棉籽蛋白源ACE抑制肽的制备过程中脱盐技术的研究

综合比较了001 ×7、201 ×7离子交换树脂、MWCO100透析袋和DA201-C大孔吸附树脂对棉籽蛋白水解液的脱盐效果,分析了DA201-C树脂脱盐对棉籽蛋白水解液ACE抑制活性和氨基酸组成的影响,并对Sephadex G-25分离纯化获得ACE抑制肽各组分进行活性测定.结果表明:DA201-C大孔吸附树脂的脱盐效果最好,控制流速为3 mL/min时,脱盐率可达到94.78％,氮回收率为86.32％,脱盐后疏水性氨基酸得到了有效富集,ACE抑制率显著提高.分离纯化后的ACE抑制肽各组分中,组分Ⅲ的抑制率最高,分子质量小于1000u.     

乳清蛋白酶解ACE抑制肽分离纯化技术的研究

采用6000 u的超滤膜对乳清蛋白水解物中的ACE抑制肽进行了初步分离,确定了超滤的条件,并测定超滤前后水解物的ACE抑制率,结果表明通过超滤可以富积乳清蛋白水解物中的ACE抑制肽.采用阳离子交换树脂对水解物进行脱盐,通过测定水解物的氮回收率、脱盐率以及ACE抑制率,表明采用阳离子交换树脂脱盐率可以达到80%以上,氮的回收率达到90%以上,而水解物经过阳离子交换树脂基本上对其ACE抑制率没有影响.     

超滤法分离酪蛋白酶解物中的ACE抑制肽

采用不同截留分子质量的超滤膜对酪蛋白酶解物中ACE抑制肽进行初步分离,确定了超滤的条件,并测定超滤前后酶解物的ACE抑制活性。结果表明,截留分子质量为10 ku和3 ku的超滤膜能不同程度地提高酪蛋白酶解物的ACE抑制活性,但3 ku的超滤膜能更有效地提高其ACE抑制活性,并且超滤液半抑制浓度值(IC50)为0.46 mg/mL。证明超滤技术可作为一种分离ACE抑制肽的手段。     

发酵乳中ACE抑制肽的超滤工艺研究

本实验采用超滤法分离发酵乳中的ACE抑制肽,研究了超滤工艺的主要技术参数。结果表明:截留分子量为6000Da的超滤膜,在压力0.10MPa,温度25℃条件下,能得到具有较高ACE抑制活性的超滤液。     

超滤技术分离双低油菜ACE抑制肽及其性能研究

采用超滤技术对双低油菜酶解物中的ACE抑制肽进行了分离提纯研究,考核了分离参数对分离效果的影响,分析了不同分子质量段多肽HPLC肽谱的变化,研究了双低油菜高ACE抑制活性多肽的耐消化性、酸碱稳定性和耐热性。结果表明,超滤分离能明显提高双低油菜ACE抑制肽的活性,截留分子质量为3 ku的超滤膜透过液IC50值下降了15%,活性多肽回收率超过58%,酶解物中有4个高活性的组分峰,小于3 ku分子质量段的ACE抑制肽有良好的耐热性、酸碱稳定性和耐消化性。     

酪蛋白源ACE抑制肽的精制

采用离子交换树脂对酪蛋白源ACE抑制肽进行脱盐处理,结果表明,以10倍柱体积/h流速,经阴阳离子交换树脂后脱盐率达80%左右,氮回收率为83%,脱盐处理前后基本上对其ACE抑制活性和氨基酸含量没有影响。     

酪蛋白源ACE抑制肽的精制

采用离子交换树脂对酪蛋白源ACE抑制肽进行脱盐处理,结果表明,以10倍柱体积/h流速,经阴阳离子交换树脂后脱盐率达80%左右,氮回收率为83%,脱盐处理前后基本上对其ACE抑制活性和氨基酸含量没有影响。      

