滇结香花提取物组分1（Fr.1）对C2C12肌细胞胰岛素抵抗的改善作用

探讨滇结香花正己烷提取物组分1(Fr.1)改善棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导C2C12肌细胞产生胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的效果及其作用机制。方法:本文采用PA诱导C2C12肌细胞建立稳定的胰岛素抵抗细胞模型,通过检测Fr.1对胰岛素抵抗细胞(C2C12/IR)葡萄糖消耗量、葡萄糖摄取量的变化,研究其对PA介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)、胞内磷脂酰肌醇激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路中相关基因及蛋白表达的影响。结果:0.75mmol/L PA作用C2C12肌细胞16 h作为最佳建模条件;Fr.1在无细胞毒性范围内(12.5～100μg/mL)可显著增加C2C12/IR对葡萄糖的消耗量及摄取量;Fr.1可明显上调胰岛素受体(Insulin receptors,IRs)、胰岛素受体底物(Insulin receptor substrate-1,IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)、PI3K、AMPKα基因的表达水平,并上调p-IRs、p-IRS-1、Glut4、p-AMPKα、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、p-AKT蛋白质的表达水平,表明滇结香花提取物Fr.1可通过调控多个信号通路改善IR。     

镁补充对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用

目的：探讨补充镁对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用。方法：将高脂饲料喂养加链脲佐菌素注射诱发的糖尿病大鼠随机分为4组,糖尿病对照组和高、中、低剂量组在高脂饲料中分别加入氧化镁0、2000、1000、200mg／kg（以镁离子计）,正常对照组为正常大鼠喂普通饲料。喂养4周,处死动物,检测空腹血糖、血清胰岛素、总抗氧化能力（T—AOC）、丙二醛（MDA）、胰腺细胞增殖活性和血清镁等指标。结果：与糖尿病对照组比较,高剂量组空腹血糖、血清胰岛素、MDA含量降低,总抗氧化能力和胰腺细胞增殖活性升高,差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：镁补充对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗具有改善作用。     

知母水溶性小分子提取物对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响

目的 研究知母水溶性小分子提取物的制备及其对胰岛素抵抗HepG2 (IR-HepG2)细胞糖代谢的作用.方法 采用水提取,膜分离方式制备知母提取物;采用高浓度胰岛素持续作用于HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型,加入知母水溶性小分子提取物保温24 h后,测定对照组和加药组细胞内葡萄糖消耗量、肝糖原含量及己糖激酶(hexokinase,HK)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)的活性.结果 知母水溶性小分子提取物明显增加细胞的葡萄糖消耗、提高IR-HepG2细胞HK、PK活性,增加肝糖原含量.结论 知母水溶性小分子提取物可明显改善胰岛素抵抗状态下HepG2细胞对葡萄糖的利用,提高肝HK、PK活性,促进葡萄糖进入肝细胞,增加肝糖原合成,促进糖代谢.     

异鼠李素调控AKT-FOXO1通路改善胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢作用机制

目的:研究异鼠李素通过AKT-FOXO1信号通路改善Hepg2细胞胰岛素抵抗机制。方法:使用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法筛选异鼠李素安全剂量;通过高浓度胰岛素处理诱导Hepg2细胞胰岛素抵抗(IR)模型;使用葡萄糖氧化酶法测得培养基中葡萄糖含量,衡量异鼠李素对胰岛素抵抗Hepg2细胞葡萄糖代谢水平影响;通过Western blot 检测细胞中AKT(蛋白激酶B),p-AKT(磷酸化的蛋白激酶B),FOXO1(叉头转录因子O亚家族1),p-FOXO1(磷酸化的叉头转录因子亚家族1),G6pase(六磷酸葡萄糖酶),PEPCK(磷酸烯醇式丙酮酸激酶)这六个蛋白表达水平的变化。结果:异鼠李素对Hepg2细胞的安全剂量为1~3.8 μg/mL;与模型组相比,低浓度异鼠李素显著的增加了胰岛素抵抗Hepg2葡萄糖消耗量(P<0.05),显著促进了胰岛素抵抗Hepg2细胞的AKT、FOXO1蛋白磷酸化(P<0.05),从而显著抑制了G6pase和PEPCK的蛋白表达(P<0.05),其作用效果与二甲双胍相当。结论:异鼠李素可有效改善胰岛素抵抗Hepg2细胞,并通过调节AKT-FOXO1信号通路达到这一作用效果。     

