碱性蛋白酶酶解鸡蛋清抗氧化肽的分离纯化

用碱性蛋白酶水解蛋清制备酶解液,通过超滤、离子交换、凝胶层析等手段对鸡蛋清酶解液抗氧化肽进行分离纯化并用薄层层析检验其纯度。研究表明,鸡蛋清酶解液经超滤除去杂蛋白,经DEAE-52离子层析分离出5个组分,其中组分2的抗氧化活性最强,超氧阴离子半抑制(IC50)质量浓度为13.32mg/mL,纯化倍数为2.51,蛋白回收率为25.04%。组分2经Sephadex G-25葡聚糖凝胶进一步分离得3个组分,其中组分3超氧阴离子的清除活性最强,其IC50为5.63mg/mL,纯化倍数达到5.93,蛋白回收率为13.42%,经薄层层析检测为单点,说明蛋清抗氧化肽得到纯化。     

花生蛋白制备ACE抑制肽的初步分离纯化研究

采用30 ku、10 ku、5 ku三级超滤将酶解液进行分离和浓缩。三级超滤的结果表明:10 ku的透过液的半抑制浓度(IC50)最低为1.32 mg/m L。采用葡聚糖G-15对酶解液10 ku的透过液进行脱盐和分组,结果表明:脱盐率达到了94.50%,花生多肽的回收率为78.23%。分离的4个峰中峰4的IC50最小为0.634 mg/m L,说明峰4的ACE抑制活性效果最好。将峰4的组分进行LCMS检测,得到ACE抑制肽主要的相对分子质量为1 193.5、1 512.6、1 530、1 608.9、1 777.6。     

利用人工神经网络优化制备鳙鱼抗氧化肽

生物活性肽的制备受到酶用量、酶解时间等因素的影响,利用具有自学习特点的人工神经网络可实现对酶解过程的模拟仿真。以大宗淡水鱼资源-鳙鱼肉蛋白为原料,对其进行控制酶解以制备出具有清除自由基活性的鳙鱼肽,为获得最大的清除自由基活性,采用3层（5-13-1）BP网络对酶解过程进行模拟和优化。结果表明：1）pH 7.5,酶解温度60 ℃,酶/底物为0.2%,酶解时间为4.8 h,鱼肉/水为1∶1.9时可制备出具有最强清除DPPH·自由基的肽A;2）pH　7.5,酶解温度60?℃,酶/底物为0.16%,酶解时间为6?h,鱼肉/水为1∶1.4时可制备出具有最强清除OH·自由基的肽B;3）pH7.5,酶解温度60　℃,酶/底物为0.2%,酶解时间为4.3　h,鱼肉/水为1∶1时可制备出具有最强清除O2·-自由基的肽C。研究证明人工神经网络以其处理非线性问题的优越性可成为模拟和优化酶解过程的方便工具。     

乳清中酪蛋白糖巨肽的制备及纯化研究

研究了凝乳酶对酪蛋白的最佳酶解条件,确定了其最佳酶解参数为：酶解温度50℃,pH6.5,酶和底物比3%,酶解时间90 min.酶解后通过12%TCA沉淀法得到纯度为85.25%的酪蛋白糖巨肽.     

乳清中酪蛋白糖巨肽的制备及纯化研究

研究了凝乳酶对酪蛋白的最佳酶解条件,确定了其最佳酶解参数为酶解温度50℃.pH6.5,酶和底物比3%,酶解时间90 min.酶解后通过12%TCA沉淀法得到纯度为85.25%的酪蛋白糖巨肽.     

牛蒡多糖的分离纯化及其抗氧化活性研究

采用离子交换树脂对牛蒡多糖提取液进行脱色和脱蛋白处理,后经超滤进一步分离纯化提高产品的纯度.通过单因素和正交试验优化确定了树脂脱色的工艺参数：阴离子交换树脂D301-F为脱色树脂,用量30g,料液pH值4.5,吸附流速0.5mL/min,脱色率达92.68%,多糖保留率85.53%,蛋白质去除率90.27%.通过考察超滤膜分子质量大小、压力、温度和时间等因素对超滤的影响,优化确定了适宜的操作条件：膜截留分子质量1万,超滤温度25℃,压力0.10MPa,超滤时间10min,此时多糖截留率94.05%,膜通量2.59mL·cm^-2·min^-1,多糖纯度达到85.82%.抗氧化活性实验表明：纯化牛蒡多糖具有较强的清除DPPH自由基和羟基自由基的能力,超滤能够有效避免成分损失,保持多糖的活性,具有一定的工业应用前景。     