酶法制备酸枣仁ACE抑制肽理化性质研究

本研究将脱脂后的酸枣仁渣通过碱溶酸沉法提取得到酸枣仁蛋白,并通过中性蛋白酶和碱性蛋白酶复合酶解得到酸枣仁血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽,以其为研究对象,对酸枣仁ACE抑制肽的理化性质进行研究。本文通过分析脱脂酸枣仁的基本营养成分和酶解后酸枣仁ACE抑制肽的氨基酸成分,从氨基酸方面论证酸枣仁ACE抑制肽的功能活性和营养价值。分子量分布、粒度分布、微观结构观察等试验立体论证酸枣仁蛋白的酶解效果。最后针对酸枣仁蛋白酶解前后的溶解度、热稳定性、持水性和持油性、起泡性和起泡稳定性、乳化性和乳化稳定性、感官特性等理化性质进行对比试验及分析研究。结果表明,脱脂酸枣仁蛋白质含量为（73.40±0.23） g/100 g,蛋白质含量较高。酸枣仁ACE抑制肽中必需氨基酸含量为36.48%,疏水性氨基酸含量占51.14%,且谷氨酸含量最高。酸枣仁ACE抑制肽分子量主要集中在1000~3000 Da,占97.50%,且多分散性指数为1.088,分子量分布较窄。粒度分布测定和扫描电镜对比酸枣仁蛋白和酸枣仁ACE抑制肽酶解前后蛋白质结构被打破,酶解充分。理化性质研究表明,酸枣仁ACE抑制肽较酶解前酸枣仁蛋白,热稳定性、溶解度、持水性、持油性、乳化稳定性都有显著提高,起泡性、起泡稳定性、乳化性显著降低。结果表明酸枣仁ACE抑制肽较酶解前理化性质均得到显著改善,相关理化性质的探明为开展后续应用研究奠定研究基础,为酸枣仁ACE抑制肽的生产应用提供理论依据。     

米糠蛋白源ACE抑制肽的酶解制备及活性研究

目的：开发米糠新产品。方法：以ACE抑制率为指标,通过单因素和响应面试验对米糠蛋白进行酶解工艺优化研究,并对最优酶解物活性肽进行超滤分离、活性评价和氨基酸组成分析。结果：米糠蛋白最优酶解工艺条件为：pH 7.2,底物质量浓度8.2 g/100 mL,酶解温度46 ℃,酶解时间3 h,酶添加量0.3 g/100 g米糠蛋白,在此条件下所得酶解物ACE抑制率为(73.15±0.64)%,而且酶解物含有丰富的疏水性氨基酸(23.09 g/100 g);活性分析表明,分子量＜3 kDa活性肽组分在同质量浓度(1.0 mg/mL)下ACE抑制活性[(81.68±1.08)%]优于分子量＞3 kDa活性肽组分[(58.65±2.21)%]和酶解物[(72.64±1.61)%]。结论：米糠蛋白酶解物具有显著的ACE抑制活性,活性肽组分的分子量对ACE抑制活性具有显著影响。     

蚕蛹源ACE抑制肽的稳定性和抑制ACE动力学

研究了温度、pH、干燥方式和体外肠道酶消化对蚕蛹源ACE抑制肽稳定性的影响,并通过Lineweaver-Burk双倒数曲线作图和紫外光谱初步探讨了蚕蛹源ACE抑制肽对ACE的抑制机理。结果表明:蚕蛹源ACE抑制肽在高温、酸性和碱性条件下不稳定,易失活;冷冻干燥和喷雾干燥对蚕蛹源ACE抑制肽的活性影响较小;蚕蛹源ACE抑制肽对胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶具有较强的抗消化能力,经胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶共同消化后,蚕蛹源ACE抑制肽仍能保留初始活性的94.0%;蚕蛹源ACE抑制肽竞争性抑制ACE,其抑制常数(Ki)为0.06 mg/mL;ACE被蚕蛹源ACE抑制肽抑制后,ACE在240～280 nm附近的紫外吸光值明显增加,初步揭示了蚕蛹源ACE抑制肽抑制ACE活性时,ACE的分子结构发生了改变。     