生姜姜辣素的分离及对HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用

目的:本文通过提取和分离生姜姜辣素,探究姜辣素对HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用。方法:采用乙醇作为溶剂,水浴振荡提取得到姜辣素粗提物,通过乙酸乙酯萃取和石油醚对姜辣素粗提物进行纯化。测定姜辣素对1,1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）自由基清除率进行抗氧化活性分析。构建HepG2细胞胰岛素抵抗模型,测定姜辣素对细胞的葡萄糖消耗量、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力和PI3K/AKT通路有关基因表达量的影响。结果:采用正交试验确定乙醇提取姜辣素的最佳条件为:料液比1:50 g/mL、提取时间80 min、乙醇体积分数60%、提取温度50 ℃。在此条件下,姜辣素的得率为 1.885%±0.071%。乙酸乙酯和石油醚萃取后姜辣素含量大于34.55%。抗氧化分析结果表明,姜辣素对DPPH和ABTS+自由基半数清除浓度（EC₅₀）分别为0.501和0.111 mg·mL?1。使用25 μg·mL?1胰岛素处理HepG2细胞48 h后,细胞的葡萄糖消耗量显著降低（P<0.05）。姜辣素显著提高了细胞的葡萄糖消耗量、SOD和CAT活力（P<0.05）,并呈现剂量依赖性。此外,姜辣素处理组均显著上调PI3K、IRS-2和AKT基因的表达量（P<0.05）,并能显著下调GSK-3β、FoxOI和PEPCK的表达量。结论:生姜姜辣素具有良好的抗氧化活性,且通过激活PI3K/AKT通路预防HepG2细胞的胰岛素抵抗作用。     

食用菌提取物对胰岛素抵抗细胞体外糖代谢的影响

以高胰岛素诱导的HepG2细胞和地塞米松诱导的3T3-L1脂肪细胞两种胰岛素抵抗细胞模型,分别对9种食用菌(桑黄、灵芝、香菇、杏鲍菇、鸡腿菇、灰树花、猴头、姬松茸和蛹虫草)醇提物、桑黄和灵芝的4种有机溶剂(正丁醇、乙酸乙酯、氯仿和石油醚)萃取物的体外降糖活性进行了研究。HepG2模型研究结果表明,9种食用菌醇提物中灵芝和桑黄醇提物促进细胞葡萄糖消耗效果最好,并且两者高浓度组的葡萄糖消耗量均好于阳性对照组;桑黄3种有机溶剂萃取相(正丁醇相、乙酸乙酯相和石油醚相)和灵芝4种有机溶剂萃取相促进细胞葡萄糖消耗效果较好,均好于阳性对照组。3T3-L1细胞模型结果表明,9种食用菌醇提物中灵芝和桑黄醇提物的促进葡萄糖消耗效果最好,均好于阳性对照组;灵芝及桑黄4种有机溶剂萃取相中,乙酸乙酯萃取相的葡萄糖消耗效果较好。     

辣木异硫氰酸酯改善C2C12肌管细胞胰岛素抵抗

目的: 建立C2C12肌管细胞胰岛素抵抗(C2C12-IR)模型,探讨辣木异硫氰酸酯(MIC-1)对C2C12肌管细胞胰岛素抵抗的影响。方法:利用棕榈酸(PA)诱导C2C12肌管细胞,建立稳定的C2C12-IR模型,并用不同浓度MIC-1(0,2,4,8,16 μmol/L)处理细胞16 h。采用MTT法检测C2C12-IR细胞存活率,并观察MIC-1对C2C12-IR细胞葡萄糖代谢的影响;检测细胞氧化损伤情况,包括一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH);采用Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路中相关蛋白表达变化情况。结果:确定了C2C12-IR模型最佳建模条件,即用0.5 mmol/L PA处理C2C12肌管细胞16 h;与C2C12-IR组相比,MIC-1呈剂量依赖性方式,显著增加了C2C12-IR细胞葡萄糖消耗量和糖原含量;MIC-1显著降低了C2C12-IR细胞中MDA和NO水平,显著增加了GSH水平;此外,MIC-1显著增加了丙酮酸脱氢酶激酶同工酶1(PDK1)、磷酸化AKT和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达水平。结论:MIC-1通过抑制氧化应激改善胰岛素抵抗。     