南瓜多糖提取分离纯化及其抗氧化活性的研究进展

南瓜多糖是一类具有重要生物活性的功能性成分,其具有广泛的开发前景。对南瓜多糖的提取、分离纯化及抗氧化活性的研究现状进行综述,并展望了其今后研究方向及开发应用前景。     

酶法制取鱼皮胶原蛋白短肽

采用高效、环保的水解方法提取了鳕鱼皮中的胶原蛋白,并应用木瓜蛋白酶制取鱼皮胶原蛋白短肽,根据胶原蛋白的提取率确定了提取的最适反应条件,通过纸层析和SDS-PAGE电泳技术分析了鱼皮胶原蛋白的水解情况。结果表明,酶与原料比为1∶300、酶反应时间10 h、反应温度55℃、pH值为6.8,胶原蛋白的提取率最高;鱼皮胶原蛋白的水解产物主要以6~29 ku的小分子质量的短肽形式存在。以废弃鳕鱼皮作实验材料,可减少环境污染,节约资源,提高水产品废弃物的附加值。     

凝胶过滤分离纯化酪蛋白糖巨肽的研究

酪蛋白糖巨肽具有重要生理功能,可广泛地应用于保健食品和药品。以Superdex 75 10/300 GL为分离介质,对酪蛋白的凝乳酶水解物中的酪蛋白糖巨肽进行分离纯化研究,结果表明,分离纯化CGMP的适宜条件为:0.1M醋酸铵平衡上样、洗脱,洗脱流速0.5ml/min;酶解上清液浓缩25倍上样,上样体积0.5ml。分离所得的CGMP由分子量分别为43000Da、30000Da和25000Da,糖基化程度分别为71.6μg/mg、99.1μg/mg和44.4μg/mg的三个组分组成,其平均糖基化程度为76μg/mg,总蛋白回收率为1.45%。     

毕赤酵母表达风味强化肽的分离与纯化

为了开发新型风味强化剂,采用硫酸铵分段盐析法、中空纤维超滤、阴离子交换树脂分离等方法,对构建的工程菌P.postoris GS115—16B2发酵表达的16拷贝风味强化肽的分离纯化效果进行研究．实验结果表明,分离纯化最佳方法为：首先使用中空纤维进行超滤浓缩,经过两次稀释过滤浓缩后的浓缩液再采用离子交换树脂DEAE-52进一步分离纯化．经SDS—PAGE检测,纯化后16拷贝风味强化肽的平均纯度可达93．19％．     

酶法制备富硒糙米抗氧化肽的研究

采用酶法制备富硒糙米抗氧化肽,研究了酶种类、酶解时间、酶解温度、底物浓度、pH和加酶量对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶较适宜制备富硒糙米抗氧化肽。在单因素的基础上,以总抗氧化能力为指标,采用响应面法优化了富硒糙米抗氧化肽的最佳制备工艺,其条件为:底物浓度3%,pH 8.0,酶解时间2.0 h,温度50℃,加酶量7 550 U/g。该条件下制备的抗氧化肽的总抗氧化能力为(16.16±0.22)μmol/g。抗氧化肽在食品特别是功能性食品中的应用,对于保持食品品质、提高机体抗氧化机能具有积极作用。     

酶法制取鱼皮胶原蛋白短肽

采用高效、环保的水解方法提取了鳕鱼皮中的胶原蛋白,并应用木瓜蛋白酶制取鱼皮胶原蛋白短肽,根据胶原蛋白的提取率确定了提取的最适反应条件,通过纸层析和SDS-PAGE电泳技术分析了鱼皮胶原蛋白的水解情况。结果表明,酶与原料比为1∶300、酶反应时间10 h、反应温度55℃、pH值为6.8,胶原蛋白的提取率最高;鱼皮胶原蛋白的水解产物主要以6~29 ku的小分子质量的短肽形式存在。以废弃鳕鱼皮作实验材料,可减少环境污染,节约资源,提高水产品废弃物的附加值。     

海参水煮液中ACE抑制肽的分离纯化

采用大孔树脂吸附的方法对海参水煮液酶解物多肽进行分离。用30%、60%和90%乙醇水溶液依次洗脱,得到3种多肽。对所得多肽进行ACE抑制活性测定,发现其IC50分别为3.01、0.98和2.88mg/mL。应用Rp18反相硅胶柱和LH-20葡聚糖凝胶柱对活性最高的组分进行ACE抑制肽分离纯化,得到2种多肽单体,ACE抑制活性的IC50分别为0.74和1.77mg/mL。     

超声波辅助酶解制备花生抗氧化肽的研究

选用风味酶、Alcalase酶和双酶酶解花生蛋白,采用超声波辅助酶解制备花生抗氧化肽.以水解度为评价指标,研究超声预处理、水浴处理和超声波与酶同时处理对花生分离蛋白酶解过程的影响.结果表明:3种酶解过程中,在相同酶解时间下,超声预处理的水解度均大于水浴处理和超声波与酶同时处理.超声预处理辅助Alcalase酶酶解8h时水解度最大,为29.81％.酶解过程中随着水解度增大,花生肽的还原力均呈现先增高后降低的趋势.Alcalase酶超声预处理条件下制备的花生肽还原力最大,其抗氧化能力相当于浓度为50.92 μg/mL的Vc.     