南瓜籽蛋白源血管紧张素转化酶抑制肽的制备及其降血压活性

食源性降血压肽在调节机体血压过程中发挥着一定的积极作用。本实验采用碱性蛋白酶水解南瓜籽蛋白,水解物经膜分离获得血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽,通过质谱鉴定其结构,并采用抑制动力学和分子对接方法研究ACE抑制肽的活性机制;此外,通过ACE抑制活性实验、自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHRs）模型等评价南瓜籽蛋白水解物、膜分离组分以及南瓜籽肽的降血压活性。结果表明,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物组分ACE抑制活性较好,1 mg/mL下ACE抑制率为46.22%,100 mg/kg mb 剂量下灌胃SHRs 6 h后收缩压可以降低21.42 mm Hg;鉴定出9 个ACE抑制肽（LLV、LVF、LTPL、SVLF、LLPQ、MLPL、LLPGF、VLLPE和RFPLL）,其中RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF具有较好的ACE抑制活性,半抑制浓度均低于1 mmol/L;RFPLL和LVF具有较好的降血压活性,30 mg/kg mb剂量下灌胃6 h后SHRs的收缩压降低量分别为37.0 mm Hg和22.2 mm Hg,SHRs的舒张压降低量分别为17.0 mm Hg和11.2 mm Hg;RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF可以很好地对接ACE的活性中心,RFPLL是ACE混合型抑制剂,MLPL对ACE的抑制模式可能是竞争型抑制,LLPGF、LVF可能是ACE的非竞争型抑制剂。综上,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物是一种良好的降血压功能食品原料,其中RFPLL和LVF可用于降血压功能食品或者药品的开发原料。     

食物源ACE抑制肽的生产及构效关系研究进展

生物活性肽是蛋白质中隐藏着的可在体内发挥一定生理功能的活性肽段。目前已从食物蛋白中获得了具有免疫调节、抑菌、抗病毒、抗肿瘤、抗血栓形成、抗高血压等功能的多肽,其中血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽是研究热点之一。ACE通过产具有升压作用的血管紧张素Ⅱ和降解扩张血管的舒缓激肽在调节血压中发挥着重要作用。ACE抑制肽可通过消化道水解、发酵和熟化过程、体外酶解和遗传重组方法而获得,并可作为功能因子添加到功能食品中,相关产品已上市或研发中。本文对ACE抑制肽的生产及其构效关系研究进展等进行综述。     

血管紧张素转换酶抑制肽RLSFNP脂质体的制备工艺优化

本实验以脂质体作为包埋载体,研究血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽Arg-Leu-Ser-Phe-Asn-Pro(RLSFNP)脂质体的制备工艺。以包封率为考察指标,采用单因素试验和响应面试验优化RLSFNP脂质体的制备工艺。得出最优制备条件为:大豆卵磷脂用量120.0 mg、胆固醇用量24.6 mg、RLSFNP用量15.3 mg、乙醚用量15.0 m L、磷酸盐缓冲液(p H 7.4)用量5.8 m L、探头超声时间5.2 min。在此条件下制备的脂质体平均粒径在168 nm左右,电位为-31.2 m V,实际包封率为(67.5±0.8)%,由脂质体包埋后的RLSFNP具有一定的缓释效果。     

乳源ACE抑制肽的制备及应用

近年来高血压成为威胁人类健康的第一大慢性病,由于常规降压药物对人体的损害,食源性降压肽成为研究的热点。目前研究发现了多种乳源ACE抑制肽,并得到应用。本文综述乳源ACE抑制肽的制备、纯化及应用现状。     

牛骨血管紧张素转化酶抑制肽发酵动力学及结构与特性分析

前期筛选蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus MBL13-U),结合嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus,St)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,Lp)混合发酵牛骨粉制备血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,对其发酵动力学进行研究,采用Logistic和Luedeking-Piret等方程对发酵过程进行非线性拟合,建立发酵过程中菌体生长、产物生成、基质消耗动力学模型,拟合度均高于0.97。通过扫描电镜、紫外扫描、差示扫描量热仪对ACE抑制肽进行结构表征。结果表明,由于牛骨ACE抑制肽具有良好的吸湿性,其在扫描电镜下表面出现明显的沟壑痕迹;在222 nm波长处出现强吸收峰,符合胶原多肽的特征吸收;与牛骨胶原蛋白相比,其热变性温度升高,热稳定性较强。同时对其特性分析表明,牛骨ACE抑制肽具有较好的溶解性、较强的耐酸碱性,在0.9 mol/L以内的NaCl浓度条件下耐盐性较强,胃肠道酶对牛骨ACE抑制肽的影响较小。     

蛋清蛋白源血管紧张素转化酶抑制肽研究进展

在分析蛋清蛋白的组成及酶解性质的基础上,综述了国外蛋清血管紧张素转化酶抑制肽来源、制备方法、降压活性、酶解动力学、结构修饰和包埋技术的研究现状,并对其在食品、医药领域研究和应用的方向进行了展望。以期为我国蛋清蛋白降压肽的研究与开发提供参考。