基于核酸外切酶Ⅲ降解原理荧光检测乙肝病毒HBV

利用核酸外切酶Ⅲ降解杂交的DNA链,将荧光素修饰的DNA探针释放到溶液中,通过测定溶液的荧光强度来测定乙肝病毒(HBV)的浓度。考察了缓冲溶液的种类、pH值、反应时间等对反应体系荧光强度的影响,确定了最佳反应条件:最佳缓冲溶液为TT缓冲溶液(pH8.0,250 mmol.L-1Tris-HCl,体积分数0.1%Tween 20),缓冲溶液的最佳pH值为9.0,生物素与亲和素最佳结合时间为25 min,DNA的最佳杂交时间为20 min,酶反应最佳时间为1.1 h。在最佳反应条件下,随着HBV浓度的增加,体系的荧光强度明显增强。该方法测定HBV的线性范围为0.5～5.0 pmol.L-1,检测限为0.335 pmol.L-1。     

β-甘露糖酶降解黄原胶的工艺参数研究

考察了β-甘露糖酶降解黄原胶的影响因素,包括pH值、反应时间、底物浓度、反应温度及酶的加入量。初步确定降解的最佳条件:反应体系的缓冲液pH=7;反应时间2 h;黄原胶质量浓度5mg·mL~(-1);温度90℃;酶的体积分数5%。通过正交试验,确定加热温度为反应过程中的显著因素。     

纤维素外切酶CelC7的异源表达及降解黄原胶性能

为开发新型黄原胶外切酶、获得聚合度高度集中的黄原胶活性寡糖,对来自牛瘤胃真菌的纤维素酶CelC7的编码基因进行全基因合成,并在大肠杆菌中进行异源表达。该基因大小为1 032 bp,编码344个氨基酸残基,表达蛋白产物理论分子质量为40 ku,属于糖苷水解酶GH7家族。该酶在大肠杆菌中高效可溶性表达,经过Ni-NTA亲和层析纯化后,可得到纯度达90%的纯酶。酶学性质分析结果表明,该酶最适反应温度为50℃,最适pH为6.0。CelC7能够有效地对黄原胶主链进行特异性切割,将其水解为低分子质量寡糖。亚铁离子螯合活性实验结果显示,该低分子质量寡糖对亚铁离子螯合活性的半清除活性IC₅₀为3.60 mg/mL,表明成功制备黄原胶活性寡糖。     

产β-甘露聚糖酶菌株的筛选及产酶条件优化的研究

本实验用培养基透明圈法从7种芽孢杆菌中筛选到酶活最高的三株芽孢杆菌(枯草芽孢杆菌4.37、高龙枯草芽孢杆菌w-031 3.83、地衣芽孢杆菌3.83)。用测定发酵液酶活的方法进行菌株的复筛,酶活最高的菌株为枯草芽孢杆菌。对该菌产酶条件进行了单因素实验发酵条件的优化,最优产酶条件为:最佳碳源是魔芋粉,含量为4%,最佳有机氮源为酵母浸粉,最佳无机氮源为硝酸钠,最佳产酶时间为36 h。     

一株高产细胞表面植酸酶酵母的产酶性质

对一株高产细胞表面植酸酶酵母突变株WZ 4菌的细胞植酸酶性质进行了研究,结果表明:该酶的最适pH为5,最适温度为50℃,Km为0.666mmol/L。此外,WZ 4菌产植酸酶受控于培养基中的磷的质量浓度,最大产酶磷的质量浓度为50mg/L,当磷的质量浓度大于0.1g/L时产酶被完全阻遏。     

豆豉纤溶酶的酶动力性质研究

对豆豉纤溶酶(DFE)的催化动力学性质进行了研究,结果表明:酶的相对分子量为41 970,是一种新的豆豉纤溶酶;酶最适用pH为7.0,酶活力在pH7~8范围内最稳定,在pH8~10范围内相对稳定,在pH4以下降为0;最适作用温度为41℃,在37~45℃范围内,酶活性均较高,在15℃时酶的保存稳定性最好;Hg2+大大降低了酶活性,Fe3+和L i+则能显著提高酶活性;以酪蛋白为底物时,纤溶酶催化的反应受到底物的抑制.     

