冠突散囊菌子囊孢子破壁方法的研究

研究萌发破壁、研磨破壁、浸泡-温差-振摇破壁等方法对冠突散囊茵子囊孢子破壁效果的影响.结果表明:蒸馏水浸泡-温差-振摇法具有操作简单、经济适用、破壁率高(90.8%)的特点,是冠突散囊茵子囊孢子破壁的理想方法.     

破壁方式对冠突散囊菌有性繁殖体提取物抑菌活性的影响

为对比3种破壁方法对冠突散囊菌有性繁殖体(子囊果和子囊孢子)提取物抑菌活性的影响,利用超声法、萌发法和玻璃珠振摇法处理冠突散囊菌有性繁殖体,运用抑菌圈法测定提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性.结果表明,子囊果较易破碎,子囊孢子较难破碎;玻璃珠振摇法提取的子囊果提取物比子囊孢子提取物的抑菌活性更强,子囊果提取物对...     

冠突散囊菌DNA提取方法的比较

为寻找一种良好的提取冠突散囊菌基因组DNA的方法。实验以冠突散囊菌(CGMCC 3.0462)标准菌株为研究材料,比较不同方法提取冠突散囊菌的基因组DNA的效果差异,再利用DNA浓度测试、琼脂糖凝胶电泳及PCR扩增3种手段比较DNA提取的效果。结果显示:600W超声破壁和液氮研磨破壁提取的冠突散囊菌基因组DNA杂质含量高。而200W的超声功率无法破碎冠突散囊菌细胞壁,无法提取DNA。400W超声破壁提取的DNA的浓度较大、纯度高、效果好,适用于冠突散囊菌基因组DNA的提取。但400W超声破壁、600W超声破壁和液氮研磨破壁3种方法提取的基因组DNA均达到PCR实验的要求。     

冠突散囊菌菌落计数方法的优化

茯砖茶中冠突散囊菌(Eurotiumcristatum)的数量是评判其产品质量的重要因素,目前大多数检测机构均使用传统的国标法来检测冠突散囊菌的菌落数量。冠突散囊菌有闭囊壳构造,传统国标法中计数方法存在缺陷,不能检测出茯砖茶中冠突散囊菌的真实数量。通过对传统方法的优化和改进,对样品充分粉碎并过60目筛,利用200颗玻璃珠增加振摇强度,延长振摇时间至60min,从而打破冠突散囊菌闭囊壳,释放其中的子囊孢子,能获得茯砖茶中所含冠突散囊菌的真实数量。结果表明:该方法优化效果明显,操作简单、经济实用性好。     

不同破壁方法对灵芝孢子粗多糖抗氧化活性的影响

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除法、羟自由基清除法、2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azinobis(3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid)diammonium salt,ABTS＋·）清除法和铁氰化钾法以及酵母细胞氧化损伤保护模型,分别对未破壁灵芝孢子（unbroken Ganoderma lucidum spore,UGS）、机械法破壁灵芝孢子（mechanically broken Ganoderma lucidum spore,MGS）、生物法与机械法复合破壁的灵芝孢子（biologically and mechanically broken Ganoderma lucidum spore,BGS）提取粗多糖进行体外抗氧化活性评价。结果表明,3 种处理方法的灵芝孢子粗多糖表现出不同的抗氧化活性,且抗氧化活性与多糖质量浓度呈一定效量关系,多糖质量浓度越高,抗氧化活性越强。BGS所得粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、ABTS＋?的清除能力以及还原力在3 种处理方法中均为最强。多糖质量浓度为5.0 mg/mL时,对3 种自由基的清除率分别为84.6%、91.0%、99.9%,还原力为1.09;BGS所得粗多糖对紫外损伤酵母细胞保护能力也相对较强。表明BGS粗多糖具有较高的抗氧化活性。     

冠突散囊菌发酵枸杞工艺优化及其抗氧化活性研究

文章旨在探究冠突散囊菌发酵枸杞的工艺及枸杞发酵过程中活性成分与抗氧化活性的变化.以枸杞为原料,多酚含量为指标,采用单因素和响应面试验,优化冠突散囊菌接种量、发酵温度和发酵时间参数.在最佳接种量、发酵温度工艺条件下,通过测定不同发酵时间的发酵物中黄酮、蛋白质、多糖和氨基酸4种活性成分含量以及体外抗氧化活性,判断枸杞发酵前...     

