纤维素酶的CMC酶活测定条件的研究

研究和分析了羧甲基纤维素酶(CMC酶)活性测定法的实验条件.通过单因素实验对酶促反应时间、酶促反应温度、pH、测定波长、底物浓度、粗酶液和底物添加量六个影响因素进行了研究.最后结合正交实验、方差分析和多重比较.确定了纤维素酶活力测定的最佳条件组合.结果表明,在pH6.2、粗酶液和底物添加量各为2mL的情况下,影响纤维素酶活力测定的主次因素依次为酶促反应时间、酶促反应温度、测定波长和底物浓度.纤维素酶活力测定的最佳条件为:在酶促反应温度为40℃,pH6.2,底物浓度为10g/L,粗酶液和底物添加量各为2mL,酶促反应时间30min,测定波长为520nm.     

马蹄风味果酒的酿造工艺研究

以新鲜马蹄全果为原料,研究马蹄果酒酿造过程中的酶解和发酵工艺。探究淀粉酶添加量、纤维素酶添加量、温度、pH值、时间和料液比对酶解液透光度、总糖含量的影响;探究酒曲的添加量、温度、初始糖度和pH值对酒精发酵品质的影响。正交试验结果表明,马蹄浆酶解最优条件为:淀粉酶添加量0.4%,纤维素酶0.015%,酶解温度60℃,酶解时间30 min;发酵最佳工艺条件为:果酒酒曲添加量0.5%,温度30℃,初始糖度24%,pH 6.0。     

纤维素酶活测定影响因素的研究

研究和分析了3,5-二硝基水杨酸法测定羧甲基纤维素酶糖化力的实验条件,尤其是对测定波长的选择、底物和酶液加量、空白样的选择、酶液稀释倍数对酶活的影响等方面进行了创新性的探究;另外对常规性的影响因素:酶促反应时间、反应pH、底物的浓度等传统因素做了研究。实验表明:在40℃,pH4.6,底物浓度为10g/L,底物和酶液加量各2mL,酶促反应时间5min,空白样选择终止空白,测定波长480nm处测定OD值比较适宜。     

生物酶法提取紫甘薯花色苷的研究

本论文采用纤维素酶提取紫甘薯花色苷,研究pH值、酶用量、酶解温度、酶解时间和底物浓度对花色苷提取效果的影响,结果表明最佳提取条件为：pH值4.5,酶解温度35℃,加酶量1.5%,底物浓度1∶5,酶解时间30min。     

豆粕多糖的酶法提取工艺研究

试验利用纤维素酶提取豆粕多糖,并利用苯酚-硫酸法测定样品中多糖的含量,选取料液比、酶解温度、酶解时间、pH值、纤维素酶添加量为试验条件,通过试验确定单因素的最佳试验条件,同时在单因素试验的基础上进行正交试验,确定最佳试验组合。两次试验结果显示:酶法提取豆粕多糖的最适试验条件为酶解时间90min,酶解温度60℃,pH 5.0,纤维素酶添加量1.0%,料液比1∶20,多糖得率达到14.92%。     

超声波辅助复合酶法提取Iota卡拉胶工艺优化

目的：优化Iota卡拉胶提取工艺，以期提高Iota卡拉胶产率。方法：采用超声波辅助复合酶技术从刺麒麟菜中提取Iota卡拉胶。通过单因素和正交试验，确定最佳复合酶（纤维素酶、半纤维素酶、木瓜蛋白酶）配比和复合酶酶解条件，并优化超声处理条件和煮胶工艺条件。结果：最佳复合酶配比为纤维素酶0.50%、半纤维素酶1.25%、木瓜蛋白酶0.20%；最佳酶解条件为酶解温度60 ℃，酶解pH 5.5、酶解时间2.5 h、酶解料液比1∶30 （g/mL）；最佳超声处理工艺为超声功率350 W、超声时间25 min、超声温度40 ℃；最佳煮胶工艺为煮胶温度90 ℃、六偏磷酸钠（SHMP）添加量0.04%、煮胶时间3 h。结论：在最优工艺条件下，提取的Iota卡拉胶产率高，可达到47.17%。     

酶解法提取紫薯原花青素工艺优化

为优化酶解法提取紫薯原花青素的最佳工艺条件,以紫薯为原料,通过单因素试验考察酶种类及浓度、酶解时间、酶解温度、pH和料液比5个因素对紫薯原花青素提取率的影响,再以响应面法进行优化。结果表明:纤维素酶添加量为150μg/mL,酶解温度为43℃,pH为6.2,酶解时间为65min,料液比为1∶30(g/mL),该条件下测得提取率为5.039%,与预测提取率接近。     