新型D-氨基酰化酶的特性及固定化酶的研究

本文研究了一株具有N-酰基酰化酶（DAA）生产能力的细菌,通过对其酶学特性及固定化酶用于D-氨基酸的生产进行了研究。显示此酶的最适温度为37℃,最适pH7.4,1mmol/L以下的CaCl2,CdCl2,CoCl2,CuCl2,FeCl2,HgCl2, MnCl2,ZnCl2对酶的活性没有影响,在20mmol/L的EDTA条件下仍可保持65%的酶活性。底物特异性显示酶的最佳底物是N-乙酰-D-苯丙氨酸,50mmol/L以上的N-乙酰-D-苯丙氨酸显著抑制酶的活性。利用海藻酸钠固定酶后,在30℃条件下,使用50mmol/L的N-酰基-D-苯丙氨酸底物进行的降解实验显示水解率可以达到84%,转化批次达到6次以上,活性保持达到70小时以上。     

鲜切茄子酶促褐变的过氧化物酶的特性研究

鲜切茄子在切片、贮藏和货架销售过程中易发生酶促褐变,从而降低其品质。文章对鲜切茄子褐变的过氧化物酶的酶学特性进行了深入研究。结果表明：茄子皮的过氧化物酶活性略高于茄子肉,过氧化物酶的最适pH为6左右,在pH6～8范围内较稳定;该酶的最适反应温度为40℃左右,对热稳定性较差,90℃加热4 min,过氧化物酶完全失去活性。考察了抗坏血酸、L-半胱氨酸、亚硫酸氢钠对茄子过氧化物酶的抑制作用,其抑制效果依次是抗坏血酸〉L-半胱氨酸〉亚硫酸氢钠。     

白腐菌TP21漆酶分离纯化及其部分酶学特性的研究

白腐菌TP21漆酶粗酶液经过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Cellulose离子交换层析,得到了电泳纯的漆酶,总酶活回收率达到25.7%,纯化了37.1倍,酶的相对分子质量为61.5×103,其最适作用温度为45℃.漆酶催化愈创木酚的vm和Km分别为4.5×10-3mm01.L-1·min-1和2.22×10-5mmol/L.金属离子K 和Mn2 对酶有激活作用,Fe2 、Fe3 、Ca2 和Co2 对酶活有很大的抑制作用.     

双酶酶解11S球蛋白的工艺优化研究

以大豆分离蛋白为原料,采用等电点冷沉法提取11S大豆球蛋白,选用碱性蛋白酶、胃蛋白酶对11S大豆球蛋白进行双酶酶解。以水解度为指标,考察酶添加量、温度、p H和时间对酶解液水解度的影响,通过单因素试验和正交试验得到最佳水解工艺条件。在单酶水解的基础上,组合碱性蛋白酶和胃蛋白酶,按照分步水解的方式对11S大豆球蛋白进行复合酶解,得到的最优参数为:胃蛋白酶在温度35℃、p H 3.0、酶添加量1 500 U/g的条件下水解1 h,碱性蛋白酶在温度50℃、p H 10、酶添加量12 000 U/g的条件下水解5 h,得到的11S球蛋白酶解物水解度为19.65%,比碱性蛋白酶单酶水解时高14%。     

ZNF 219基因核定位信号序列的确定

ZNF2 19是新发现定位在人 14号染色体 q11带上的特异性锌指基因 .本实验对其核定位信号的识别说明其中有两组核定位序列存在 ,因此通过将ZNF2 19的核定位序列(NLS)与N -端增强绿色荧光蛋白载体 (pEGFP N1)构建成质粒 (pEGFP ZNF2 19NLS) ,然后瞬时转染到COS靶细胞 ,实验结果表明 :绿色荧光蛋白 (GFP)进入细胞核区     

互信如何可能?

主体间的互信问题是当代社会关系构建的重要问题之一.在全球化、市场化背景下,这一问题主要表现为两个方面,即"陌生人之间的互信是否可能?"和"经济人之间是否可以建立起互信?"加强人与人之间的平等对话与沟通,构建一个值得信赖的制度环境,提高不同角色主体的道德修养,是互信之所以可能的关键.     

