三草降压汤含药血清对人脐静脉内皮细胞活性及NO分泌的影响

目的:观察三草降压汤(SCD)含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性及NO分泌水平的影响,探讨其降压作用的有效组分和作用机制。方法:采用大孔树脂富集纯化技术制备SCD的4种组分(SCD-DW、SCD-10ET、SCD-50ET、SCD-95ET),分别用血清药理学方法制备SHR大鼠含药血清,以5%、10%、15%的血清浓度作用于HUVEC,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力,Griess比色法检测培养液中NO含量。同时观察eNOS抑制剂L-NAME对其作用的影响。结果:SHR空白血清可显著抑制HUVEC活性(P<0.05),降低NO含量(P<0.01)。SCD-DW、SCD-10ET含药血清可增强被SHR空白血清抑制的HUVEC的活性(P<0.05,P<0.01),SCD-10ET可以提高HUVEC的NO分泌水平(P<0.05),此效应在15%血清浓度下可被L-NAME明显抑制(P<0.01)。结论:SCD-10ET可以通过调节内皮细胞NO分泌,减少血管内皮细胞损伤,eNOS-NO途径可能是该组分降低血压的机制之一。     

鱼腥草素钠对人脐静脉内皮细胞NO合成及NOS活力的影响

目的:研究鱼腥草素钠对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)NO合成及一氧化氮合酶(NOS)活力的影响.方法:采用15μg/ml LPS作用于HUVECs,共同孵育12h建立炎性损伤细胞模型.考察不同剂量鱼腥草素钠对各组HUVECs细胞存活率、培养上清液中LDH活力、NO含量、内皮型NOS(eNOS)及诱导型NOS(iNOS)表达的影响.结果:鱼腥草素钠可明显提高HUVECs细胞存活率,增加NO的分泌与释放,提高eNOS与降低iNOS活力,从而保护脂多糖诱导的HUVECs炎性损伤.结论:鱼腥草素钠对脂多糖诱导损伤的内皮细胞具有保护作用,其机制与其促进内皮细胞NO分泌与释放,增强eNOS活性和表达,改善血管内皮功能状态相关.     

PM2.5对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的研究

目的:研究PM2.5和AngⅡ的共同干预下,人脐静脉血管内皮细胞的凋亡率及可能的凋亡机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞株,分别以不同浓度PM2.5、AngⅡ、PM2.5+AngⅡ处理24、48 h,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白p-AKT的表达变化。结果:48 h CCK-8结果显示,PM2.5在100.00、200.00、800.00 μg/mL时、AngⅡ在20.00 μmol/L时与对应组别的PM2.5+AngⅡ组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。进一步的流式结果显示,48 h时PM2.5+AngⅡ组凋亡率与单PM2.5或AngⅡ处理比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。Western Blot结果显示,PM2.5+AngⅡ处理比单PM2.5或单AngⅡ处理后P-AKT的表达量下调,差异均有统计学意义(P<0.005)。结论:本研究表明体外实验中,PM2.5对AngⅡ诱导血管内皮细胞凋亡具有促进作用,并可能通过PI3K/Akt/eNOS信号通路来实现。     

三七总皂苷对酒精性肝硬变大鼠肝星状细胞蛋白组学的影响

目的:探讨三七总皂对实验性酒精性肝硬变大鼠肝纤维化治疗作用的分子机制。方法:选取健康成年雄性Wistar大鼠36只,使用体积分数50%酒精16 m L·(kg·d)~(-1)灌胃造模,9周后随机分成模型组、安珐特组、三七总皂苷组,每组12只。安珐特组给予西药安珐特21.6 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,三七总皂苷组给予三七总皂苷100 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,模型组继续使用体积分数50%酒精灌胃。同时设置空白组。12周后处死大鼠,剪下肝右叶,提取肝星状细胞总蛋白,测定各组蛋白含量,继而进行等电聚焦双向电泳,比较组间的差异蛋白点。结果:通过组间两两比较发现,组间的蛋白表达均存在着差异,正常组与模型组比较,共有23个差异点;正常组与安珐特组比较,共有33个差异点;正常组与三七总皂苷组比较,共有30个差异点;模型组与安珐特组比较,共有30个差异点;模型组与三七总皂苷组比较,共有31个差异点;安珐特组与三七总皂苷组比较共有30个差异点。结论:三七总皂苷对实验性酒精性肝硬变大鼠具有保护作用,其机制可能与三七总皂苷引起肝星状细胞蛋白质表达差异有关。     

