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为优化杏鲍菇GIM5.344 原生质体的制备、再生条件及建立稳定有效的遗传转化体系,对裂解酶、酶解温度、酶解时间、再生培养基稳渗剂等原生质体制备、再生条件以及潮霉素浓度、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)介导转化方法进行优化,探究不同原生质体制备、再生条件对原生质体产量和再生率的影响。结果表明:选用溶壁酶1 进行酶解效果最佳,当酶解温度30 ℃、酶解时间2 h、再生培养基稳渗剂为甘露醇时,原生质体的产量可达到7×108 CFU/mL,再生率达到0.40%。得到转化子最多的转化方法为固体预培养+双层培养法,即PEG 介导转化后在无抗性再生培养基上28 ℃预培养48 h,然后再添加一层含有30 μg/mL 潮霉素的培养基进行拟转化子的筛选。所得转化子中的绿色荧光蛋白基因能稳定有效表达。 相似文献
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酿酒酵母单倍体1450原生质体制备的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过研究菌龄、菌体预处理、渗透压稳定剂及含有不同渗稳剂的再生平板等不同因素对酿酒酵母1450原生质体制备的影响,确定了其原生质体制备的条件:菌龄为6h,预处理剂为PB+0.1%EDTANa2+3%β-巯基乙醇,采用1 mo/L山梨醇为渗透压稳定剂,再生培养基添加0.5 mol/L蔗糖为稳定剂,在此条件下,其原生质体形成率达99.85%,再生率达14.31%. 相似文献
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赵换维 《食品安全质量检测学报》2021,12(4):1481-1486
目的 制备杏鲍菇多肽,并研究其体外活性.方法 以杏鲍菇菇脚为原料,采用超声辅助的碱提酸沉法提取出杏鲍菇蛋白,比较3种蛋白酶酶解后的多肽得率,选定水解酶.基于单因素实验、正交实验确定多肽最优酶解工艺,并依托体外抗氧化活性实验实现对多肽体外活性的测定.结果 杏鲍菇多肽液在分子量为5~10 kD、1~5 kD及低于1 kD的... 相似文献
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杏鲍菇液态发酵培养的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
杏鲍菇是一种珍贵的药食皆宜的真菌.为在较短时间内大量获得杏鲍菇菌体,该试验探讨了液态发酵方法制备杏鲍菇.试验以杏鲍菇菌丝体干重为指标,通过单因素试验和正交试验,对杏鲍菇液态发酵培养基和液态发酵条件进行了优化.试验结果表明,杏鲍菇液态发酵的最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨,当培养基配方为葡萄糖30g/L、蛋白胨5g/L、KH2PO40.8g/L、MgSO41.2g/L、VB110mg/L时杏鲍菇菌丝体生物量较高.在摇瓶培养条件中研究了种龄、装液量、初始pH值、接种量、温度、转速、培养时间等对液态发酵杏鲍菇菌体生物量的影响.得出最佳培养条件:种子培养6d,装液量20% (v/v),接种量为10% (v/v),培养基的初始pH值为自然,培养温度为25℃,摇瓶转速为140r/min,发酵8d,杏鲍菇菌丝产量可达8.23g/L. 相似文献
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双亲灭活米曲霉原生质体融合中原生质体制备的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
对双亲灭活米曲霉原生质体融合育种中原生质体制备的条件进行了研究,将菌丝的预处理与细胞壁的酶解合为一步,并讨论了DTT的加入量。结果表明,原生质体制备的最佳破壁酶为纤维素酶、溶壁酶、蜗牛酶3种酶混合浓度比为5:3:1;菌丝培养15h;酶解时加入3mol/L DTT;酶解2.5h;0.8mol/L NaCl作为渗压稳定剂。所得双亲菌株原生质体的融合率为3.31%。 相似文献
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目的 研究高产谷氨酰胺的黄色短杆菌原生质体制备和再生的最佳条件.方法 用青霉素和甘氨酸预处理黄色短杆菌后,用溶菌酶酶解,研究菌龄、青霉素和甘氨酸预处理浓度及时间、酶浓度、酶解时间、酶解温度等条件对原生质体制备和再生的影响.结果 原生质体制备和再生的最佳条件为:预处理处于对数生长早期的黄色短杆菌,青霉素最适浓度0.4 u/mL,甘氨酸浓度2%,预处理时间2h,酶浓度1 mg/mL,酶解时间12h,酶解温度37℃.结论 在最佳条件下原生质体形成率达99.71%,再生率达16.52%. 相似文献
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纳豆菌原生质体制备与再生条件的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了菌体培养时间、溶菌酶作用条件(酶作用温度、浓度和时间)对纳豆菌BNK菌株原生质体制备和再生的影响。在此基础之上,考察了不同再生培养基、渗透压稳定剂及原生质体保护剂对再生率的影响。确定了菌株BNK原生质体制备和再生最佳条件为:菌体培养9h收集,0.8mg/ml溶菌酶,30℃作用40min制备原生质体,将原生质体液涂布于以甘露醇为渗透压稳定剂、添加有淀粉的PYG培养基中再生,此时原生质体制备率达98.2%,再生率为28.4%。 相似文献
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采用高效液相色谱法测定了用不同培养基栽培的杏鲍菇中海藻糖的含量,结果表明杏鲍菇具有高于香菇的海藻糖含量,采用含有机质丰富的材料栽培杏鲍菇可提高海藻糖和多糖的含量,在基本培养基中添加15%大麦虫沙栽培时,杏鲍菇鲜品的海藻糖含量可达2.03g/100g,提高了54.9%,添加20%的沼渣时,多糖含量可提高约一倍。 相似文献
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以杏鲍菇为主要原料,添加适宜辅料,将其加工成类似火腿肠的凝胶食品。通过单因素和正交实验,研究了大豆蛋白、玉米淀粉、卡拉胶添加量对杏鲍菇肠品质特性的影响,在此基础上探讨了肉的种类和添加量对菇肠品质的影响。结果显示,以100g杏鲍菇浆料为基准,添加15%大豆蛋白、12%玉米淀粉、0.4%卡拉胶,杏鲍菇肠品质较好;添加30%鸡肉或猪肉,可进一步改善产品品质。扫描电镜观测显示,杏鲍菇肠内部呈现良好的空间网络状结构,构成稳定的凝胶体系。对杏鲍菇肠保藏特性研究显示,添加20%鸡肉肠经100℃、30min杀菌可在4℃保藏51d。该研究为杏鲍菇及食用菌的精深加工提供了有效途径。 相似文献
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试验以杏鲍菇为主要原料,以豆瓣酱、五香粉等辅料,研究五香味杏鲍菇酱罐头的最佳加工工艺.以豆瓣酱添加量、五香粉添加量和白砂糖添加量为单因素,通过单因素试验和响应面法优化出最优配方.确定制作五香味杏鲍菇酱罐头的最佳工艺参数:豆瓣酱添加量为16%,五香粉添加量为5%,白砂糖添加量为3%时,制作的罐头口感较好,感官得分为86.... 相似文献