四倍体鱼的种质改良研究

β－ａｃｔｉｎ基因启动子驱动的草鱼生长激素基因ｃＤＮＡ－“全鱼”基因ｐＣＡｇｃＧＨｃ用显微注射方法导入四倍体鱼卵,获得了生长快,个体硕壮的转基因四倍体鱼。２４０日龄时,转基因鱼平均体重为３０２．７ｇ,是对照鱼的３．１倍,平均体长是对照的１．３４倍,燕可从部分转基因雄鱼挤出精液,而对照鱼尚无此现象。对１９尾转基因四倍体雄鱼的精液和尾鳍ＤＮＡ做ＰＣＲ检测,外源基因和的阳性率分别为９４．７％和５２．６％     

摄食转"全鱼"基因黄河鲤小鼠的生理和病理分析

为了消除公众对转基因生物安全性的疑虑,加速转 “全鱼”基因黄河的产生化进程 ,本实验按类似国家卫生部瘭药毒理实实验规范进行了昆明种小鼠摄食转“全鱼”基因黄河鲤后生理和病理研究。与对照组小鼠比较,两者在生长、等方面,没有显著性差异,摄食转基因鱼对小鼠的生殖机能及对子一代幼仔的生长和发育也无影响。实验结果,转“全鱼”基因黄河鲤鱼与普通黄河鲤鱼在食品安全方面具有实质等同性。     

转生长激素基因鲤鱼几项血液指标的检测

以F2代转“全鱼”生长激素基因鲤鱼为材料,对其体重、体长和几项血液指标进行了检测。实验显示:转基因鱼体重和体长均极显著地高于对照鱼(P<0.01);转基因鱼每毫升血液中淋巴细胞总数为(25.2±6.7)×106个,对照鱼为(18.2±6.6)×106个,两者差异显著(P=0·015);转基因鱼红细胞压积值和白细胞吞噬百分率都高于对照鱼(P<0·05),但是吞噬指数没有统计学差异;转基因鱼的皮质醇水平为(63·8±16·8)ng/ml,对照鱼为(33·2±9·6)ng/ml,前者明显高于后者(P<0·01)。以上结果表明,转生长激素基因不但加速了鲤鱼的生长,还促进了其血液细胞的增殖和吞噬功能,并直接或间接地引起了血清皮质醇水平的升高。     

转"全鱼"GH基因鲤鱼胸腺发育差异表达基因的筛选与鉴定

采用显微注射方法,获得了转"全鱼"生长激素(GH)基因鲤鱼(转基因鱼),应用抑制性差减杂交(SSH)技术,构建了4月龄F3转基因鱼胸腺发育差减cDNA文库,筛选并鉴定了与胸腺发育相关的81个与已知基因同源的表达序列标签(EST).这些EST至少代表69个基因.根据基因的作用将其分为5类:18个与免疫和细胞防御有关;23个参与细胞生长、发育和分化等代谢过程;3个参与细胞信号传导和周期调控;8个在转录和表达调节中发挥作用;17个为核糖体蛋白基因,表明转基因鱼胸腺细胞处于活跃的蛋白合成状态.应用RT-PCR和虚拟Northern杂交技术进一步证实其中的若干基因在转基因鱼胸腺组织中的表达量增加.实验结果为阐明转植GH基因促进鲤鱼胸腺发育的相关分子机制提供了依据.     

转基因鲤鱼作为食物的研究

报道了以转生长激素基因鲤鱼作为食物，用猫做实验动物的实验结果。两次重复实验，每次实验时间为三个月，实验结束后，对实验猫和对照猫进行解剖学比较、血液生理学的指标的测定和细胞化学检测分析等。实验表明，用转生长激素鲤鱼作为食物。食用它的动物的生理学和血液学指标与对照组动物没有显著差别。     

人骨形态发生蛋白－1（hBMP－1）成熟肽的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

采用ＰＣＲ方法从ＢＭＰ－１的ｃＤＮＡ中克隆了ＢＭＰ－１成熟肽的编码基因，删除了ＢＭＰ－１前体分子Ｎ端的信号肽序列和Ｃ端的其他序列。用ＨｉｎｄⅢ消化１．３Ｋｂ的ＰＣＲ产物，将０．８４和０．４６Ｋｂ两片段分别克隆到ｐＵＣ载体中进ＤＮＡ序列分析。分别酶切回收ＥｃｏＲ－ＨｉｎｄⅢ和ＨｉｎｄⅢ－ＢａｍＨⅠ两目的基因片段，与大肠杆菌表达载体ｐＢＶ－２２０进行退火连接，使插入基因受控于Ｐ＿ＲＰ＿Ｌ启动子。将含有ＢＭＰ－１成熟肽编码基因重组表达质粒ｐＢＶＢＭＰ－１转化大肠杆菌宿主细胞进行温度诱导表达。结果表明，经４２℃热诱导后，大肠杆菌能以包涵体形式表达ＢＭＰ－１成熟肽，其分子量约为５２ｋＤａ。     

