三唑类衍生物对肝癌细胞株BEL-7402增殖的影响

通过体外药敏性实验,对几种三唑类衍生物抗肿瘤活性进行了研究,从Cf、Db、Cc、Cg、Dc 5种三唑类化合物中筛选出Db。实验表明,Db对肝癌细胞株BEL-7402增殖有明显的抑制作用,抑制率呈浓度和时间依赖性。进一步实验证明,Db能够通过引发细胞产生自由基、线粒体膜电位下降等途径诱导细胞凋亡。     

苯并三唑化合物Bz引发4T-1乳腺癌细胞凋亡

观察苯并三唑化合物(Bz)诱导小鼠乳腺癌(4T-1)细胞系,考察了诱导细胞凋亡的生物学效应。结果表明,Bz显著抑制小鼠乳腺癌4T-1细胞的生长,呈浓度和时间依赖性;4T-1细胞经Bz作用后,细胞增殖周期延长,增殖速度减慢,ATPase活性降低;膜电位检测结果表明,Bz能够引起细胞线粒体膜电位显著下降。Bz具有诱导小鼠乳腺癌4T-1细胞凋亡的作用,其机制可能是通过引发细胞线粒体膜电位下降而诱导细胞凋亡。     

点击化学应用于合成1,2,3-三唑衍生物的研究进展

1,2,3-三唑是一类具有重要生物活性的杂环化合物,在医药、农药等领域都得到了广泛的应用.点击化学(click chemistry)的代表反应为铜催化的叠氮-炔基Husigen环加成反应.综述了近年来国内外学者使用不同新型催化剂和试剂进行点击化学(click chemistry),用于合成1,4-二取代、1,5-二取代和1,4,5-三取代1,2,3-三唑衍生物的研究进展.     

从共振能的角度研究4种苦基三唑衍生物的撞击感度

共振结构在芳香族硝基化合物、杂环硝基化合物以及高氮化合物中普遍存在,准确计算这些化合物中的共振能,对预测含能材料的冲击波感度,合理设计与合成新型含能材料分子具有重要意义。采用密度泛函BLYP／DNP方法,结合等键反应方程计算了4种苦基三唑衍生物的共振能。计算结果表明,4种苦基三唑衍生物的共振能与其撞击感度（H50）有内在联系,共振能越大,撞击感度越低。     

含3-三氟甲基的均三唑并[3,4-b]-1,3,4-噻二唑类化合物的合成

以 3-三氟甲基 - 4-氨基 - 5 -巯基 - 1 ,2 ,4-三唑为原料 ,分别与 2 - ,3- ,4-吡啶甲酸及α-萘乙酸在 POCl3催化下反应 ,制得 4种新的 3-三氟甲基 - 6-取代均三唑并 [3,4- b]- 1 ,3,4-噻二唑( 3a～ 3d) ,并利用 EA,IR,1H NMR等确定了其结构     

四(3-硝基-1,2,4-三唑基)硼酸钾的合成及性能表征

以硼氢化钾和3-硝基-1,2,4-三唑为原料,经过配位取代反应合成了一种新的含硼高能化合物四(3-硝基-1,2,4-三唑基)硼酸钾,并利用红外光谱、 X射线衍射(XRD)、 X射线能谱分析(EDS)、扫描电镜(SEM)及X射线光电子能谱分析(XPS)对四(3-硝基-1,2,4-三唑基)硼酸钾的结构、形貌进行了表征.结果表明,四(3-硝基-1,2,4-三唑基)硼酸钾的形貌为无定型絮状,具有含硼含能材料的结构特点.采用差示扫描量热法(DSC)、氧弹量热法和热力学定律研究四(3-硝基-1,2,4-三唑基)硼酸钾的热性能并计算其热分解动力学参数.结果显示,在DSC曲线中只有一个分解放热峰,峰温为338.7℃,表明其拥有良好的热稳定性;活化能E=228.24 kJ·mol^-1,指前因子A=1.98×10¹⁰ min^-1,标准生成焓为1 841.61 kJ·mol^-1.运用EXPLO5(V6.02)程序预测其密度为1.872 5 g·cm^-3,爆速为8 042 m·s^-1     