淡豆豉异黄酮浓缩物对大鼠胰岛素抵抗的改善作用

目的:观察淡豆豉异黄酮浓缩物对大鼠胰岛素抵抗(IR)的改善作用。方法:采用高糖高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立IR大鼠模型,8周后测定糖耐量(GTT),留取空腹血清测定血糖(FPG)、胰岛素(FINS)和糖化血红蛋白(GHb),计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果:淡豆豉异黄酮浓缩物能明显改善IR大鼠GTT,明显降低FPG,FINS和GHb,显著增加ISI。结论:淡豆豉异黄酮浓缩物对大鼠胰岛素抵抗有明显的改善作用。     

贻贝多糖对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响

为了探究贻贝多糖对胰岛素抵抗（Insulin resistance,IR）HepG2细胞糖代谢影响的潜在分子机制,以贻贝多糖（Mussel polysaccharides,MP）为研究材料,采用CCK8法检测HepG2细胞的增殖情况,同时筛选不同浓度胰岛素构建细胞胰岛素抵抗模型,检测MP对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果显示：当胰岛素浓度处于10-6 mol/L时,HepG2细胞的葡萄糖含量最高,对葡萄糖的消耗能力最弱,是构建胰岛素抵抗模型的最佳浓度。此外,MP(100～1000μg/mL)对HepG2细胞无毒性,能促进细胞增殖。与IR-HepG2细胞相比,200、400、600μg/mL的MP能明显提升糖原含量,分别为17.20%、22.95%和32.50%。同时,高剂量MP能显著上调PI3K和GLUT2的相对基因表达量,并能降低GSK-3β的表达量。为后续MP降血糖提供实验基础,同时有助于促进MP的开发利用。     

胡椒碱对肥胖和2型糖尿病中胰岛素抵抗的改善作用及机理研究进展

对胡椒碱通过抑制食欲、调节脂质代谢、影响肠道吸收改善肥胖,通过调节能量代谢、糖代谢、脂质代谢、发挥抗炎作用改善胰岛素抵抗的研究进展进行综述,为研究胡椒碱改善肥胖和2型糖尿病的相关机制提供科学依据.     

樟芝提取物Fr.2组分对PDGF-BB活化CFSC-8B的抑制作用

为了探讨樟芝分离组分Fr.2对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激的大鼠肝星状细胞(HSCs)的作用,建立PDGF-BB活化的CFSC-8B细胞模型,并对细胞增殖、迁移、细胞外基质表达及机制进行了研究。结果表明,10 ng/mL PDGF-BB作用48 h可诱导CFSC-8B细胞增殖;Fr.2的IC50值为56.46μg/mL;25μg/mL Fr.2显著抑制PDGF-BB刺激CFSC-8B细胞的增殖及其迁移,下调α-SMA、Collagen I(Col 1)、CollagenⅢ(Col 3)和Fibronectin(Fn)mRNA表达水平,并下调p-ERK、p-JNK、p-P38蛋白质表达。表明樟芝Fr.2可抑制PDGF-BB诱导的细胞增殖、迁移及细胞外基质的表达,其机制可能与抑制MAPK信号转导通路有关。     

