HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量

该研究探讨采用HPLC–ELSD(蒸发光散射检测器)法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量。结果表明,选用硅胶色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)分别在0.5 mg/mL~8.0 mg/mL和0.4 mg/mL~6.0 mg/mL范围呈良好线性关系;PC和LPC平均回收率为99.42%和99.83%,相对标准偏差(RSD)分别为1.44%和1.21%。该法对大豆磷脂PC和LPC分析均具有良好精密度和重复性。     

高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量

目的建立高效液相色谱法(highperformance liquid chromatography,HPLC)测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量的分析方法。方法采用高效液相色谱仪、Kromasil 100-5-SIL硅胶柱,以流动相正己烷:异丙醇:水=0.25:4:1(V:V:V),流速为0.5 mL/min,检测波长为207 nm,柱温为30℃,进样量10μL,进行检测。结果磷脂酰胆碱浓度为0.1～2.0mg/mL时,线性关系良好,回归方程的相关系数r2=0.9998,相对标准偏差(relative,standarddeviation,RSD)为0.50%,平均回收率为98.01%～98.73%。结论该方法高效,准确,简便,适合于检测大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱的含量。     

正相色谱法测定大豆磷脂中的磷脂酰胆碱

目的建立正相色谱法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱含量,用于大豆磷脂类保健食品生产过程中该物质含量的测定和质量控制。方法采用硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm)进行分离;色谱条件为流动相:异丙醇:正己烷:蒸馏水=70:16:14(V:V:V),等度洗脱,流速:1.0 m L/min;柱温:40℃;进样量:10μL;检测波长:205nm;并进行方法学验证,考察方法检测限、精密度、回收率等指标。结果磷脂酰胆碱峰面积与其浓度呈良好的线性关系,线性范围为0.1~0.8 mg/m L(r=0.9999),检出浓度0.04μg/m L,检出限为20μg/g,定量限为66.666μg/g,精密度(RSD)为0.6%,平均回收率99.37%(n=9)。结论本文建立的方法灵敏度高,重复性好,且具有很好的专属性,能够应用于大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量的检测。     

大豆粗磷脂中磷脂酰胆碱的分离纯化研究

为了筛选出从醇溶性大豆磷脂中分离纯化大豆磷脂酰胆碱的最佳分离纯化工艺,本文了采用正交设计试验筛选提取大豆磷脂酰胆碱的最佳工艺。结果表明大豆磷脂酰胆碱最佳提取工艺为:按1∶10的料水比进行加热,在78℃恒温下4 h回流提取,重复2次。大豆磷脂酰胆碱的进一步的精制方法为葡聚糖凝胶Sephadex LH-20凝胶柱层析法,并且考察了葡聚糖凝胶Sephadex LH-20对大豆磷脂酰胆碱的纯化能力。首先采用无水乙醇作为葡聚糖凝胶Sephadex LH-20凝胶柱层析洗脱液纯化大豆磷脂酰胆碱,然后将所得的大豆磷脂酰胆碱干燥,最后通过高效液相色谱法对所得的大豆磷脂酰胆碱进行含量测定。结果表明,乙醇提取法以及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析法相结合的纯化过程对大豆磷脂酰胆碱分离纯化效果良好,此外该方法收率高,能够得到纯度为90.12%的大豆磷脂酰胆碱。     

大豆磷脂中卵磷脂检测方法的研究

采用高效液相色谱法对大豆磷脂中的磷脂酰胆碱进行检测,详细介绍了样品的预处理、检测设备和检测条件。试验确定了最佳检测条件:流动相为正己烷-异丙醇-醋酸(1%,V/V)(8∶8∶1,V/V/V);色谱柱Lichroisorb Si-60(4.6mm×250mm×5μm);检测波长203nm;流速1mL/min;柱温30℃。     

高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇

目的建立高效液相色谱检测法测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine, PE)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)含量的方法。方法大豆磷脂类保健食品试样经正己烷:异丙醇(1:1, V:V)提取,经氨基柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,以流动相为无水乙醇-乙腈-水(50:40:10, V:V:V)为流动相等度洗脱,流速为0.4 mL/min,检测波长为205 nm,外标法定量。结果磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999;检出限分别为1.3、5.0、1.0 mg/g,加标回收率分别为95.5%、99.5%、94.9%,精密度均为0.3%。结论本方法准确度高、重复性好,适用于保健食品中磷酯类物质含量的测定。     