屏边三七总皂苷的含量测定研究

目的:测定屏边三七中总皂苷的含量。方法:通过实验研究确定了屏边三七总皂苷检测时的显色条件及检测波长。采用紫外-可见分光光度法测定屏边三七中总皂苷的含量。结果:屏边三七中总皂苷在5%香草醛-冰醋酸和73%的高氯酸溶液中,于65℃下加热25 min显色最优,最佳检测波长为543 nm;精密度、稳定性、重复性和加样回收试验等RSD均小于2.5%。结论:屏边三七中总皂苷平均含量为3.60%。所建立的检测方法可靠、结果稳定、重现性好,其可用于屏边三七中总皂苷的含量测定。     

TNF-α和IL-6与重型颅脑损伤后心肌功能相关性分析

目的探讨分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)与重型颅脑损伤后心肌功能损伤情况的相关性.方法选取本院格拉斯哥昏迷评分≤8分,且符合重症颅脑损伤的诊断标准,除外急诊科内死亡以及合并其他部位损伤的79名患者作为观察组,同时选取本院门诊部体检的43例健康人作为对照组。两组分别抽血化验IL-6、TNF-α、心肌肌钙蛋白T以及肌酸激酶同工酶,比较两组检验结果。结果与对照组患者检查结果比较,观察组患者心肌肌钙蛋白T(549.3±48.7)pg/m L,肌酸激酶同工酶(197.8±38.1)U/L;IL-6(471.2±69.8)ng/m L,TNF-α(40.1±17.8)ng/m L,差异具有统计学意义(P均<0.001)。肌酸激酶同工酶与IL-6或TNF-α之间的r值分别为0.912或0.961,心肌肌钙蛋白T与IL-6或TNF-α之间的r值分别为0.958或0.943,呈显著正相关关系(P均<0.001)。结论 IL-6和TNF-α与重型颅脑损伤后心肌功能损伤害相关,若能抑制两者在血液中的高浓度表达,则有可能减轻重型颅脑损伤后心肌功能损伤的程度。     

AngⅡ对人脐静脉内皮细胞CGRP受体组分的调节差异

目的探讨血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中降钙素基因相关肽(CGRP)受体组分的影响。方法以HUVECs作为实验对象,用无血清培养基同步化24 h后,以AngⅡ非处理细胞为对照组,AngⅡ处理组为不同剂量的AngⅡ处理HUVECs 12 h,流式细胞仪检测细胞增殖率和凋亡率。Western Blot检测CGRP三种受体组分,即降钙素受体样受体(CRLR)、降钙素受体组分蛋白(RCP)和受体修饰蛋白(RAMP)1的蛋白表达。结果与对照组相比,在处理组细胞,AngⅡ呈剂量依赖性地抑制HUVECs增殖和诱导细胞凋亡,同时上调CRLR表达(P<0.01)。而对另外两个受体蛋白而言,AngⅡ(0.01~100 nmol/L)呈剂量依赖性的下调HUVECs的RAMP1的表达和RCP表达(P<0.05)。结论 AngⅡ影响人脐静脉内皮细胞CGRP受体组分的表达存在差异,可引起人脐静脉内皮细胞CGRP受体功能改变。     

仙茅多糖对巨噬细胞分泌几种活性因子的影响

目的:观察仙茅多糖对体外培养的巨噬细胞分泌几种活性因子的影响,以期探索仙茅多糖活化巨噬细胞的部分机制。方法:将仙茅多糖体外与RAW264.7巨噬细胞共同培养36h,ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1的含量,Griess比色法检测培养上清中NO的含量。结果:与空白对照组比较,仙茅多糖高、中剂量组TNF-α、IL-1和NO等活性因子的水平明显升高(P<0.05或P<0.01),且与阳性对照组的调节趋势相似。结论:仙茅多糖刺激巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1和NO等活性因子可能是其活化巨噬细胞的重要机制。     