冠突散囊菌发酵罗汉果渣过程中功能性成分及抗氧化活性的变化

采用冠突散囊菌固态发酵罗汉果渣,对罗汉果渣总皂苷、多酚、总黄酮及粗多糖的含量变化以及与其β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、α-淀粉酶及蛋白酶活性的相关性进行分析,同时研究其发酵过程中抗氧化活性的变化。结果表明,发酵过程中罗汉果渣总皂苷、多酚、总黄酮及多糖的含量都呈先增加后减少的趋势,分别在第6、8、6和6天达到最大值11.36、3.08、10.42和8.34mg/g,,是未发酵组的1.42倍、2.37倍、2.53倍及1.90倍。β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、α-淀粉酶及蛋白酶活性分别在第8、6、8和8天达到最大值57.91、153.06、69.42和85.30 U/g,总皂苷、总黄酮和粗多糖含量的变化与纤维素酶活性和蛋白酶活性具有显著正相关性,多酚含量变化和β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、α-淀粉酶及蛋白酶活性具有显著正相关性。发酵过程中,罗汉果渣的抗氧化活性呈先增加后降低的趋势,其DPPH、ABTS+自由基清除能力及总还原力分别在第8、8和6天达到最大,且与未发酵组相比具有显著性差异（P<0.05）。因此,冠突散囊菌发酵罗汉果渣能有效提升其功能性成分含量,增强其抗氧化活性,对罗汉果渣资源利用的绿...     

不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化性的影响

目的:研究不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化活性的影响。方法:采用热水提法、酶法和超声波法分别提取米邦塔仙人掌粗多糖,苯酚-硫酸法测定粗多糖纯度,以抗肝组织自发性脂质过氧化能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子能力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基能力、总还原能力、总抗氧化能力6种方法作为体外抗氧化能力评价指标。结果:酶法提取的粗多糖得率最高,为10.14%;超声波法提取的粗多糖纯度最高,为47.62%;酶法和超声波法提取的粗多糖各项体外抗氧化指标的活性均高于热水提法。结论:米邦塔仙人掌粗多糖的体外抗氧化活性强弱与粗多糖的提取方法有关,酶法和超声波法提取的粗多糖具有较好的抗氧化活性。     

蛋白核小球藻冻融破壁条件优化及对其抗氧化活性的影响

探讨了蛋白核小球藻反复冻融破壁工艺,同时研究了其对抗氧化活性的影响。考察了冻融次数、冻融时间和细胞密度对蛋白核小球藻破壁率的影响,在单因素的基础上通过响应面法优化破壁工艺参数。研究结果表明,蛋白核小球藻破壁最佳工艺条件为冻融次数5次,冻结时间1.1 h,细胞密度1.94×10~(-7),在此条件下,蛋白核小球藻破壁率为(62.18±1.2)%。同时利用DPPH、O_2~-·清除能力的强弱评价反复冻融法对蛋白核小球藻抗氧化活性的影响,结果表明,经反复冻融蛋白核小球藻对DPPH和O_~2-·清除能力均优于未经冻融处理的对照组。     

冠突散囊菌胞外多糖生物活性高通量筛选试验

目的：探讨冠突散囊菌胞外多糖的生物活性以及茯砖茶的功能成分；方法：从不同培养基冠突散囊菌液体发酵液中分离出胞外多糖ECP和ECP，采用高通量筛选技术，选用PPARs、K526和HepG2模型对其减肥降脂和抗肿瘤活性进行初步研究；结果：冠突散囊菌胞外多糖对PPARα、PPARγ、PPARδ3种模型均有活性，且对PPARγ模型有强的活性，ECP和ECP#对PPARγ模型激活值分别达1．63和1．41；ECP对K562细胞有一定的抑制作用。     

