多菌种复合发酵对灵芝菌产胞外多糖的影响

主要研究了红曲霉、红茶菌以及红茶菌分离菌株(K1,K2,K3)与鹿角灵芝菌复合发酵后对灵芝菌胞外多糖产量的影响.采用苯酚-硫酸法检测发酵液胞外多糖.结果显示,红曲霉与鹿角灵芝菌复合发酵后,灵芝菌胞外多糖产量增加15%;红茶菌分离菌株单菌发酵时自身产胞外多糖的能力按大小排列为K2>K1>K3,其中,红茶菌分离菌株K1表现为促进鹿角灵芝胞外多糖的产生;K2,K3以及红茶菌复合菌株则对灵芝菌发酵中菌丝体总量及胞外多糖的产生有竞争抑制作用.     

茶汁中灵芝菌产多酚氧化酶发酵条件的研究

绿茶汁中茶多酚一方面对灵芝菌菌体生长有一定的抑制作用,另一方面,低浓度的茶多酚能诱导灵芝菌分泌多酚氧化酶.多酚氧化酶可降解发酵液中多酚类物质,减少酚类物质对菌体生长的影响,积累更多的胞外代谢产物,降低发酵液酚氨比,提高茶色素含量,因此在低档绿茶汁中研究灵芝菌深层液体发酵产多酚氧化酶,对进一步研究发酵代谢控制具有重要意义.试验采用正交设计考察不同发酵培养基组分对灵芝菌在茶汁中产多酚氧化酶的影响情况,结果表明: 最佳发酵培养基组合为蔗糖2.5%,蛋白胨0.25%,茶汁2.5%,KH2PO4 0.20%;该菌的最适发酵工艺条件为发酵液pH5,摇床转速200 r·min-1,培养温度30 ℃,接种量10%,装液量20%,培养时间为7 d,其多酚氧化酶活性达到95 U·mL-1.     

灵芝胞外多糖深层发酵培养基的优化

研究了营养性因子对灵芝多糖深层发酵的影响,结果表明葡萄糖,玉米粉,酒糟,酵母膏和麸皮有利于胞外多糖的形成。Ｃ／Ｎ比实验表明,较高的Ｃ／Ｎ比有利于胞外多糖的形成,进一步的正交优化实验确定了灵芝多糖深层发酵的最佳培养基组成（ｇ／Ｌ）为：酒糟８０（含水量７５％）葡萄糖１０,玉米粉１０,麸皮５．在２５℃发酵罐上灵芝发酵胞外多糖的最高产量是２．９１ｇ／Ｌ。     

灵芝发酵过程中胞外多糖快速测定模型的建立

建立了灵芝深层发酵过程中胞外多糖质量深度和发酵上清液相对粘度之间关系的数学模型，从而找到了一种通过测定发酵过程中上清液相对粘度来检测胞外多糖含量的方法，模型具有较好的拟合性，平均相对误差在４．４％左右。     

两种不同来源桦褐孔菌多糖免疫活性的比较

利用水溶醇沉法分别从桦褐孔菌子实体和发酵产物中分离提取多糖,并采用两种免疫调节测定方法研究其免疫调节活性。所有桦褐孔菌子实体和发酵产物胞外乙醇沉淀多糖,除蛋白后多糖以及桦褐孔菌发酵产物胞内乙醇沉淀多糖,对NO的清除和人的外周血单个核细胞(hPBMCs)的增殖具有很强的活性,多糖含量和蛋白含量有明显的不同,桦褐孔菌发酵产物胞外多糖和胞内多糖具有较高的多糖含量和较低的蛋白含量,并且其对NO的清除活性和hPBMCs的增殖活性相对天然的桦褐孔菌子实体多糖弱。结果表明,桦褐孔菌多糖具有免疫调节活性。     