西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响及机制探讨

目的研究西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响,探讨西洛他唑对单核细胞的炎症调控作用。方法体外培养人THP-1单核细胞,分为对照组(A组)、LPS组(B组)、西洛他唑组(C组)、西洛他唑+SQ22536组(D组),C组和D组加入LPS刺激24 h。应用ELISA法检测各组细胞培养上清TNF-α水平,并测定各组细胞内c AMP浓度。结果西洛他唑能抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,同时升高细胞内c AMP浓度。结论西洛他唑可抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,这种作用可能与升高细胞内c AMP浓度有关。     

黄芪对肾病综合征患儿血清肿瘤坏死因子-α的影响

目的 检测肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)患儿血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,观察黄芪治疗儿童NS前后TNF-α的变化.方法 选取2003年10月至2010年10月南昌大学第二附属医院确诊为NS的患儿60例,按随机数字表法分为黄芪组和激素组各30例,另选同期健康体检儿童20例为健康组.黄芪组和激素组分别给予黄芪加强的松口服和单用强的松治疗.检测各组患儿血清TNF-α水平,比较黄芪组和激素组患儿治疗前后的血清TNF-α水平及24 h尿蛋白定量,并判定治疗8周后临床疗效.结果 NS患儿血清TNF-α水平较健康组明显升高(P＜0.01);黄芪组与激素组治疗后血清TNF-α水平、24 h尿蛋白定量均下降(P＜0.05),尤以黄芪组下降更明显(P＜0.01);黄芪组完全缓解率和总缓解率均显著高于激素组(P＜0.05).结论 黄芪联合激素治疗效果优于单纯激素治疗,其作用机制可能与降低患儿血清TNF-α有关.     

亚低温治疗弥漫性轴索损伤后脑血管痉挛的疗效观察

目的探讨亚低温对弥漫性轴索损伤后脑血管痉挛的影响。方法 94例弥漫性轴索损伤患者(GCS≤8分)随机分为亚低温组(53例)和常规治疗组(41例)。经颅多普勒(TCD)检测伤后0,1,3,7,14,21天大脑中动脉平均血流速度(VmMCA)。常规治疗组维持正常体温,亚低温组4⁸ h将肛温降至33℃左右,维持38 h将肛温降至33℃左右,维持3⁵天。分析比较两组大脑中动脉平均血流速度及预后情况。结果两组患者24 h内VmMCA均开始升高,亚低温组患者脑血管痉挛(CVS)发生率低于常规治疗组,亚低温组患者预后好于常规治疗组,两组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温通过稳定弥漫性轴索损伤后脑循环功能减少脑血管痉挛发生率,从而改善远期预后。     