德氏乳杆菌亚油酸异构酶提取条件的研究

对德氏乳杆菌中亚油酸异构酶的提取条件进行了研究,并对其粗酶液的性质进行了检测,为下一步的分离纯化工作提供依据。通过实验,确定了超声波破碎产亚油酸异构酶菌体的条件:间歇破碎,每次破碎时间20s,间歇5s,破碎20次。当缓冲液pH值为6.0,菌体质量浓度为0.50g/mL时,以粗酶液的酶活力为指标,确定反应的最佳条件:反应温度为40℃;反应时间为150min;粗酶液与底物比例为1:2。     

纤维素酶法提取葡萄皮花色苷工艺研究

探索纤维素酶法提取葡萄皮中花色苷的提取工艺。采用单因素试验和正交试验相结合的方法研究不同因素对葡萄皮花色苷提取的影响。最佳提取条件为pH 3、酶解温度45℃、酶添加量1.2%、料液比1∶15(g/mL)、酶解时间30 min。以期为葡萄皮花色苷的提取技术提供参考依据。     

牡丹叶黄酮的酶法提取条件优化及其对亚硝酸盐的清除作用

以牡丹叶为原料,采用酶法提取牡丹叶黄酮,以纤维素酶用量、pH值、酶解温度、酶解时间为单因素,以牡丹叶黄酮提取率为考察指标,通过正交试验确定酶法提取牡丹叶黄酮的最佳工艺参数为：纤维素酶用量12.5 U/mL、pH 4.5、酶解温度45 ℃、酶解时间4 h。在此条件下牡丹叶黄酮提取率为2.43%。提取得到的牡丹叶黄酮浸提液可用于亚硝酸盐清除,通过正交试验优化得到牡丹叶黄酮清除亚硝酸盐的最佳反应条件为：反应温度70 ℃、pH 4.0、牡丹叶黄酮提取液添加量25 mL（10 μg亚硝酸钠）、反应时间20 min。在此条件下牡丹叶黄酮对亚硝酸盐清除率可达62.15%。     

豆粕中多糖提取工艺的研究

实验采用纤维素酶法提取豆粕中的多糖,并且利用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,通过控制单因素,如料液比、酶解时间、酶解温度、pH值、纤维素酶添加量等因素,挑选出最适的实验条件,在单因素实验的基础上,通过正交实验选出优化的组合因素。实验结果表明,利用纤维素酶解法提取豆粕中多糖的最适条件为酶解温度60℃,酶解时间60min,pH 5.5,纤维素酶添加量0.8%,料液比1∶15。     

山银花多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

目的:研究纤维素酶提取山银花多糖的最佳工艺条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以山银花多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解时间、液料比、酶解p H、酶添加量为试验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件。山银花多糖抗氧化活性检测使用DPPH、·OH和O_2~-·自由基清除能力体系。结果:纤维素酶酶解提取山银花多糖最佳条件为:酶解时间80 min,液料比14.6 mL/g,酶解pH 5.2,酶添加量8.0 mg/mL,酶解温度50℃,在此条件下山银花多糖实际得率为15.76%,与理论预测值16.05%相对误差小于5%。液料比对多糖得率影响最显著,酶添加量、酶解pH次之,酶解时间影响最小。山银花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH、·OH和O_2~-·自由基清除的半数抑制浓度IC_(50)分别为0.941、1.238、1.786 mg/mL。结论:获得山银花多糖纤维素酶酶法提取的最佳条件,该工艺条件方便可行,获得的多糖具有较强的自由基体外清除能力。     

芒果果皮多糖酶法提取及其体外抗氧化活性

研究纤维素酶提取芒果果皮有效成分多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。以芒果果皮多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、酶添加量、液料比为试验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件;芒果果皮多糖体外抗氧化活性检测使用DPPH·和·OH清除能力体系。纤维素酶酶解提取芒果果皮多糖最佳条件为:酶解pH值5.0,酶解时间100.0 min,酶添加量10.5 mg/mL,液料比7.6∶1(mL/g)、酶解温度45℃,在此条件下芒果果皮多糖得率为5.17%,与理论值5.28%相对误差小于5%。酶解时间对多糖得率影响最显著,液料比、酶添加量次之,酶解pH值影响最小。芒果果皮多糖具有较强的体外抗氧活性,对DPPH·和·OH清除的半数抑制浓度IC50分别为1.385、3.612 mg/mL,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。     

酶解法提取山楂黄酮的工艺

重点研究以纤维素酶酶解提取山楂果黄酮的工艺.考察纤维素酶的浓度、pH值、温度、时间、料液比5个单因素.结果表明其最佳条件为:酶质量浓度为0.15mg/mL,酶解pH值为5.0,酶解温度为55℃,酶解时间为90min,料液比为1:12(g:g).而在这个最佳条件下,黄酮的提取率可达到90%,且黄酮类化合物的活性依然存在.     