大豆磷脂酰胆碱分离、纯化和检测方法

综述大豆磷脂酰胆碱分离提纯,包括低级醇萃取,柱层析分离和超临界流体萃取等方法。同时也介绍磷脂酰胆碱检测方法,主要是准确度高的高效液相色谱法和新兴的核磁共振法。     

高纯度磷脂酰胆碱的制备及其脂肪酸分析

利用不同溶剂对大豆浓缩磷脂中各成分溶解性的差异,建立一种溶剂法制备高纯度大豆磷脂酰胆碱的新工艺。大豆浓缩磷脂通过丙酮脱油、乙醇提取、活性炭脱色、乙腈萃取,可制备纯度高达95% 以上的大豆磷脂酰胆碱。大豆磷脂酰胆碱的脂肪酸主要为多不饱和脂肪酸,其中亚油酸占总脂肪酸的70.71%、亚麻酸11.04%。     

大豆磷脂中PC、PE、PI测定方法的研究

为准确快速地对大豆磷脂中的主要成分磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰肌醇（PI）进行定量分析,对分析柱、流动相、检测波长进行了选择与优化,最终建立了以Lichrosorb Si-60为分析柱,205nm波长下,以V（正己烷）：V（异丙醇）：V（1％乙酸）=8：8：1为流动相的高效液相色谱测定法。     

大豆磷脂酰胆碱分子类型的研究

研究了HPLC-TLC/HPLC-MS对大豆磷脂酰胆碱中磷脂酰胆碱分子种类的分离鉴定方法，结果表明此法能很好的分离大豆磷脂酰胆碱的分子种类，并通过MS能对磷脂酰胆碱的分子种类加以鉴定。在用HPLC对不同磷脂酰胆碱分子种类分离后，可以进一步对不同分子种类的磷脂酰胆碱含量进行测定。该方法用于PC-90的分子类型研究，得到在PC-90中至少含有18：2／18：2-PC，18：3／18：3-PC，16：0／18：2-PC，16：0／18：3-PC和16：0／18：1-PC等5种分子类型，并在205nm归一化法测得18：2／18：2-PC含量为64％。     

大豆磷脂中灰分测定的条件的优化

目的 优化测定大豆磷脂中灰分的实验条件。方法 根据 GB 5009.4-2016《食品中灰分的测定》中大豆磷脂的灰分检测方法, 通过正交试验对大豆磷脂灰分检测的称样量、静置时间和水浴蒸干条件进行优化。结果 最优检测条件为: 样品称样量2 g, 不静置, 不水浴蒸干, 直接小火炭化至无烟, 在马弗炉灼烧至恒重状态。采用本方法测定的6个大豆磷脂样品的灰分含量接近, 均值为4.73%, 相对标准偏差为1.62%, 符合GB/T 27404-2008 《实验室质量控制规范》的要求。结论 该方法实验过程简便, 数据稳定, 且重现性良好, 为相关实验室批量检测大豆磷脂中的灰分提供参考。     

柱层析法制备高纯磷脂酰胆碱

对三氧化二铝柱层析法富集大豆磷脂酰胆碱(PC)过程中产生的溶血磷脂的分离及分析进行了探讨,用高效液相色谱法对PC进行了定性和定量分析。食品级大豆浓缩磷脂经丙酮脱油、乙醇萃取后,进行三氧化二铝柱层析,经95%乙醇洗脱,制备高纯磷脂酰胆碱,同时实现了柱洗脱中间产物溶血磷脂与PC的分离,所得产品中PC纯度接近100%。     

Development of a method to quantify sucrose in soybean grains

The sucrose content of soybean seeds affects the final flavor of soy-derived products. The aim of this work was to develop a simple, low-cost, spectrophotometric method for sucrose quantification in soybean seeds. To achieve this goal, we combined the action of invertase, an enzyme that hydrolyses sucrose into fructose and glucose, with glucose oxidase, an enzyme widely used for glucose quantification. This system was adapted to ELISA plates, making large-scale analyses possible at low cost, with potential application in routine analyses. To validate this method, sucrose content was determined in seeds of 14 soybean cultivars by this new method, as well as by HPLC and the enzymatic method of Stitt. The correlation coefficients were high and significant between the results obtained with the new method and the HPLC method (r = 0.9766) and the Stiff method (0.9461).     

