栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒感染的ELISA检测

应用纯化病毒免疫新西兰兔制备的抗血清，进行ELISA分析，检测栉孔扇贝体内急性病毒性坏死症病毒的感染情况。结果表明：一龄贝在整个养殖期间感染该病毒呈现低一高一低的涨落过程，其中7月下旬到8月中旬检出阳性率为75％～95％，为当年感染的高峰时期。对二龄贝感染该病毒的分析结果显示，二龄贝对病毒的感染可能具有一定的抗性。     

急性病毒性坏死症病毒在栉孔扇贝不同器官的感染状况

应用超薄切片、负染电镜技术以及ELISA对自然发病和人工感染发病的栉孔扇贝之外套膜、鳃、肝胰腺、肾、肠、及闭壳肌等主要器官急性病毒性坏死症(Acute Virus Necrobiotic Disease，AVND)病毒的感染状况进行了研究。三种检测方法均表明，病贝的外套膜及肝胰腺为AVND病毒感染最严重的器官，肾以及肠组织次之，鳃及闭壳肌病毒感染程度最轻。本结果同时表明，AVND病毒在病贝体内广泛分布，侵染的细胞主要为上述器官皮下肌细胞的细胞质内，侵染细胞超微结构表现为生物膜肿胀，并出现“髓袢样”结构等病理变化。     

鲤鱼(Cyprinus Carpio) 促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体获得了两种GtH β亚基的cDNA, 克隆在pMD18-T载体.经测序确证后,将这两个基因克隆到原核表达载体pET -32(a)中,转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达.利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Western-blot及ELISA分析,结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白.该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段,为进一步制备GtH单克隆抗体奠定了基础.     

肽聚糖制剂提高凡纳对虾抗白斑综合征病毒感染力的研究

将肽聚糖制剂添加到普通对虾饲料中 ,制成分别含肽聚糖制剂 1%和 0 .1%的免疫饲料 ,按常规方法投喂凡纳对虾。 4周后测定每个实验组对虾的酚氧化酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性 ,同时进行白斑综合征病毒 (WSSV)的人工投喂感染实验。实验结果显示 ,感染实验前投喂普通饲料组对虾和投喂免疫饲料组对虾的酚氧化酶和酸性磷酸酶活性无显著差别 (p >0 .0 5 ) ,各实验组对虾碱性磷酸酶活性的差异显著 (p <0 .0 5 ) ;感染实验后各实验组存活对虾的各项免疫酶活性无显著差异 (p >0 .0 5 )。凡纳对虾摄食添加了肽聚糖制剂的免疫饲料后 ,明显提高了对虾抵御WSSV感染的能力 ,其中尤其以添加了1%肽聚糖制剂的实验组的抗病毒感染能力最强 ,到实验结束时累计死亡率只有 10 % ,而对照组为 75 % ;1%添加量组与 0 .1%添加量组及对照组之间的累积死亡率差异显著 (p <0 .0 5 )。实验结果提示 :在对虾饲料中添加肽聚糖可提高对虾抗病毒感染能力 ,从而达到防病治病、增加生产收益的目的     

植物抗体基因工程：I．分泌马铃薯Y病毒中和抗体杂交瘤细胞系的筛选

酶联免疫吸附试验证实，Ｄ７３、Ｄ９０和Ａ６９三个杂交瘤细胞系产生的单克隆抗体均能够与马铃薯Ｙ病毒株系ＰＶＹ￣ｏ、ＰＶＹ￣Ｎ和ＰＶＹ￣ｃ发生反应，但以Ｄ７３的亲和性为最强。进而进行的侵染抑制试验也证实经Ｄ７３单克隆抗体处理后的病毒接种物，其在‘Ａ６’（ＳｏｌａｎｕｍｄｅｍｉｓｓｕｍｘＳ．ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）离休叶片引起枯斑的能力显著地受到抑制。因此，选用Ｄ７３杂交瘤细胞系作为分离马铃薯Ｙ病毒中和抗体基因的材料，对其分泌的抗体轻链和重链的亚类进行鉴定，结果发现组成该单克隆抗体分子的轻链和重链分别为Ｋ链（ｋａｐｐａ）和γ＿１链。     