灵芝多糖不同提取方式的比较研究

目的 比较5种不同提取方式所得灵芝粗多糖的提取得率、理化性质、抗氧化活性, 确定最优提取方式。方法 采用热水浸提法、超声清洗辅助提取法、超声破碎提取法、微波辅助提取法、酶辅助提取法提取灵芝粗多糖, 可分别表示为H-GLP、U1-GLP、U2-GLP、M-GLP、E-GLP, 苯酚-硫酸法测定总糖含量、二硝基水杨酸(dinitrosalicylic acid, DNS)法测定还原糖含量, 比较对2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基(DPPH?)清除活性, 羟自由基(?OH)清除活性和还原力大小, 分析抗氧化活性, 以傅里叶红外光谱仪(fourier transform infrared spectrometer, FT-IR)和高效阴离子交换色谱(high performance anion exchange chromatography, HPAEC-PAD)进行结构表征。结果 5种提取方式提取得率的大小排列顺序为: M-GLP>E-GLP>U2-GLP> H-GLP>U1-GLP, 其中M-GLP的提取得率最高为3.98%, 其多糖含量为46.80%, 还原糖含量为5.36%。5种方式提取所得粗多糖都体现出一定的抗氧化活性, M-GLP具有较强DPPH?清除活性, U2-GLP具有较强的羟自由基清除活性, 十分接近阳性对照。结论 微波辅助提取法在提取得率和抗氧化活性都优于其他提取方式, 值得进一步开发与利用。     

黑皮鸡枞菌多糖超声辅助提取条件优化及抗氧化活性研究

目的 响应面法优化超声波提取法提取黑皮鸡枞菌(Oudemansiella raphanipes)多糖的工艺。方法 以黑皮鸡枞菌多糖的提取率为指标,采用超声波提取法从黑皮鸡枞菌中提取多糖,以超声功率、超声提取时间和碱浓度作为单因素变量,利用单因素试验结合响应面法优化确定超声波提取黑皮鸡枞菌多糖的最佳提取工艺。采用乙醇分级法黑皮鸡枞菌多糖进行乙醇分级,并对分级多糖的抗氧化活性进行研究。结果 结果表明优化得到的黑皮鸡枞菌多糖最佳工艺条件为：超声功率151.8 W、超声时间102.0 min和碱浓度0.05 mol/L,在此条件下,黑皮鸡枞菌多糖提取率最高,达到15.40% ± 0.20%,与响应面预测值16.02%相近。此外,5种乙醇分级多糖均具有一定的抗氧化活性。结论 响应面模型是成功的、可行的,80%以上分级多糖的羟基自由基清除率和还原力最强,80%分级多糖的DPPH自由基清除能力最强。     

不同提取方法对松茸多糖理化性质及抗氧化活性的影响

目的研究不同提取方法对松茸多糖(polysaccharide of Tricholoma matsutake,TMP)的理化性质及抗氧化活性的影响,并以提取得率和抗氧化活性为依据,筛选出最优方法。方法采用热水浸提、超声提取、酶提取和微波提取等4种提取方法,获得4种相应的多糖。利用高效阴离子交换色谱和傅里叶红外光谱对4种多糖的化学特性进行了结构表征。结果 4种多糖的提取得率顺序为热水浸提多糖超声提取多糖酶提取多糖微波提取多糖。在4种多糖中,超声辅助多糖含量最高(48.98%),蛋白含量最低(0.2%)。抗氧化试验结果表明,超声辅助多糖的还原力和·OH的清除力均高于其他3种多糖;从清除DPPH活性来看,超声辅助多糖和热水浸提多糖的EC_(50)分别为1.06和0.98 mg/mL,二者活性相当,均远高于其他2种多糖。结论综合考虑提取得率、多糖含量和抗氧化活性,超声提取为最优方法。4种多糖的单糖组分基本相同,但它们的摩尔比有明显不同。     

