甲胎蛋白干血滤纸免疫放射分析试剂盒的研制

用氯胺Ｔ法制备＾１２５Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ，用ＡＦＰ ＭｃＡｂ包被试管，以全血作标准，建立了ＡＦＰ干血滤纸片免疫放射分析方法。该方法灵敏度为７．２μｇ／Ｌ，批内变异系数为５．１－１０．０％，批间变异系数为４．７％－８．６％，正常参考值≤１０μｇ／Ｌ，与血清ＡＦＰ免疫分析方法比较，相关系数ｒ＝０．９７９。     

促卵泡激素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用双抗体夹心法建立了测定人血清FSH酶促化学发光免疫分析方法。本方法的测量范围为1．5～100IU／L,灵敏度为0．36IU／L,批内变异系数为1．0％～1．6％,批间变异系数为4．0％～4．6%,回收率为90．6％～117．8％,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0．990。与TSH的交叉率〈0．23％,与LH和HCG的交叉率分别〈0．16％和〈0．27％。与贝克曼化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y=0．85x—0．03,相关系数r=0．954。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y=0．97x＋5．29,相关系数r=0．965,与放射免疫分析试剂盒,进行比较,相关性方程为y=0．95z-3．82,相关系数r=0．954。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

前列腺抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1.5～80μg/L,灵敏度为0.12μg/L,批内变异＜5%,批间变异＜15%。回收率为83.8%～118.7%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.999。本方法与免疫放射分析方法的相关方程y=1.07x+0.68,相关系数r=0.97。     

前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫放射分析试剂盒的研制

采用包被管分离技术，利用两株抗PAP单克隆抗体，双位点夹心免疫 血清中PAP含量。结果表明，该试剂盒分析灵敏度为0.1μg/L；批内变异系数为（8．8－9．6）％；批间变异系数为（7．7－12．3）；回收率为（96．3－105．0）％；标准曲线范围内2．5－200．0μg/L。与DPC公司CAC PAP IRMA试剂盒进行方法学比较，相关系数r=0.909。     

大鼠白蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

采用大鼠白蛋白免疫绵羊制得羊抗大鼠白蛋白抗血清,建立了大鼠白蛋白酶联免疫分析方法。本方法的测量范围为1～50mg／L,灵敏度为0．42mg／L,回收率为85．0％～106．0％,批内、批间变异系数分别〈8．9％和％12．8％,高浓度大鼠尿样系列倍比稀释后测定,实测值和计算值呈线形相关,相关系数r=0．999。本方法学与放射免疫分析（RIA）方法学的相关性方程为Y=0．92x＋0．08,r=0．976,两种方法的相关性良好。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求,大鼠白蛋白酶联免疫试剂盒的研制为肾病药物的开发及肾损伤的研究提供了方便。     

糖类抗原CA19-9免疫放射分析法的建立

采用两株CA19-9单克隆抗体,一株用于125I标记、另一株包被于试管作为固相抗体,用血清稀释CA19-9抗原,制备标准品,建立了CA19-9双位点夹心免疫放射分析方法（IRMA）。分析采用两步法,本方法最小检测限为2.0 U/mL,批内、批间变异系数分别为 6.4%~9.5%和6.0%~12.6%,样品添加实验结果显示,回收率为88.1%~106.1%,血清样品倍比稀释后测定,测定值和稀释度的相关系数为0.990。CA19-9浓度至11800 U/mL时测定未见“弯钩”效应。69例健康人血清样品测定值为0.3~29.6 U/mL（ ±s 为7.4±5.8 U/mL）,和法国CIS公司的CA19-9免疫放射分析药盒同时测定84例人血清样品,二者测定值相关方程为y=1.32x-17.6,相关系数r=0.896。相似文献   