互信如何可能？

主体间的互信问题是当代社会关系构建的重要问题之一。在全球化、市场化背景下．这一问题主要表现为两个方面．即“陌生人之间的互信是否可能?”和“经济人之间是否可以建立起互信?”加强人与人之间的平等对话与沟通．构建一个值得信赖的制度环境．提高不同角色主体的道德修养．是互信之所以可能的关键。     

一种面向物品定位的射频标签定位方法

面向智能空间中基于RFID的物品定位任务要求,针对RFID在应用中难以确定标签与天线的相对位置这一问题,提出了一种RFID标签定位方法。首先建立了一种多功率RFID标签识别率模型,统计得到多功率条件下RFID标签的识别率上下界,将多功率下的RFID标签定位问题转化为不确定信息融合问题。将单功率贝叶斯估计结果用于构造基本信度赋值函数,对多功率下的RFID标签定位信息采用DSmT广义融合机进行信息融合,进而将融合结果用于识别范围内的随机粒子加权估计RFID标签位置。RFID标签定位实验结果表明,使用该RFID标签定位方法的定位误差可达025m以下,物品搜索效率比传统方法提高约60％,能够满足物品定位的要求。     

休闲哲学是如何可能的

＂休闲哲学＂早已成为学术习语,但是对其可能性至今仍然缺乏严肃论证。休闲哲学无论在实践上还是在理论上都具有充分的可能性,这种可能性并不存在于哲学自身、人性内部以及对休闲和哲学的种种理解或阐释之中,而是存在于人在休闲中不仅＂成为人＂而且＂成为哲人＂的过程之中,存在于人在休闲中的那种自足、幸福的生命体验及其状态中,存在于人在休闲中与世界的和谐关系的状态和境界,以及人对世界的欣赏、享受等美的体验之中。休闲哲学对于人性、科学和文明都具有非常重要的意义。     

确定可能的铁电态的方法

本文叙述了一种确定可能的铁电态的方法的概要。这种方法可以简单地将可能的极化方向完全确定。经全面核对,此法结果与Shuvalov及Aizu的结果完全一致。     

基于MSAP的边缘接入网设计方案研究

由于接入网环境复杂,用户需求多种多样,而且随着对带宽要求的不断增大,对资源管理的要求提高,传统的接入网技术已经不能满足需求,为此MSAP技术应运而生.本文介绍了一种基于MSAP技术的接入网的设计方案,并讨论了其关键技术.     

构造移位寄存器全部序列的方法——质圈合并法和M圈分离法

作者提出了移位寄存器循环序列(又称为圈)应分为质圈和复合圈的概念。又证明了n级移位寄存器的全部质圈就是n-1级移位寄存器的全部圈。在分析质圈和复合圈的各种性质的基础上,提出了两种构造移位寄存器全部序列,即全部圈的方法:质圈合并法和M圈分离法。用这两种方法可以构造出目前还没有有效方法构造出的n=5的全部移位寄存器序列。结果表明n=5的序列(圈)共有30176个。这些结果已储存在计算机的软盘中,占900K的存贮空间。并用各种方法验证了它们的正确性。各种长度的循环序列的总数,已列成表附在文中。并用二进制码将各种序列打印成表,合计300页,以备选用。     

防静电包装及其发展趋势

本文叙述了防静电包装的重要性,防静电包装的概念与防静电包装材料电阻率范畴(Ps、Pv);评述了防静电包装材料的现状与新进展,以及防静电包装技术在静电敏感产品(ESSD)包装中的应用,最后指出了防静电包装的发展趋势与良好的市场前景。     

GIS辅助定位系统

针对,TI定位芯片CC2431在参考节点少于3个的情况下无法定位的问题,融合非测距定位的思想,提出了新的GIS辅助定位算法.结合该算法实现的ZigBee无线定位系统,可提供良好的定位性能.实验表明,当参考节点仅为两个时,仍能获得精确的定位;当参考节点少于1个时,可以得到区域估计信息.