小球藻胞内多糖提取纯化及其抗氧化活性

为提高小球藻胞内粗多糖得率,并探究小球藻胞内多糖纯化组分的抗氧化作用。本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取小球藻胞内粗多糖,利用响应面法进行提取条件优化,在此基础上,采用阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱层析对提取得到的粗多糖进行分离纯化,并进行结构表征和抗氧化试验。响应面结果显示,小球藻胞内粗多糖最优提取条件为:NaOH质量分数为2.0%,料液比为1:25（g/mL）,超声功率为200 W,超声时间为20 min,提取温度为80 ℃,提取时间为1.5 h,在此条件下,小球藻胞内粗多糖的得率为18.086%±0.143%。结构表征和体外抗氧化结果显示,纯化多糖（Purification of intracellular polysaccharide,SCIP）,主要由葡萄糖、鼠李糖及半乳糖成分组成,是一种含有糖醛酸的吡喃糖。其在20 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的清除率最大,为75.64%±1.56%,在25 mg/mL时,对羟基自由基清除率最大,为71.08%±0.58%,IC₅₀分别6.42 mg/mL和8.59 mg/mL。研究结果为深入了解小球藻胞内多糖理化性质及小球藻多糖的开发利用提供基础。     

对破壁处理灵芝孢子粉功能特性的测定与分析

采用球磨法对灵芝孢子粉进行破壁处理,测定对比灵芝孢子粉破壁前后的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的溶出量,粗多糖和总三萜的生物活性物质溶出量,测定分析了水、醇提取物DPPH·、ABTS·清除能力和还原能力。结果表明:灵芝孢子粉破壁前后水分和灰分变化不显著,粗蛋白溶出量增加了33.96%,粗脂肪溶出量提高了2.94倍;灵芝孢子粉粗多糖和总三萜活性物质溶出量分别增加了40.90%和55.21%;破壁后灵芝孢子粉抗氧化能力显著提高。     

室温下龙须菜多糖提取工艺及免疫活性研究

本实验对室温下龙须菜多糖浸提工艺、分离纯化及多糖免疫活性进行研究。L9(34)正交试验结果显示,提取次数和提取时间是影响多糖得率的主要因素(p<0.05),最佳工艺为料液比1:20(m/V)、提取时间12h、提取次数3次,多糖得率为9.96%;蛋白去除实验结果显示：Sevag 法处理5 次效果较好,去除率达32%。免疫活性实验显示,室温下浸提多糖(GCp)刺激小鼠淋巴细胞增殖作用优于同浓度下采用高温提取工艺(100℃)和高压提取工艺(121℃)浸提多糖。采用冻融、超滤和Sevag 法对龙须菜粗GCp 进行纯化,获得GCp-1、GCp-2、GCpF1、GCpF2和GCp-S 五种多糖。免疫活性研究表明,6 种多糖均具有刺激淋巴细胞增殖作用,且表现剂量依赖性,其中GCp和超滤获得的多糖GCpF1、GCpF2 优于冻融多糖GCp-1、GCp-2 和除蛋白多糖GCp-S。     

冠突散囊菌胞外多糖提取工艺研究

冠突散囊菌是茯砖茶生产过程中形成茯砖茶独特品质的优势菌。从茯砖茶中分离纯化出冠突散囊菌,进行液体深层发酵,并对其产生的胞外多糖提取条件进行了正交试验。试验结果表明,本次试验中最优的多糖提取条件为:冠突散囊菌液体发酵液浓缩至原体积的1/4,乙醇浓度95%,乙醇沉淀时间10h。     

裂褶菌胞内多糖的提取纯化及生物活性分析

为提高裂褶菌胞内多糖得率,并研究裂褶菌多糖纯化组分的生物活性,本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取裂褶菌胞内粗多糖,利用响应面法对提取条件进行优化,通过DEAE-52离子交换柱层析和Sephadex G-100凝胶柱层析对提取的粗多糖进行分离纯化,并进行结构表征、抗氧化性和抑菌性试验。结果表明,裂褶菌胞内粗多糖的最优提取条件为:提取温度90 ℃,水料比30:1,超声时间30 min,超声功率230 W,裂褶菌胞内粗多糖得率达到了18.14%±0.33%。纯化多糖组分NSPG-1为β型吡喃糖,分子量为1.05×106 Da,NSPG-1多糖具有较好的抗氧化性和抑菌性,其对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的IC₅₀值分别为6.97、1.07和11.41 mg/mL,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的IC₅₀值分别为7.56、12.54和10.42 mg/mL。本研究结果为裂褶菌多糖的工业化生产和开发利用提供了基础。