前列腺特异性抗原酶促化学发光分析方法的建立

前列腺特异性抗原（PSA）是由前列腺上皮和尿道周围腺体产生的一种相对分子质量为33000-35000道尔顿的单链糖肽。在正常情况下，PSA主要分泌到前列腺液或精液中，血清中浓度很低，仅为0～4μg／L。当前列腺发生病变时，PSA大量进入血液，引起血液PSA浓度升高，     

胰岛素免疫放射分析方法的建立

摘要：采用两株抗胰岛素单克隆抗体，一株包被聚苯乙烯试管作为固相抗体、另一株标记125I，建立了胰岛素测定的双抗体夹心免疫放射分析方法。其方法学灵敏度为2.8mIU/L；曲线范围5～160mIU/L；批内、批间变异系数分别小于5%、10%；回收率92.3％～112.6％；高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数0.996；39例健康人血清样品测定值为4.7～14.3mIU/L，该方法与胰岛素放射免疫分析法的相关性良好（r=0.981）。     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立

采用抗恩诺沙星单克隆抗体建立酶联免疫吸附法（ELISA）用以检测恩诺沙星在动物源性食品中的残留。经方法学鉴定,本方法的检测范围为0．5～50μg／L,灵敏度为0．2μg／L,批内变异系数〈10％,批间变异系数〈20％。鸡肉、鱼肉、虾和蜂蜜样品的回收率分别为95．5％～107．5％、80．0％～101．3％、105．7％～122．7％和93．3％～111．3％。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

HCG免疫放射分析法的建立

采用两种抗ＨＣＶ单克隆抗体，固相试管包被技术建立了ＨＣＧ夹心免疫放射法，与人促黄体激素，促卵泡激素和促甲状腺激素均无交叉反应，方法的灵敏度为０．５ＩＵ／Ｌ，批内，批间变异系数分别小于５．４％，６．４％。药盒４℃下存放１个月质量稳定。     

β2-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

以β₂-微球蛋白（β₂-MG）抗体包被微孔板，四甲基联苯胺（TMB）为底物，用辣根过氧化物酶标记β₂-MG，建立了β₂-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒，并对该方法进行了方法学分析。结果显示：本方法分析灵敏度为0.15 mg/L，批内、批间变异系数分别为4.1％～11.2%和14.1％～16.0％，回收率为93.3%～115.9%，高浓度β₂-MG样品系列倍比稀释后，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数为r=0.997 4。特异性结果显示：本试剂盒与铁蛋白基本无交叉反应，与白蛋白及甲胎蛋白在浓度分别低于10 mg/L及5 mg/L时有交叉反应，但反应很小。与放射免疫分析法（RIA）同时测定人血清样品，方法间有良好的相关性，相关方程为y_ELIA=1.006x_RIA+0.406，r=0.900(n=59)。以上参数均符合临床免疫分析的要求。本试剂盒操作简便、快速，适用于临床检测和科研应用。     

催乳素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用两株催乳素(PRL)单克隆抗体,一株包被化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,研制了测定人血清PRL浓度的酶促化学发光免疫分析试剂盒。本试剂盒测定范围50~4 000 mIU/L,灵敏度4.26 mIU/L,批内、批间变异系数分别小于10%、15%,回收率90.3%~100.8%;血清样品倍比稀释后的测定值和稀释度的相关系数为1;本试剂盒正常参考值范围:女性43.2~513.1 mIU/L(n=52),男性54.8~334.3 mIU/L(n=68)。     

白蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

采用竞争性ELISA法检测人尿中白蛋白(Albumin,Alb)的含量。将Alb抗体包被96孔微孔板,Alb与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,建立了白蛋白酶联免疫分析(Alb-ELISA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.28 mg/L;批内、批间变异系数分别为2.63%～5.28%和2.40%～4.26%;回收率为95.0%～106.4%;高浓度Alb样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为r=0.997 4。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T₃抗体包被微孔,T₃生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T₃）生物素-亲合素酶联免疫分析(T₃-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2 μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1％～8.3％和6.5％～10.5％,回收率为98.1％～107.2％;高浓度T₃血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