高良姜素对肝癌细胞HepG-2的凋亡效应

以人肝癌细胞 HepG-2 为研究对象,探讨高良姜素对肝癌细胞增殖及凋亡的影响。研究不同浓度的高良姜素对HepG-2细胞毒性及形态学、凋亡率、细胞周期及线粒体膜电位、胞内钙离子稳态的影响。结果表明:5.4、10.8和21.6 μg/mL高良姜素使细胞增殖受到抑制,48 h光密度(optical density,OD)值分别为1.295、1.170、1.043,呈现典型的凋亡形态学变化,细胞周期阻滞于DNA合成前期(first gap,G1)。出现凋亡细胞且凋亡率均呈浓度和时间依赖性,48 h凋亡率分别为23.34%、33.15%、44.15%。细胞线粒体膜电位降低,空白对照细胞线粒体膜电位相对荧光强度为27.32,5.4、10.8和21.6 μg/mL高良姜素处理组分别为11.26、7.23、3.17;细胞内钙离子浓度增大,空白对照胞内钙离子浓度相对荧光强度为3.82,5.4、10.8和21.6 μg/mL高良姜素处理组分别为6.83、11.63、18.73;胞内钙离子稳态被打破。高良姜素可通过阻滞细胞周期进程,降低线粒体膜电位,打破细胞内钙离子稳态来诱导肝癌细胞HepG-2凋亡。     

D-松醇复配Mn2+对HepG2细胞胰岛素抵抗的调节及其作用机制

采用胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型(IR),研究D-松醇复配Mn2+对细胞葡萄糖消耗量和糖原合成量的影响。实时荧光全定量分析(RT-PCR)实验检测AMPK信号通路相关基因mRNA表达水平。结果表明当胰岛素浓度为1×10-3 mmol/L,作用时间为36 h时,细胞葡萄糖消耗量达到最低,产生最大的胰岛素抵抗效应。与模型对照组相比,当D-松醇浓度为100 mg/L,复配MnSO₄为10 mg/L时,葡萄糖消耗量和糖原含量均极显著升高(p<0.01)。此外,复配组AMPKα-1、AMPKα-2和GLUT4基因表达水平均显著上调(p<0.05),G6Pase基因mRNA表达水平显著下调(p<0.05)。D松醇复配Mn2+可显著促进胰岛素抵抗细胞葡萄糖的利用,增加糖原合成,其作用机制可能涉及AMPK参与的抑制糖异生等生化调控过程起到降血糖作用。     

乳酸菌发酵大麦提取物对胰岛素抵抗的干预作用

研究乳酸菌发酵大麦提取物(LFBE)对饮食诱导的肥胖大鼠胰岛素抵抗的干预作用及其机制。通过饲喂高脂饲料的方法建立营养型肥胖模型大鼠,在饲喂模型大鼠高脂饲料的同时,分别灌胃LFBE(1 000 mg/kg bw)和水(4 mL/kg bw) 8周后,测定其体重、血脂、炎症因子等指标。结果显示,与模型对照组相比,LFBE能显著降低营养型肥胖大鼠的体重、血脂和胰岛素水平,提高糖耐量,说明LFBE可以减缓肥胖大鼠体重的增加,改善糖代谢紊乱和胰岛素抵抗症状。同时,LFBE可抑制促炎因子的表达,抑制NF-B和c-Jun氨基末端激酶(JNK)/p38介导的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,从而改善胰岛素抵抗症状。研究结果表明,LFBE具有干预胰岛素抵抗的作用,其作用机制主要与抑制MAPK(JNK、p38)的磷酸化以及NF-B活性有关。     

黑米花色苷提取物对果糖喂养大鼠胰岛素抵抗及血脂的影响

目的:研究黑米花色苷提取物对果糖喂养大鼠胰岛素敏感性及血脂的影响。方法:采用高果糖饲料诱导建立大鼠胰岛素抵抗模型,饲料中分别添加黑米花色苷提取物(5g/kg饲料)和吡格列酮(270mg/kg饲料),空白对照组动物饲以正常饲料。结果:膳食干预并没有对大鼠体重和摄食量造成显著影响。黑米花色苷提取物能够有效地预防和改善果糖诱导的胰岛素抵抗;和模型对照组相比,花色苷提取物和吡格列酮均能显著地降低血浆游离脂肪酸和甘油三酯含量并提高高密度脂蛋白含量。     

