用效果的差异性。采用CCK-8法检测不同来源的LF与 Lfcin作用小鼠脾淋巴细胞24、48、72 h后,及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果显 示：LF与Lfcin均在48 h时对小鼠脾淋巴细胞增殖的促进效果最好,且在一定质量浓度范围内促进效果随质量浓度升 高而加强;LF与Lfcin均在一定质量浓度范围内提高刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞的增殖和脂多糖诱导的B淋巴细胞 的增殖。结果表明：两种牛乳铁蛋白（bovine lactoferrin,LFB）及LfcinB可替代LFH应用于婴幼儿配方产品中以提 高婴幼儿免疫能力,LFB推荐添加质量浓度为0.50～2.00 mg/mL,Lfcin推荐添加质量浓度为75～125 μg/mL。     

芫荽酸性磷酸酶的提取、纯化及酶学性质研究

采用硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析法,从新鲜芫荽中分离纯化出电泳纯的酸性磷酸酶（acid phosphatase,ACP）。该酶的酶活回收率为14.20%、纯化倍数为238.60、酶比活力为295.87 U/mg、亚基分子质量约为53.8 kD;芫荽ACP酶学性质研究结果表明：该酶的最适反应温度为55 ℃,在50 ℃以下时较稳定,因此该酶对温度较敏感;该酶的最适反应pH值为5.8,在pH?4.0～7.0之间较稳定,表明该酶耐受于酸性环境;芫荽ACP的对硝基苯酚磷酸二钠Km值为0.63 mmol/L,表明该酶与底物对硝基苯酚磷酸二钠具有较高的亲和力;甲醇、乙醇、异丙醇、抗坏血酸、草酸、Cu2＋、Pb2＋、Ag＋对该酶具有强烈的抑制作用;Mg2＋、Mn2＋、Ba2＋、K＋对该酶具有一定的激活作用。