3-(烷基/3＇-氯苯基)-6吡哌酸基均三唑并[3,4-b]-1,3,4-噻二唑的合成

利用3-(甲基/乙基/3＇-氯苯基)-4-氨基-5巯基-1,2,4均三唑在POCl3催化剂作用下同吡哌酸反应,合成了3个新的3-(甲基/乙基/3＇-氯苯基)-6吡哌酸基均三唑并[3,4-b]-1,3,4-噻二唑(Ⅱa-c)并对波谱性质进行了讨论.     

3-(烷基/3′-氯苯基)-6吡哌酸基均三唑并[3,4-b]-1,3,4-噻二唑的合成

利用３－（甲基／乙基／３′－氯苯基）－４－氨基　－　５巯基－１,２,４均三唑在ＰＯＣ１＿３催化剂作用　下同吡哌酸反应,合成了３个新的３－（甲基／乙基／３′氯苯基）－６吡哌基均三唑并［３,４－　ｂ］－１,３,４－噻二唑（Ⅱａ　－ｃ）并对波谱性质进行了讨论。     

放线菌素D诱导的SL-1细胞凋亡的初步研究

研究了一定浓度的放线菌素D诱导SL-1细胞凋亡作用.以终浓度为50ng/mL,100ng/mL,200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理正常SL-1细胞,24h后,终浓度为200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理的细胞出现较明显的细胞凋亡现象,光学显微镜下可见细胞膜表面突出或形成小泡,细胞碎裂成凋亡小体;DAPI染色荧光显示细胞核逐渐形变,直至碎裂成小块而被凋亡小体包裹;DNA琼脂凝胶电泳呈典型的凋亡细胞DNA梯形条带;流式细胞仪检测结果,对照和以上四种浓度的放线菌素D处理的细胞凋亡率分别为3.43%,10.61%,15.60%,32.67%,72.24%.实验结果证明一定浓度的放线菌素D能诱导SL-1细胞凋亡,且成剂量正相关.     

蛋白酶体抑制剂MG132诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的机制

研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO)诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的作用与机制.实验采用不同浓度梯度和时间梯度,通过荧光显微镜、Hoechst33342染色、MTT检测和Western 印迹分别检测MG132 对Hep3B细胞的形态、凋亡小体形成、细胞存活率、细胞凋亡相关蛋白表达的影响.结果表明,MG132能够选择性抑制肝癌细胞生长,对正常肝细胞没有明显影响.此外,MG132可以通过内质网应激途径诱导肝癌细胞Hep3B凋亡,呈现剂量和时间的双重依赖性.提示通过抑制蛋白酶体来达到诱导肿瘤细胞凋亡的方法是可行的,MG132此类药物的研究与应用将为肿瘤治疗提供新的选择.     

流感病毒感染诱导宿主细胞凋亡的形态学观察

采用Hoechst 33258荧光染色和透射电镜观察了受流感病毒感染的狗胚肾传代细胞的形态这特征,结果表明,病毒感染24h后,MDCK细胞产生明显的染色质凝聚,核破裂及形成凋亡小体等现象。早期的形态改变是染色质浓集成块,分散排列在核膜周边,胞质亚显微结构正常;随后出现胞浆膜或核膜内陷,将细胞分割成多个大小不等的不连续凋亡小体,小体外有质膜包裹,多数小体内有核质成份,流感病毒感染可诱导MDCK细胞凋亡。     

