食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因及其表达检测

金黄色葡萄球菌作为一种常见人类病原菌,可通过各种途径污染食品,引发食物中毒。其中,金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)的分泌会大大增加其侵袭性和致病力。通过对比肠毒素基因的携带及其表达情况,有助于进一步分析肠毒素表达的环境条件,为产肠毒素金黄色葡萄球菌的防范和控制提供理论和数据支持。本研究采用PCR和3M^TMTecra^TM微孔板法分别检测33株食源性金黄色葡萄球菌中5种传统肠毒素SEA^SEE基因的携带及表达情况,结果显示,该批金黄色葡萄球菌中SE基因的检出率为100%,携带率最高和最低的分别为seb(48.48%,16/33)和see(9.09%,3/33)。而其中SE蛋白得到表达的菌株仅为63.64%(21/33),这表明不是有SE基因携带就一定可以有相应毒素蛋白的表达,可能还需相应的系统调控和适宜的环境因素。     

雪菊精油对希氏肠球菌产酪胺及相关基因表达的影响

探讨不同质量浓度雪菊精油对希氏肠球菌(Enterococcus hirae)N47产酪胺的影响机制.利用反转录实时定量聚合酶链式反应分析E.hirae在雪菊精油作用下酪氨酸脱羧途径相关基因的表达情况;利用高效液相色谱法检测不同质量浓度雪菊精油对E.hirae产酪胺的影响.并将E.hirae接入到含不同质量浓度雪菊精油的...     

6种食品防腐剂对金黄色葡萄球菌抑菌效果及肠毒素基因表达的影响

目的：探索6 种食品防腐剂--亚硝酸盐、苯甲酸钠、ε-聚赖氨酸、壳聚糖、茶多酚、Nisin对1 株引起食物中毒的金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用,以及对该菌株所含不同肠毒素基因在mRNA水平表达的影响。方法：按照GB 2760-2014《食品添加剂使用标准》限量标准的质量浓度,分别添加6 种不同的防腐剂在金黄色葡萄球菌SA003初始接菌量约为105 CFU/mL的TSB液体培养基中,37 ℃培养24 h后进行菌落计数;同时收集菌体用于RNA提取,将提取的RNA进行反转录后,采用荧光定量聚合酶链式反应方法检测各肠毒素基因在mRNA水平上的相对表达量。结果：在国标最大限量条件下,不同添加剂对金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用强弱顺序分别为：Nisin＞茶多酚＞壳聚糖＞ε-聚赖氨酸＞苯甲酸钠＞亚硝酸盐。6 种防腐剂均能抑制肠毒素sea、sed、seg、sei、selj、selm、selr和selu基因在转录水平上的表达,但作用效果存在差异。结论：在TSB液体培养基中添加一定剂量的防腐剂不仅能抑制金黄色葡萄球菌的生长,还能够显著降低肠毒素基因的表达量。     

Effect of Gamma Radiation and Oregano Essential Oil on Murein and ATP Concentration of Staphylococcus aureus

ABSTRACT:  The study was carried out to evaluate the effects of gamma-irradiation alone or in combination with oregano essential oil on murein composition of  Staphylococcus aureus  and on the intracellular and extracellular concentration of ATP. The bacterial strain was treated with 3 irradiation doses: 1.2 kGy to induce cell damage, 2.9 kGy to obtain a viable but nonculturable state, and 3.5 kGy to cause cell death. Oregano essential oil was used at 0.010% and 0.013% (w/v), which is the minimum inhibitory concentration (MIC). All treatments had a significant effect ( P  ≤ 0.05) on the murein composition, although some muropeptides did not seem to be affected by the treatment. Each treatment influenced differently the relative percentage and number of muropeptides. There was a significant ( P  ≤ 0.05) correlation between the reduction of intracellular ATP and increase in extracellular ATP following treatment of the cells with oregano oil. The reduction of intracellular ATP was even more important when essential oil was combined with irradiation. Also, irradiation alone of  S. aureus  induced a significant decrease ( P  ≤ 0.05) of the internal ATP and a significant increase ( P  ≤ 0.05) of the external ATP. However, no significant difference ( P  > 0.05) was observed in ATP concentrations between different radiation doses. Transmission electron microscopic observation revealed that oregano oil and irradiation have an effect on cell wall structure.     

番木瓜籽挥发油对变异链球菌的抑制作用研究

研究番木瓜籽挥发油对变异链球菌UA159生物被膜形成及相关毒力基因表达的影响。采用甲基四氮盐(the abated tetrazolium salt,XTT)减低法评价番木瓜籽挥发油对变异链球菌生物被膜的抑制效果,实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)法检测变异链球菌受番木瓜籽挥发油作用后其毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的表达情况。结果显示,番木瓜籽挥发油对变异链球菌的最低抑制生物被膜形成浓度为80μg/mL,qPCR法检测变异链球菌的毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的表达水平受到抑制。表明番木瓜籽挥发油对变异链球菌生物被膜的形成具有抑制作用,并抑制其毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的表达。     

荆芥挥发油药理作用的研究进展

荆芥挥发油有多方面的药理功能,对医药行业有着巨大的开发潜力。本文综述了挥发油药理作用的研究进展情况,着重阐述了荆芥挥发油多种不同药理机制,以期为今后荆芥挥发油的开发和更深层次的研究作综合性的参考。     

柠檬精油抑制酪氨酸酶活性的研究

本文通过测定抑制酪氨酸酶活性,DPPH (1, 6-双(二苯基膦)己烷)清除自由基能力以及铜离子螯合能力,研究了柠檬精油和其组成中的六种挥发性成分抑制酪氨酸酶的机理。结果表明：柠檬精油和挥发性成分对酪氨酸酶均产生良好的抑制作用,通过空间位阻效应和清除氧自由基等非抑制酪氨酸酶活性部位的机理;其中柠檬醛（含量为2.16%）和乙位蒎烯（含量为14.30%）对酪氨酸酶的抑制率分别为76.64%和61.82%,表现出显著的抑制能力;然而,D-柠檬烯（含量为61.41%）的抑制率仅有33.25%;六种挥发成分的协同效应使得这些物质的混合物对酪氨酸酶的抑制作用强于柠檬精油;随着浓度的增加,柠檬精油抑制能力增加,其中达到50%的抑制能力的浓度为620±15.72 μg/mL;Linewear-Burk曲线说明柠檬精油的抑制类型为非竞争性,并且Km=0.30±0.003mM;基于DPPH实验得知柠檬精油和柠檬醛具有较强的清除自由基能力,两者的50%清除率浓度分别为123.65±20.20 mg/mL和176.54±23.20 mg/mL;铜离子螯合实验证明六种组分虽然表现为良好的抑制酪氨酸酶作用但均不与酪氨酸酶活性部位相结合。以上结果表明柠檬精油在食品和化妆品行业中可作为潜在的生物性和功能性天然原料。