应用农杆菌转化水稻的研究

利用农杆菌ＬＢＡ４４０４（ＰＴＯＫ２３３）转化水稻成熟胚愈伤组织，通过筛选获得抗性伤组织并再生出转化植株，转化频率为８．９％，转基因分子生物学鉴定的阳性，外源基因ｇｕｓ在转化植株表达亦提供了转化成功的证据。转基因植株的当代及Ｔ１代植株获得了种子。摸索了应用农杆菌转化水稻的方法，条件。利用干燥处理法抑菌并提高转化植株再生频率。     

人骨形态发生蛋白—1（hBMP—1）成熟肽的基因克隆及其在大肠杆菌中有表达

采用ＰＣＲ方法从ＢＭＰ－１的ｃＤＮＡ中克隆了ＢＭＰ－１成熟肽的编码基因，删除了ＢＭＰ－１前体分子Ｎ端的信号肽序列和Ｃ端的其他序列。用ＨｉｎｄⅢ消化１．３Ｋｂ的ＰＣＲ产物，将０．８４和０．４６Ｋｂ两片段分别克隆到ＰＵＣ载体中进ＤＮＡ序列分析。分别酶切回收ＥｃｏＲ－ＨｉｎｄⅢ－ＢａｍＨⅠ两目的基因片段，与大肠杆菌表达载体ＰＢＶ－２２０进行退火连接，使插入基因受控于ＰＲＰＬ启动子。将含有ＢＭＰ－１成熟肽     

兰花圆球茎基因枪转化后的GUS基因表达

利用花榔菜花叶病毒３５Ｓ启动子引导的葡糖醛酸糖苷酸基因检测基因枪法转化兰花圆球茎组织的瞬间表达效率。发现在基因枪轰击时在ＤＮＡ－金粉悬液中加入０．１ｍｏｌ／Ｌ的生长激素ＮＡＡ，轰击前预培养时使用０．１ｍｏｌ／Ｌ甘露醇处理，每个培养皿轰击压力为１１００ｐｓｉ下，ＧＵＳ基因在兰花圆球茎组织中的瞬间表达效率最高。     

转抗菌肽B基因水稻植株的获得与鉴定

构建了一个适合在水稻中表达含有抗菌肽Ｂ基因的转化载体，应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚，获得了一些转基因水稻植株。根据对选择标记基因和目的基因的分子检测和抗病性测定，证明抗菌肽Ｂ基因已整合入转化水稻基因组并在转基因水稻中表达了抗病性。     

“中意生物安全国际研讨会”在京召开

20 0 1年 9月 9日 - 1 3日 ,由中国科技部生物工程开发中心、意大利国际农业研究所联合举办的“中意生物安全国际研讨会”在北京饭店举行。应大会的邀请 ,由中国、意大利、瑞士、法国的著名专家作了专题报告 ,大会首先全面回顾了近几年来我国生物技术的发展情况 ,充分认识到生物技术在我国已有了迅速发展 ,如转Ｂｔ基因抗虫棉、延缓成熟的转基因番茄、抗虫转ＣｐｔⅠ基因水稻、转Ｂｔ基因抗虫杨树等相继问世 ,目前已有 75项转基因植物经批准进入中间试验。但由于受国际上转基因生物安全性争论的影响 ,除了抗虫棉外 ,目前还没有其它转基因植…     

油菜叶绿体定点转化载体的构建及其杀虫性

首先从油菜叶绿体基因组克隆得到包含ｒｐｓ７基因在内的１．０ｋｂＤＮＡ片 包含ｎｄｈＢ基因在内的２．４ｋｂＤＮＡ片段,同时从苏云芽孢杆菌质粒上克隆得到一个全长３．５ｋｂ的ＢＴ杀虫蛋白基因ｃｒｙ１Ａａ。然后以ｒｐｓ７和ｎｄｈＢ基因作为同源重组片段,成功构建了包含Ｂｔ杀虫蛋白和ａａｄＡ抗壮观霉素基因的油菜叶绿体定点转化载体,并对克隆菌体总蛋白进行了生物杀虫试验。结果表明,Ｂｔ杀虫蛋白基因能够得到表达,并     

宽带低压15GHz铌酸锂电光调制器

报导了国内首例宽带，低压铌酸锂电光调制器的研究结果。用傅利叶级数方法设计了长电极，厚金电极和厚ＳｉＯ２缓冲层的Ｍ－Ｚ光波导强度调制器，制成的调制器为实用化带尾光纤包装式器件，在１．５５μｍ工作波光下，其性能指标为３ｄＢ光调制带宽１５ＧＨｚ，半波电压５．６Ｖ，消光比２１ｄＢ。     

牙鲆GH基因外显子多态性与生长性状关系的初步研究

以一个牙鲆养殖群体中的100个个体为实验材料,根据其生长激素(GH)基因的五个外显子序列设计引物,进行PCR扩增,通过SSCP分析技术对其进行检测,结果表明该群体生长激素基因的第四个外显子存在多态性.共检测到两种基因型,其中AA型个体占88%,AB型个体占12%;DNA测序结果表明,AB型在第1763位发生碱基突变,c→t,与AA型同源性达到99%,同时发现不同基因型的个体在体重和头长上表现出显著的差异(P＜0.05).上述结果表明利用PCR-SSCP技术可以检测到牙鲆生长激素基因外显子部分存在序列遗传多态性,且该多态性与其生长的某些性状具有一定的连锁关系,为将来进行标记辅助选育奠定了基础.     