融合蛋白sCAR-TSP-1原核表达纯化及诱导白血病细胞K562凋亡的研究

根据thrombospondin-1(TSP-1)氨基酸序列(RFYVVMWK),以已有的腺病毒受体sCAR为模板,将8个氨基酸对应基因核苷酸通过PCR扩增于sCAR之后,得到sCAR-TSP-1,连接到表达载体pQE30上,转化大肠杆菌M15后获得工程茵。该菌株经IPTG诱导后,高效表达出带有组氨酸标签以包涵体形式存在的融合蛋白sCAR-TSP-1。包涵体经过尿素变性溶解、PBS稀释复性、Ni离子亲和层析柱纯化,获得目的蛋白。SDS-PAGE分析表明,有一条明显的特异性蛋白条带。同时细胞实验结果表明融合蛋白sCAR-TSP-1对白血病细胞K562有明显凋亡作用。     

融合蛋白sCAR—TSP-1原核表达纯化及诱导白血病细胞K562凋亡的研究

根据thrombospondin-1（TSP-1）氨基酸序列（RFYVVMWK）,以已有的腺病毒受体sCAR为模板,将8个氨基酸对应基因核苷酸通过PCR扩增于sCAR之后,得到sCAR—TSP-1,连接到表达载体pQE30上,转化大肠杆菌M15后获得工程菌。该菌株经IPTG诱导后,高效表达出带有组氨酸标签以包涵体形式存在的融合蛋白sCAR-TSP-1。包涵体经过尿素变性溶解、PBS稀释复性、Ni离子亲和层析柱纯化,获得目的蛋白。SDS-PAGE分析表明,有一条明显的特异性蛋白条带。同时细胞实验结果表明融合蛋白sCAR-TSP-1对白血病细胞K562有明显凋亡作用。     

幽门螺杆菌VacA毒素诱导凋亡

研究了天然VacA细胞空泡毒素蛋白诱导细胞空泡和凋亡的生物学活性.培养空泡毒素阳性的Hp菌株,超声碎菌后提取上清,用SDS—PAGE分析上清中目的条带,测定其蛋白含量,用电镜观察VacA致Hela细胞空泡样变,然后用MTT法检测Hela细胞的生长曲线后,分别用MTT法分析VacA对Hela细胞的生长抑制作用,以及用TUNEL法和流式细胞技术检测VacA蛋白致凋亡的细胞毒活性.实验结果表明,在PAGE上可见相应VacA蛋白条带,电镜下天然VacA毒素致Hela细胞空泡化明显,因此VacA毒素可以抑制Hela细胞的生长,并且诱导其凋亡;在倒置显微镜下观察可见细胞空泡、脱落,胞浆浓缩,胞核皱缩、碎裂,呈现圆形固缩状态.MTT法数据示H.pylori Va-cA蛋白具有浓度依赖性地致细胞毒活性,光镜下可见TUNEL法中可显示棕黄色凋亡细胞,因此证明幽门螺杆菌VacA蛋白有明显的诱导Hela细胞凋亡的作用.     

微囊藻毒素-LR诱导3T3永生细胞恶性转化

探讨微囊藻毒素-LR(MC-LR)对3T3永生细胞恶性转化的诱导作用.将小鼠成纤维永生细胞3T3在含有MC-LR的培养液中培养3周后,通过细胞生长实验、血清依赖性实验和软琼脂克隆培养等方法检测3T3细胞一系列生物学特性的变化,初步确定3T3细胞在MC-LR的诱导下发生了恶性转化,并将转化后的3T3细胞注射到SCID小鼠背部皮下,检测其体内致瘤性.3T3细胞在MC-LR的诱导作用下,细胞的形态发生明显变化,接触抑制性消失,生长速度增快,对血清的依赖性显著降低,并能在软琼脂培养中形成克隆.转化后的3T3细胞在SCID小鼠体内呈浸润性生长,成瘤率100%,而正常3T3细胞在SCID小鼠体内未见肿瘤形成.可见,体外培养3T3永生细胞在MC-LR的诱导作用下可以发生恶性转化.