大豆异黄酮作为大豆溯源特征指标的筛选北大核心CSCD

采用高效液相色谱法对黑龙江省不同产地、不同品种大豆中大豆异黄酮含量进行测定,利用不同品种和产地大豆中大豆异黄酮单体含量的不同对大豆异黄酮溯源特征指标进行筛选。结果表明:同一产地不同品种之间大豆异黄酮单体含量总体差异显著(p<0.05),不同产地不同品种之间大豆异黄酮单体含量总体没有显著差异(p>0.05)。因此,可以利用不同品种大豆中大豆异黄酮单体含量作为对大豆异黄酮溯源特征指标实现品种溯源。     

酶法制备豆粕抗氧化蛋白肽的研究

研究复合酶制备豆粕抗氧化蛋白肽的条件,采用响应曲面实验设计,优化酶解工艺,并采用高效液相色谱法对多肽酶解液进行分离纯化及抗氧化性能的测定。结果表明:胰蛋白酶与碱性蛋白酶的比例为2∶1,制备豆粕抗氧化蛋白肽的最佳酶解条件为:温度60℃,时间1.5h,底物浓度8%,酶用量0.4AU/g,得到蛋白肽含量14.08mg/g。高效液相色谱法分离出3个组分,且组分1的抗氧化效果好于其他组分。     

大豆磷脂对牛乳蛋白乳状液热稳定性的影响

研究了大豆磷脂对牛乳蛋白乳状液热稳定性的影响,并对相关作用机理进行了探讨.测定了添加磷脂前后牛乳蛋白乳状液的热凝固时间(HCT)、粒径分布、表面疏水性、Zeta位和游离巯基含量的变化.结果表明:添加大豆磷脂能够提高牛乳蛋白乳状液的热稳定性.其中添加量为2.5 g/L时热稳定性最高,最大HCT为23.49 min.大豆磷脂可能通过与乳蛋白发生疏水相互作用改变蛋白的构象、增加乳状液的负Zeta电位、抑制巯基氧化或降低游离豌基之间的反应几率来提高乳状液的热稳定性.     

Formaldehyde content of milk in goats fed formaldehyde-treated soybean oil-meal

Formaldehyde is used in ruminant feeding for different purposes including the protection of dietary proteins from ruminal degradation. The formaldehyde content of milk of goats fed various levels of formaldehyde-treated soybean oil-meal has been determined by using a sensitive HPLC method. Results showed a significant linear correlation between ingested formaldehyde and formaldehyde concentration in milk. About 0.02% of ingested formaldehyde was excreted in milk, as free formaldehyde.     

大豆油酶法脱胶和硅胶吸附脱皂效果研究

利用PLA1脱除大豆毛油中的磷脂,再用硅胶吸附脱除大豆油中的残磷和残皂。以酶法脱胶后含磷量、硅胶吸附脱皂后的含磷量和含皂量为评价指标,研究酶法脱胶及硅胶吸附脱皂对大豆油脱胶脱皂效果的影响。结果表明：在大豆油pH 5.5～6、去离子水添加量3%、反应时间6～8 h的脱胶条件下,酶法脱胶效果随PLA1添加量的增加而提高,PLA1添加量分别为50、75、100 mg/kg时,脱胶大豆油中含磷量分别从566.36、538.02、562.76 mg/kg降至44.67、18.99、17.01 mg/kg,再添加油质量0.1%的SORBSIL R92硅胶,大豆油含磷量分别降至41.21、16.35、15.42 mg/kg,含皂量分别从37、23、14 mg/kg降至14、8、5 mg/kg。酶法脱胶后大豆油酸值和过氧化值有所升高,3个油样的酸值（KOH）平均升高0.63 mg/g,过氧化值平均升高0.007 g/100 g。硅胶吸附脱皂也造成大豆油酸值和过氧化值有所升高。     

高压液相色谱法测定大豆异黄酮含量

大豆试样在酸性条件下水解后,采用岛津LC-10AtvpHPLC仪,紫外检测器(SPD-10Avvp),波长 254 nm,色谱柱:Inertsil ODS-3柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相:甲醇:5％ 醋酸溶液30％～70％梯度洗脱,流速:1.0 ml/min,柱温:50℃条件下,测定水解提取物中大豆异黄酮含量。测定结果表明:不同品种、产地的大豆中异黄酮含量为 1.40 mg～3.30 mg/g,大豆胚芽中异黄酮含量最高,为13.18mg/g;其它豆类,如红豆、绿豆、青豆、豌豆等异黄酮含量为0.37mg～1.2mg/g,此测定法能为大豆的选育种、栽培及大豆异黄酮含量评价提供依据。