促黄体生成激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心一步检测法和鲁米诺-过氧化氢发光体系建立了血清促黄体生成激素(LH)的酶促化学发光免疫分析方法。结果显示,本方法测量范围为1.5~200 IU/L,灵敏度为0.08 IU/L,批内变异系数9%,批间变异系数11%,回收率为96.3%~112.1%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0.995。与进口酶促化学发光免疫分析试剂盒测定的临床值进行比较,线性相关方程为y=0.967x+0.0689,相关系数r=0.975,相关性良好。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

高效液相色谱法测定18F-FDG注射液中氨基聚醚含量

采用高效液相色谱法测定了¹⁸F-FDG注射液中氨基聚醚（K_2.2.2）的含量,并对流动相、流速、检测波长进行了选择,确定检测条件为：V（50 mmol/L乙酸铵）∶V（乙腈）=1∶1为流动相,流速为0.5 mL/min,检测波长210 nm,进样量为10 μL。K_2.2.2在 1～50 mg/L浓度范围内线性良好,线性回归方程：y=265 939.4x+7 490.7,相关系数γ=0.999,回收率为96.0%～100.3%,精密度小于3.5%。本方法回收率较高,精密度较小,样品用量少,可用于¹⁸F-FDG注射液中微量K_2.2.2的测定。     

血清TgAb和TPOAb水平对Graves甲亢患者131I治疗后甲减发生的影响

为评价血清甲状腺球蛋白抗体（TgAb）和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）水平对甲亢患者¹³¹I治疗后甲减发生的影响,收集2008年1月至2012年2月在本院就诊并行¹³¹I治疗的甲亢患者160例,治疗后随访1～3年。按血清TgAb和TPOAb水平将所有患者分为4组：A组TgAb＜60.00 U/mL,TPOAb＜60.00 U/mL;B组TgAb≥60.00 U/mL,TPOAb＜60.00 U/mL;C组TgAb＜60.00 U/mL,TPOAb≥60.00 U/mL;D组TgAb≥60.00 U/mL,TPOAb≥60.00 U/mL。分析血清TgAb和TPOAb水平对甲减发生的影响。结果发现,患者总甲减发生率为34.4%,各组间¹³¹I治疗后甲减发生率有差异（P=0.034＜0.05）,且C组和D组甲减发生率均较A组高,差异有统计学意义（P分别为0.041＜0.05和0.005＜0.01）;Logistic回归分析提示,血清TgAb水平（Wald=4.145,P=0.042＜0.05）和TPOAb水平（Wald=6.850,P= 0.009＜0.01）是¹³¹I治疗后甲减发生的重要影响因素。综上可知,治疗前血清TgAb和TPOAb水平增高是甲亢患者¹³¹I治疗后甲减发生的危险因素,对于治疗前血清TgAb或/和TPOAb水平增高（尤其是两者水平同时显著增高）的患者,¹³¹I剂量应适当减小以降低甲减发生率。     

3H11的~(123)I标记及其生物分布

采用Iodogen氧化法对胃癌单克隆抗体3 H11进行了123I标记,用PD-10层析柱分离纯化标记物,纸层析法测定标记物的标记率和放化纯度,评价标记物的体外稳定性,并观察了标记物在正常小鼠体内的生物分布。标记结果显示,123I-3 H11的优化标记条件为:Iodogen 10μg、3 H11 30μg、Na123I溶液20μL(13.3 MBq)、磷酸盐缓冲溶液100μL(pH7.4、0.2 mol/L)、常温下反应8 min,123I-3 H11标记率70%~80%;稳定性结果显示,标记物在4℃人血清中的体外稳定性较好,放置48 h后放化纯度92%;正常昆明鼠体内生物学分布显示,全抗3 H11血液半清除时间为12.25±0.25 h,胃组织有明显摄取。以上结果提示,123I-3 H11是一种很有前景的肿瘤放射免疫显像剂。