酶法提取枸杞多糖的研究

研究了纤维素酶提取枸杞多糖的最佳工艺条件。以提取率为指标,分别考虑了加水量、酶解pH、酶解温度、酶解时间、加酶量对纤维素酶酶解反应的影响。试验确定了纤维素酶酶解工艺的最佳条件为加水量50mL、pH5.0、酶解温度50℃、酶解时间60min、加酶量0.5%。在这种条件下,枸杞多糖的得率为11.2%。     

不同提取方法对苹果渣中可溶性膳食纤维的影响

以苹果渣为原料,分别采用微波和纤维素酶作用提取可溶性膳食纤维,通过正交试验确定微波的适宜提取条件,结果表明:在料液比1:20,时间1.5min,微波火力为中火(功率450W),pH6的条件下,水溶性膳食纤维得率13.6%,持水力754.40%,溶胀性13mL/g。通过响应面优化试验确定纤维素酶适宜的提取条件是:纤维素酶用量0.67%,缓冲液pH5.55,酶解时间1.90h,酶解温度45℃。此时,水溶性膳食纤维提取率17.50%,持水力851.25%,溶胀性15mL/g。     

辣木叶酶法水解提取蛋白质工艺优化

为了优化纤维素酶与果胶酶水解提取辣木叶中蛋白质的提取工艺,以提取率为考察指标,运用单因素与正交试验研究了酶解温度、加酶量、pH、底物质量浓度与酶解时间5个因素对辣木叶蛋白质提取率的影响。结果表明:纤维素酶各因素对辣木叶蛋白质提取率影响的主次顺序为:酶解温度 > 底物质量浓度 > pH > 酶解时间 > 加酶量,最佳工艺条件为:酶解温度40℃、加酶量800 U/L、酶解pH5.0、底物质量浓度7.0 g/L、酶解时间70 min,在此条件下的提取率达到了43.85%。果胶酶各因素对辣木叶蛋白质提取率影响的主次顺序为:加酶量 > 底物质量浓度 > 酶解时间 > 酶解温度 > pH,最佳工艺条件为:酶解温度50℃、加酶量1400 U/L、pH4.0、底物质量浓度9.0 g/L、酶解时间50 min,提取率达到了32.26%。纤维素酶与果胶酶各因素对辣木叶蛋白质提取率的影响均达到了极显著水平（P<0.01）。在最佳工艺条件下,纤维素酶水解辣木叶提取蛋白质的效果优于果胶酶。     

超声波复合酶法提取双孢菇多糖的研究

采用超声波辅助复合酶提法提取双孢菇粗多糖。实验中利用单因素实验探索并确定了超声波的最佳提取时间和料液比分别为30min,1:20。对于复合酶的反应条件,采取L9(34)正交试验确定纤维素酶和中性蛋白酶的最佳工艺条件分别为:纤维素酶加酶量480u/g,pH4.0,酶解温度50℃,酶解时间100min;中性蛋白酶的加酶量100u/g,pH7.5,酶解温度45℃,酶解时间100min。实验中采用超声波辅助破壁方法,提高了纤维素酶的破壁效率,提高了双孢菇多糖的提取率。     

橄榄油乳化法测定脂肪酶活性的优化研究

以猪胰脂肪酶为例,针对传统橄榄油乳化法存在准确度较低、重现性不佳等问题,对底物浓度及用量、均质时间、缓冲液添加量、反应体系温度、反应环境等反应条件进行了优化研究:以20%橄榄油乳化液5mL代替25%橄榄油乳化液4mL,以3mL磷酸盐缓冲液代替5mL磷酸盐缓冲液,将均质处理的速度与时间由高速(>10000r/min)、6min降低为5000r/min、2min,将反应体系温度由40℃降低为35℃,改变静止的反应环境为在100r/min下振荡反应,选择在空白组反应体系中加入1mL0.025mol/LpH7.5磷酸缓冲液代替1mL酶液。优化后的条件下测得的脂肪酶活力较优化前提高了35%以上,平行测定的RSD值为5.5%,方法的精密度较高。     

双酶提取蒲公英根多糖工艺优化及其抗氧化性研究

以蒲公英根烘焙粉为原材料,研究了酶添加量、酶解温度和酶解时间在单酶和双酶协同酶解条件下对多糖得率和DPPH自由基清除率的影响,并采用响应曲面法优化了酶解工艺参数。结果表明,单酶法提取1 g蒲公英根多糖的适宜条件为:料水比(g∶mL)1∶30,纤维素酶酶解温度50℃,酶添加量1.0 mL;木瓜蛋白酶酶解温度60℃、酶添加量2.0 mL。双酶法多糖提取率高于单酶法,影响多糖得率的工艺因素主次顺序为酶解时间、酶解温度、酶添加量。适宜的多糖提取条件为:料水比(g∶mL)1∶30,木瓜蛋白酶悬液(200 U/mL)添加量1.98 mL,纤维素酶悬液(200 U/mL)添加量0.99 mL,55℃提取1.9 h,此时多糖得率为32.97%±0.13%,DPPH自由基清除率为92.31%±0.25%。烘焙和酶解工艺可提高蒲公英根多糖得率和DPPH自由基清除率。