静脉注射右美托咪定对甲状腺手术患者全麻苏醒的影响研究

目的:研究不同剂量右美托咪定(DEX)静脉注射对甲状腺手术患者全麻苏醒质量的影响。方法:选择2014年3月-2016年12月本院普外科择期全麻下行甲状腺手术患者140例,ASAⅠ或Ⅱ级,采用随机数字表法将患者均分对照组(C组)、DEX1组(D1组)、DEX2组(D2组)和DEX3组(D3组),每组35例。在手术结束前30 min C组静脉注射20 m L 0.9%氯化钠溶液,D1、D2和D3组分别静脉注射DEX 0.3、0.5、0.7μg/kg,10 min输注完毕。观察并记录各组患者全麻诱导前(T_1)、DEX给药前(T_2)、DEX给药后15 min(T_3)、拔管即刻(T_4)、拔管后10 min(T_5)的平均动脉压(MAP)和心率(HR);记录各组患者睁眼时间、拔管时间、拔管后10 min Ramsay镇静评分、自主呼吸恢复时间及围拔管期不良反应发生率。结果:四组患者T_1、T_2时的MAP和HR比较,差异均无统计学意义(P>0.05);D3组T_3时的MAP、HR均低于其他三组(P<0.05);D2组、D3组T_4、T_5时的MAP和HR均低于C组、D1组(P<0.05);D1组T_4、T_5时的MAP、HR与C组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);C组、D1组T_4时MAP及HR均高于T_1时(P<0.05)。D3组的睁眼时间、自主呼吸恢复及拔管时间均长于其他三组(P<0.05),D2组、D3组Ramsay评分为5~6分的患者均多于C组、D1组(P<0.05),C组Ramsay评分为1分的患者多于D2组、D3组(P<0.05)。D2组、D3组围拔管期呛咳发生率均低于C组和D1组(P<0.05),D2组与D3组比较,差异无统计学意义(P>0.05),C组和D1组比较,差异无统计学意义(P>0.05);D3组围拔管期低血压发生率高于C组、D1组、D2组(P<0.05),C组围拔管期高血压发生率高于D2组、D3组(P<0.05)。结论:甲状腺全麻手术患者手术结束前30 min静脉注射DEX 0.5μg/kg、0.7μg/kg能减少恶心呕吐、呛咳等不良反应的发生,维持围拔管期血流动力学的平稳,且不影响患者苏醒及拔管时间,苏醒质量更高,0.7μg/kg给药效果比0.5μg/kg更好,值得临床推广使用。     

扁铲侧胀试验与应力铲试验关系研究

以弹性理论中的Mindlin解为基础导出了一般饱和黏性土的扁铲侧胀试验与应力铲试验成果间的关系式,并得出应力铲试验中的初始水平总应力σh0大于扁铲侧胀试验中膜片向土中膨胀之前作用在膜片上的接触压力p0。用湖州地区铁路工程的实际资料进行对比分析,结果令人满意。     

天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖机制研究

目的:探讨天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用,并对其增殖抑制作用机制进行初步探讨。方法:采用不同质量浓度的天马颗粒剂(10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1))处理人结肠癌细胞株SW480,同时设立空白对照组(RPMI 1640培养液处理)及阳性对照组(以5-氟尿嘧啶处理)。观察SW480细胞的形态学动态变化,以MTT法检测各组SW480细胞的增殖情况,另以速率法检测各组SW480细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)比活性的变化情况。建立人结肠癌细胞株SW480免疫抑制小鼠肾包膜下移植瘤模型,同时设立天马颗粒剂组(天马颗粒剂灌胃),空白对照组(生理盐水灌胃)及阳性对照组(5-氟尿嘧啶腹腔注射),8 d后采集肿瘤组织,以免疫组织化学法及图像分析技术定量检测各组移植瘤SW480细胞中Ki-67及PCNA基因的表达情况。结果:随着天马颗粒剂质量浓度的增加,SW480细胞逐渐稀疏,散在生长,细胞变大,透明度差,颗粒增多;当天马颗粒剂质量浓度为10~(-4)g·mL~(-1)时,SW480细胞颜色加深,且部分细胞从瓶壁脱落,甚至部分细胞可见坏死崩解的碎片;实验组10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均可显著抑制SW480细胞增殖,且随天马颗粒剂作用时间延长及质量浓度增大,SW480活细胞计数逐渐降低(P<0.05);随着质量浓度的增加OD值逐渐降低,增殖抑制率逐渐升高(P<0.05);10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均会使SW480细胞的AKP比活性升高,且以10~(-2)g·mL~(-1)时的AKP比活性最高,且显著高于其他各组(P<0.05或P<0.01)。阳性对照组AKP比活性与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Ki-67及PCNA基因主要表达于SW480细胞的细胞核,天马颗粒剂组及阳性对照组Ki-67及PCNA基因阳性着色较空白对照组明显减少,其表达的面积均值及积分光密度均显著降低(P<0.01)。结论:天马颗粒剂可显著抑制人结肠癌细胞株SW480增殖,原因可能与其诱导SW480细胞成熟分化或抑制SW480细胞Ki-67及PCNA基因表达相关。     