山茱萸中马钱苷和莫诺苷对HepG2细胞及其胰岛素抵抗模型的影响研究

本文通过微波辅助提取、有机溶剂萃取、大孔树脂、制备色谱和HPLC等方法对山茱萸活性成分进行分离、纯化和鉴定,得到马钱苷和莫诺苷两种主要成分。考察了正丁醇30%乙醇洗脱相(Fr.Bu-2)、马钱苷、莫诺苷对Hep G2细胞及其胰岛素抵抗模型摄取葡萄糖的影响以及对Hep G2细胞的毒性作用,结果发现,马钱苷和莫诺苷对Hep G2细胞增殖没有显著影响;Fr.Bu-2、马钱苷和莫诺苷均能显著促进Hep G2细胞葡萄糖摄取(GU),其中马钱苷促进作用最强,且呈剂量依赖性,在0.5 mg/mL浓度时,马钱苷组和莫诺苷组GU分别是对照组的3.24倍和1.64倍;此外,Fr.Bu-2、马钱苷、莫诺苷在高浓度(≥0.1 mg/mL)下均能显著促进胰岛素抵抗模型细胞GU,在0.5 mg/mL浓度时,马钱苷组和莫诺苷组的模型细胞GU分别为对照组的1.76倍和1.27倍。这些结果说明Fr.Bu-2、马钱苷和莫诺苷均能通过促进Hep G2细胞及其胰岛素抵抗模型摄取葡萄糖发挥降血糖作用。     

沙棘叶多糖的提取优化及对CT-26细胞增殖的影响

目的:研究超声波波辅助法提取沙棘叶多糖的最优工艺及其对结肠癌CT-26细胞的抑制作用。方法:首先选取超声波温度、超声波功率、超声波时间以及超声波次数进行了单因素实验,根据单因素结果进行正交优化来研究最佳的超声波辅助提取工艺,并采用MTT法、透射电镜、流式细胞术、RT-PCR和Western blot法对沙棘叶多糖抑制CT-26细胞的生长进行检测。结果:当超声波温度为70 ℃,超声波功率为400 W,超声波时间为30 min,超声波次数为2次时,沙棘叶多糖得率最大为7.93%±0.07%。各因素主次排序是:超声波功率>超声波时间>超声波温度>超声波次数。MTT结果显示不同浓度的沙棘叶多糖处理72 h后能够显著抑制CT-26细胞生长,当浓度为2000 μg/mL时抑制作用最好;透射电镜观察沙棘叶多糖处理后细胞出现明显凋亡小体,并且沙棘叶多糖能够将CT-26细胞阻滞在S期,以及明显增加胞内Caspase-3、Bax蛋白和基因表达量,降低Bcl-2基因表达量来抑制CT-26细胞的生长。结论:通过优化得到沙棘叶多糖的最优提取工艺,多糖可以有效抑制CT-26细胞的增殖,为综合开发利用沙棘资源提供科学参考。     

管花肉苁蓉提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠的影响

探究管花肉苁蓉提取物对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用,将实验动物分为空白组、模型组、V_C阳性组（1.70 mg/10 g）、管花肉苁蓉提取物低（1 mg/10 g）、中（2 mg/10 g）、高（4 mg/10 g）剂量组,持续灌胃给药30 d,测定肝、脑组织脏器指数以及各组动物肝、脑组织和血清中谷胱甘肽过氧化物歧化酶（glutathione peroxide dismutase,GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;HE染色肝、脑组织并观察结构的变化。结果表明,与模型组相比,给药组动物体质量均高于模型组。管花肉苁蓉提取物低、中、高剂量组及V_C阳性组肝、脑脏器指数升高（P<0.05）,中剂量组小鼠肝、脑脏器指数升高最为明显,分别为模型组的1.62和2.31倍。管花肉苁蓉提取物低、中、高剂量组肝、脑组织及血清中GSH-Px和SOD的活性均显著升高（P<0.05）,低剂量肝组织、中剂量脑组织、高剂量血清中GSH-Px活性升高最为明显分别为模型组的1.37、1.18、1.46倍,中剂量肝组织、高剂量脑组织、中剂量血清中SOD活性升高最为明显分别为模型组的1.11、1.14、1.74倍。管花肉苁蓉提取物中、高剂量组肝、脑组织及血清中MDA含量均极显著降低（P<0.01）,中剂量肝组织、高剂量脑组织、中剂量血清中MDA含量降低最为明显分别比模型组减少23.86%、41.68%和38.30%。HE染色发现管花肉苁蓉提取物对衰老导致小鼠肝、脑组织细胞及结构损伤具有保护作用。因此,推测管花肉苁蓉提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠有较好的保护作用。