栉孔扇贝和海湾扇贝病原体感染与疾病发生关系探讨

超薄切片和负染色技术检测栉孔扇贝和海湾扇贝病原体感染状况，结果表明：在栉孔扇贝大规模死亡的7、8月份，病毒检出率分别为80％、100％，此时，病毒感染强度也达到最高；而海湾扇贝整个养殖期间病毒感染率和感染强度均维持在较低的水平，未出现明显的涨落。二种扇贝均检测到类立克次氏体（RLO），但类立克次氏体的感染率和感染强度均未出现明显的涨落，似与扇贝死亡的关系不大。综合分析认为，病毒极可能是导致栉孔扇贝大规模死亡的直接病原。     

用含水冷冻电镜技术测定的水稻矮缩病毒的三维结构

用含水冷冻电镜技术和计算机数据处理方法分别测定了水稻矮缩病毒（ＲＤＶ）完整颗粒和只含内壳层的颗粒的三维结构，其分辨率分别为２．６ｎｍ和３．３ｎｍ。从完整颗粒的结构中可以清晰地看到它的外层和内壳层的双层结构及其内部的ＲＮＡ或非结构蛋白质的电子密度。完整颗粒和内壳层的直径分别为６９．８ｎｍ和５４．０ｎｍ，外壳层和内壳层的厚度分别为６．９ｎｍ和２．５ｎｍ。外壳层表面的三角形剖分数Ｔ＝１３。外壳层由２６０     

酶联免疫定量测试盒法测定黄曲霉毒素B_1的方法探讨

本文主要通过pH值、阳离子(如Cu2+、Fe3+等)、溶液呈色(如红曲)三方面来探讨酶联免疫测试盒法测定黄曲霉毒素B1时,用甲醇水溶液提取样品中黄曲霉毒素B1的提取方法易出现假阳性,干扰测定,必须进一步用三氯甲烷来提取黄曲霉毒素B1以消除假阳性、排除干扰,提高测定数据的准确性。     

利用定量PCR方法研究对虾白斑杆状病毒感染与发病的关系

收集了6批共134尾不同感染程度的对虾样品,测定其WSBV含量。检测结果表明,无病症的对虾样品每毫克样品所携带的病毒量低于10^3个病毒粒子,有病灶的对虾样品每毫克组织所携带的病毒量均高于10^3个病毒粒子,根据这一结果,初步确定了疾病爆发的危险临界值为每毫克组织含10^3个病毒粒子。     

聚(天冬氨酸-co-乳酸)的合成及结构与性能

由聚(琥珀酰亚胺-乳酸)的碱溶液水解反应制备了含有亲水性羧基的聚(天冬氨酸-co-乳酸)(PAL)。用IR、NMR、DSC、元素分析等方法表征了PAL的组成和结构。结果表明,PAL中的聚乳酸链段为间同立构或无规立构,由此推断丙交酯在开环聚合反应时发生了酯交换或链转移反应,导致聚乳酸链段产生消旋现象;聚合反应机理是羟基引发的聚合,获得了无定型态聚合物PAL。由于共聚反应中丙交酯熔体的蒸发损耗,合成的PAL中聚天冬氨酸的含量高于理论值。     

中国对虾血细胞单克隆抗体研制及对虾血细胞类型的鉴别

选用聚乙二醇（PEG）作为细胞融合剂,将免疫的Balb/c小鼠的脾细胞与P3－X63－Ag8U1骨髓瘤细胞融合,制备产生抗中国对虾血细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞。运用酶联免疫吸附测定（ELISA）和间接免疫荧光抗体技术（IIFA）进行了杂交酶细胞的筛选,最后建立了分泌抗中国对虾血细胞单抗的23株杂交瘤细胞。其中以3A3、3B3和3B6为代表的三组单抗能够鉴别中国对虾对虾的三类血细胞亚群。这为今后进一步研究中国对虾血细胞不同亚群的免疫特性提供了有利手段。