槲皮素对人卵巢癌细胞-3增殖和凋亡的影响

目的:探讨槲皮素对人卵巢癌细胞-3(ovarian carcinoma cell,OVCAR-3)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:将对数生长期的OVCAR-3细胞随机分为对照组和槲皮素组。对照组细胞给予培养基常规培养,而槲皮素组细胞加入槲皮素(160μmol·L~(-1))。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖;流式细胞仪检测人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞凋亡,RT-PCR检测细胞受体型酪氨酸激酶2(JAK2),信号传导与转录激活因3(STAT3),B细胞淋巴因子2(Bcl-2),人Bcl-2相关X蛋白(Bax)信使mRNA表达水平。免疫蛋白印记法检测各组OVCAR-3细胞中STAT3,磷酸化受体型酪氨酸激酶2(p-JAK2),磷酸化信号传导与转录激活因3(p-STAT3),Bax,Bcl-2蛋白的变化,Caspase3活性试剂盒检测Caspase3活性。结果:MTT检测结果显示槲皮素组与对照组相比,人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖率明显下降(P<0.05)。流式细胞仪检测显示槲皮素组OVCAR-3细胞凋亡率较对照组明显升高(P<0.05)。RT-PCR检测显示槲皮素组与对照组JAK2和STAT3信使mRNA表达水平无明显差异,而槲皮素组Bax信使mRNA水平比对照组明显增高,槲皮素组Bcl-2信使mRNA水平比显著低于对照组。Western blotting检测显示,槲皮素组的JAK2和STAT3蛋白表达与对照组比较,无明显差异(P>0.05),而槲皮素组的p-STAT3,p-JAK2和Bcl-2蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05),槲皮素组的Bax表达显著高于对照组(P<0.05)。Caspase3活性试剂盒检测结果显示,槲皮素组Caspase3活性表达水平显著高于对照组。结论:槲皮素能明显抑制人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖,促进人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞凋亡,其作用机制可能是通过激活JAK2/STAT3信号传导通路。     

内皮细胞损伤标志物ET-1、TM、vWF表达水平与腹腔镜CO_2气腹时间的关系研究

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术(LC)患者内皮细胞损伤标志物内皮素-1(ET-1)、血栓调节蛋白(TM)、血管性血友病因子(vWF)表达水平与二氧化碳(CO_2)气腹时间的关系。方法:选取2017年1月-2018年12月本院采取LC治疗且CO_2气腹时间超过90 min的患者36例为研究对象,分别于气腹时间为0、30、60、90 min时抽取肘静脉血进行ET-1、TM、vWF检测,并分析其与气腹时间的关系。结果:单因素重复测量资料方差分析结果显示,不同气腹时间的ET-1、TM和vWF表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01);0、30 min时的ET-1、TM表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05),60、90 min时的ET-1、TM表达水平均高于0 min,差异均有统计学意义(P<0.05);30、60、90 min时的vWF表达水平均高于0 min,差异均有统计学意义(P<0.05)。多项式曲线趋势分析结果显示,随CO_2气腹时间增加,ET-1、TM、vWF表达水平均呈线性变化趋势(P<0.01)。结论:LC患者气腹30 min内血管内皮细胞损伤较小,血管内皮细胞损伤与CO_2气腹时间呈线性正相关,缩短术中CO_2气腹时间有助于减轻内皮细胞的损伤。     

miR-140与膝关节骨性关节炎严重程度的相关性

目的:探析miR-140与膝关节骨性关节炎严重程度的相关性。方法:选择本科收治的膝关节骨性关节炎患者60例为骨性关节炎组(OA组),按Lawrence X线诊断标准,Ⅰ~Ⅳ级患者各15例。同时选取同期非骨性关节炎患者30例为对照组(主要为外伤患者)。应用实时荧光定量(PCR)检测上述两组患者膝关节液中miR-140的含量。比较两组及不同等级患者的miR-140表达水平。结果:OA组miR-140表达水平显著低于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.01);miR-140表达水平随OA严重程度增加而降低,比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-140表达水平与膝关节骨性关节炎的严重程度呈负相关。