全状态上临界Athreya－Karlin B．P．R．E．的灭种概率的渐近行为

当随机环境为一有限状态平稳遍历马氏链时，本文证明了总存在常数Ｃ１、Ｃ２、＞０，使得全状态上临界Ａｔｈｒｅｙａ－ＫａｒｌｉｎＢ．Ｐ．Ｒ．Ｅ．当初始个体数ｋ增大趋于无穷时相应的灭种概率ｑｋ的渐近变化总介于和之间，其中０＜β＜１；α１≥α２≥０都是由所给过程完全确定的常数。     

提高猪基因导入效率的研究

采用显微注射的方法，将ＰＯＭＴ／ＰＧＨ，ＰＳＶ４０／ＰＧＨ，ＰＯＭＴ／ＰＧＨ－Ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ－ＤＮＡ和ＰＭＨＲ等四种外源基因导和２５９２枚湖北白猪的受精卵，均获得了相应的转基因猪，基因导入的总效率为２．１％，对影响导入效率的几个因素进行了系统的实验，通过超数排卵，可以使供体母猪的获卵数提高１．１倍，在异体移植的情况下，每头受体以移入２０～２９枚注射基因的胚胎为宜；采用自体移植，在移入     

乙肝病毒融合表面抗原SA—28基因在酵母中的表达

利用基因工程技术，先将乙肝病毒表面抗原Ｓ－ｐｒｅＳ１融合基因ＳＡ－２８置于酵母杂合启动子ＡＤＨ２－ＳＵＣ２的控制下，然后将ＳＡ－２８基因的表达单元插入高稳定质粒ｐＨＣｌ１的ＢａｍＨＩ位点，构建成表达质粒ＹＦＤ１５０和ＹＦＤ１５０－ｏ并将其转化酿酒酵母Ｙ１９。对转化子表达ＳＡ－２８基因的研究表明：表达受葡萄糖浓度调控；表达产物具有Ｓ和ｐｒｅＳ１双重抗原性，并形成密度为１．２０－１．２２ｇ／ｍｌ的颗粒     

M－矩阵的行列式不等式

我们首先把文献［２］的结果：ｄｅｔＡｄｅｔＢ≤ｄｅｔｍ（Ａ＊Ｂ）改进为（ｂ１１…ｂｎｎ）ｄｅｔＡ＋（ａ１１…ａｎｎ）ｄｅｔＢ－（ｄｅｔＡ）（ｄｅｔＢ）≤ｄｅｔｍ（Ａ＊Ｂ），其中Ａ，Ｂ为ｎ阶Ｍ－矩阵，“＊”记Ｈａｄａｍａｒｄ积，“ｍ”记比较矩阵。其次，把关于Ｍ－矩阵的Ｈａｄａｍａｒｄ不等式改进为ｄｅｔＡ≤ａ１１…ａｎｎ－｜ａ１σ（１）…ａｎσ（ｎ）｜，其中σ是１，２…ｎ的任一个置换，当ｎ为奇数时，它为偶置换，否则为奇置换。最后，对Ｂ为非奇异的情形给出下列估计式：ｄｅｔＡ≤ｄｅｔ（Ａ＊Ｂ－１）／（β１１…βｎｎ）≤ａ１１…ａｎｎ，和ｄｅｔＡ／ｄｅｔＢ≤ｄｅｔ（Ａ＊Ｂ－１），其中，βｉｉ为Ｂ－１的主对角元     

欧盟转基因生物法规问与答

本问答资料分为两部分 :部分A包括现行法规 ;部分B包括即将实行的关于转基因生物追踪和标签的新法规。部分A :现行法规1 什么是转基因生物和转基因微生物 ?转基因生物 (GMOs)和转基因微生物 (GMMs)可以定义为 ,基因物质 (DNA)被非自然交配或非自然重组方式所改变的生物 (及微生物 )。这种技术通常被称为“现代生物技术”或“基因技术”,有时亦称为“DNA重组技术”或“基因工程”。它允许经选定的个别基因片断自一个生物体转移至另一个生物体 ,甚至在无关系的不同物种间转移。2 欧盟关于GMOs的现行法规是什么 ?欧共体关于转基因生物…     

高效整合转基因兔研究

用含有核基质附着区的鸡珠蛋白基因与含有鼠金属硫蛋白基因启动子的人－类胰岛素促生长因子基因构建表达了载体。研究了ＭＡＲ对转基因兔整率的影响。结果表明，带有ＭＡＲ的表达载体转基因兔整合率达到２６．３％，为一般不含ＭＡＲ构件转基因兔整合率的两倍，对提高转基因动物生产效率，将起到重要作用。