多汁乳菇多糖的分离纯化及三种食用菌多糖的抗氧化研究

以多汁乳菇子实体为原料,采用水提醇沉辅助超声破碎提取多糖,经Sevage除蛋白得到多汁乳菇多糖,并通过体外实验比较多汁乳菇多糖(refined polysaccharide from Lactarius volemus Fr.,RPLV)、白玉菇多糖(refined polysaccharide from White Hypsizigus marmoreus,RPHM)、姬菇多糖(refined polysaccharide from Pleurotus cornucopiae,RPPC)对·OH、·O^-₂、DPPH自由基的清除率及还原力来评价三者的抗氧化活性. 结果显示,RPLV的糖含量为66.44%,蛋白质含量为3.57%; RPLV、RPHM、RPPC均可较好地清除·OH、·O^-₂、DPPH自由基、增强还原力,且均随着浓度的增加而增强; 抗氧化活性从强到弱依次是RPPC、RPHM、RPLV. 研究结果表明,3种食用菌多糖尤其是RPPC均有望开发成良好的天然抗氧化剂.     

白藜芦醇提取及分离纯化研究进展

白藜芦醇是一种多酚类化合物,具有多种药理活性.本文对近年来自藜芦醇的提取和纯化工艺研究进展进行综述,以期为开发利用白藜芦醇提供依据.     

辣椒碱的分离纯化及分析

为得到高纯度辣椒碱 ,本实验以辣椒精为原料 ,利用多种柱色谱技术进行分离和纯化 ,得到一白色针状晶体 ,经红外及HPLC检测为辣椒碱和二氢辣椒碱的混合物。其中 ,辣椒碱占 65 % ,二氢辣椒碱占 3 5 % ,辣椒碱总含量达到 1 0 0 %。     

制备高效液相色谱法分离纯化牛蒡子木脂素

运用制备高效液相色谱法分离纯化牛蒡子中木脂素类化合物。采用制备高效液相色谱法,对木脂素类化合物进行分离纯化。根据理化常数和波谱数据对化合物的结构进行鉴定。结果表明:从牛蒡子中分离得到牛蒡子苷和拉帕酚C 2种木脂素类化合物。该分离纯化方法简便、快速,可为牛蒡子药材的质量控制提供科学依据。     

低分子量肝素的制备及纯化

本文以猪肠粘膜肝素钠粗品为原料．采用亚硝酸控制解聚法制备分子量在５０００～６０００的低分子量肝素。探索了反应温度、时间、搅拌速度、亚硝酸浓度、溶液的ｐＨ值等对解聚反应的影响。经自制的ＳｅｐｈａｄｘＧ－７５柱（１．８×４５ｃｍ）对解聚的低分了量肝素进行分离、纯化,得到８种分子量分布均匀的片段。山红外光谱,１Ｈｎｍａｒ,１３Ｃｎｍｒ谱图对其结构作了鉴定。测定了产物的平均分子量,理比性能和抗凝效价。对低分子量肝素的抗血栓形成的影响作了初步试验。结果表明;亚硝酸控制解聚法制备低分子量肝素,反应条件温和、成本低、产物经冷冻干燥后．产率高,容易推广。以家兔颈动脉血栓模型研究表明．分子量为５２００的片段比等剂量标准肝素钠（ＳＨ）的血栓抑制率强．在临床上将会有更好的疗效。     

大枣多糖的提取分离及纯化研究

研究了大枣多糖的提取分离工艺,并用正交试验对溴化十六烷三甲基胺(CTAB)络合精制大枣多糖的工艺进行了优选,得出最佳纯化工艺条件为——以1∶1的体积比加入w=2%的CTAB,在35℃下保温静置4h,所得大枣多糖经紫外光谱扫描,不具有蛋白质和核酸的特征吸收峰;红外光谱分析表明,特征吸收峰为3425.62cm-1,2927.32cm-1,1623.87cm-1,1419.14cm-1,1238.35cm-1,1025.56cm-1.