海参肠道中高产胞外多糖酵母的筛选及发酵条件

从大连海域的海参肠道中筛选得到一株产胞外多糖较高的酵母菌HS-J9,经形态学和26SrDNA序列分析,初步鉴定为季也蒙假丝酵母(Meyerozyma guilliermondii),GenBank检索号为KF668241。采用苯酚-硫酸法和响应面法对该高产菌株进行胞外多糖测定及发酵条件优化。通过单因素试验确定了pH、接菌量和发酵时间3个主要因素对发酵产糖量的影响,根据Box-Behnken中心组合设计原理确定显著性因子的最佳水平,并以胞外多糖产量为响应值进行回归分析。结果表明,当pH为6.6、接菌量4%、发酵时间41.3h时,HS-J9的胞外产糖量最大,为0.762 mg/mL,比优化前的产胞外多糖量(0.616mg/mL)提高了23.67%。     

银杏内生菌Endo Gin Ya6合成胞外多糖培养条件的优化

银杏内生菌Endo Gin Ya6能产生与银杏多糖具有相似功能性的胞外多糖。试验优化了银杏内生菌Endo Gin Ya6合成胞外多糖的培养条件,测定菌株胞外多糖含量,并以多糖产量为指标,采用单因素与正交试验相结合的方法,最终确定出该菌株合成胞外多糖最佳培养基组成为:蔗糖12%,酵母浸粉0.8%,氯化钠0.5%,磷酸氢二钾0.1%,氯化钾0.1%,培养基初始pH 7.5。最佳发酵条件为:装液量70mL,发酵温度为28℃,摇床转速为200r/min,接种量为2%,培养时间36h。在此条件下,菌株产胞外多糖能力可达10.265g/L。     

灵芝菌丝体的三萜类化合物及其抗肿瘤活性研究进展

灵芝作为一种名贵的大型真菌,能够治疗肿瘤等多种疾病。灵芝三萜类是除灵芝多糖外,灵芝中另一种主要活性成分。简要介绍了近年来灵芝深层发酵的菌丝体中三萜的种类、合成途径、影响合成的因素及体外抗肿瘤的药理活性,为以后灵芝三萜的抗肿瘤提供了理论基础。     

灵芝菌丝发酵及胞内多糖提取条件的优化

通过摇瓶培养研究了灵芝液体发酵的适宜培养条件,探讨了灵芝菌丝体胞内多糖的最佳提取条件和方法.结果表明:最适发酵培养时间为6 d,pH6.5,可溶性淀粉15 g.L-1,大豆蛋白胨10 g.L-1,硫酸亚铁1 g.L-1,所得菌丝体为44.8 g.L-1;热水浸提法的最佳条件为料液比为1∶20,浸提时间4 h,浸提温度90℃,多糖含量最高为17.5%;酶法的最佳提取条件为料液比1∶20,加酶量2%,处理时间3 h,多糖含量最高为20.8%.通过对比,确定酶法为灵芝菌丝多糖的较佳提取方法.     

桦褐孔菌胞外多糖级份的化学性质和抗氧化活性研究

研究桦褐孔茵发酵胞外多糖的抗氧化活性。采用液体深层发酵培养桦褐孔菌,利用水溶醇沉法从发酵液中分离提取胞外多糖EPS,中性蛋白酶＋Sevage试剂法对EPS去除蛋白分离得到多糖DEPS。DEPS经DEAE-52阴离子交换色谱和SephadexG-200凝胶色谱柱层析后得到三个多糖级份,其中,具有较高蛋白质和甘露糖含量以及具有较低分子量的级份DEPS2和DEPS3的抗氧化活性较好。表明桦褐孔菌胞外多糖的抗氧化活性与其蛋白质、甘露糖含量及分子量有关。     

固体菌质中灵芝多糖含量的测定

研究了以中药渣为原料培养灵芝固体菌质，从中提取灵芝多糖的工艺条件和影响苯酚-硫酸法测定灵芝多糖的因素，结果表明：490nm，25℃，25min，1．6mL6％苯酚，7．5mL浓硫酸为苯酚-硫酸法的较优测定条件，料水比1：60，85℃，2～2．5h为提取灵芝多糖的最佳工艺条件，此条件下测定甜芝、韩芝和赤芝固体菌质中灵芝多糖含量分别为4．24％，3．35％，3．11％，子实体中多糖含量分别为1．49％，1．34％，1．58％，经TCL鉴定，提取的菌质多糖确为灵芝多糖。     

野生与种植灵芝中灵芝酸和总黄酮的提取及其含量测定

采用回流的方法从野生及种植灵芝中提取灵芝酸和总黄酮,用紫外分光光度法测定其含量．测得野生及种植灵芝中灵芝酸含量分别为0．366％和0．871％,相对标准偏差（RSD,n=4）分别为1．07％和0．81％,平均回收率为99．65％;野生及种植灵芝中总黄酮含量分别为0．507％和0．551％,RSD（n=4）分别为1．31％和1．10％,平均回收率为99．39％．     

EEC对灵芝发酵和清除自由基活性的影响

采用液体深层培养方式,研究了中药薏苡仁水提醇溶物(EEC)对灵芝的细胞生长、活性物质产量和清除自由基能力的影响。结果表明:薏苡仁提取物在添加剂量分别为6、10和14 mg.L-1时,灵芝生物量、灵芝多糖和灵芝酸的产量分别提高到10.19±0.51、0.72±0.03和0.12±0.01 g.L-1;与未添加薏苡仁提取物的对照相比,分别提高了14.6%、34.21%和254.2%。另外,薏苡仁提取物在添加剂量为14 mg.L-1时,对灵芝清除两种自由基活性都有促进作用,尤其是超氧阴离子比对照提高了61.6%。结果表明:薏苡仁提取物EEC可显著促进灵芝细胞生长和产物形成,并增强灵芝提取物清除自由基的能力。     

Breaking and Characteristics of Ganoderma Lueidum Spores by High Speed Entrifugal Shearing Pulverizer

The spores of Ganoderma lucidum were ground and broken to ultrafine particles by high speed centrifugal shearing（HSCS） pulverizer. The characteristics of Ganoderma lucidum spores were analyzed by scanning electron microscope （SEM）, Fourier transform infrared spectrophotometry （FTIR）. Ultraviolet-visible pectrophotometer was used to determine the extraction ratio of aqueous solubility polysaccharide between the raw and broken spores. The immunological function on the mice before and after the breaking of spores wan investigated. The experimental results show that after being ground, the sporoderm-broken ratio reachs 100%, the original active ingredients of ganoderma lucidum spores do not change, and the extraction ratio of aqueous solubility polysaccharide is greatly increased by 40.08%. The broken spores show much higher immunological activity comparing with original spores of Ganoderma lucidum.     

Plackett-Burman设计在漆酶发酵培养基主要影响因子筛选中的应用

通过单因素试验和Plackett-Burman设计法,对灵芝菌漆酶发酵培养基主要因子进行了筛选和优化.通过单因素试验得到漆酶发酵培养基组成为：玉米粉20 g/L,葡萄糖10 g/L,麸皮20 g/L,豆粉10 g/L,KH2PO43 g/L和ABTS 0.025 g/L;采用Plackett-Burman试验设计法,从以上6因素中筛选出了对漆酶产量有显著性影响的主效应因素为：玉米粉、麸皮和ABTS,并得到了以漆酶产量为响应值的线性回归方程,为进一步的响应曲面法优化奠定了基础.     

绿茶茶多酚工业提取工艺研究

研究从低档绿茶中提取天然食品抗氧化剂茶多酚的工业生产工艺，工艺主要流程为茶汤预处理后的多级逆流萃取，真空浓缩，纯化沉析，低温真空干燥，该工艺的工业规模生产茶多酚得率大于８％，纯度高于９５％。     

绿茶茶多酚工业提取成套设备研究

研制成从低档绿茶中提取天然食品抗氧化剂茶多酚的成套设备。阐述了成套设备的设备，配置工艺流程及特点，年产１５ｔ茶多酚的成套设备运行结果表明，茶多酚提取率大于８％，纯度高于９５％。     

红发夫酵母生物合成虾青素天然促进剂的研究

在摇瓶发酵过程中添加富含虾青素合成前体的果蔬汁及茶汁,考察了添加剂对虾青素合成的影响.结果表明:在适当的发酵时间添加橙汁、绿茶汁和番茄汁能明显促进细胞生长及虾青素合成,最高虾青素产量和细胞虾青素含量可分别比对照提高124%和128%;添加菠菜汁导致细胞虾青素含量有所降低.