米曲霉脂肪酶催化鱼油酯酯交换制备高含量EPA/DHA甘油酯的研究

利用米曲霉脂肪酶催化甘油酯型鱼油和乙酯型鱼油的酯酯交换反应制备高含量EPA/DHA甘油酯,考察了底物摩尔比、反应温度、酶添加量和摇床转速对酶催化反应的影响,得到了最优酶催化反应条件:甘油酯型鱼油与乙酯型鱼油摩尔比1∶3,酶添加量14%,反应温度70℃,摇床转速150 r/min。在最优的酶催化反应条件下反应18 h,产物甘油酯型鱼油EPA和DHA含量可达到39.72%。在优化条件下对米曲霉WZ007菌丝体重复使用6次,甘油酯型鱼油产品中的EPA和DHA含量仍保持在34.51%。     

Lipozyme~CALB L固定化及催化合成EPA/DHA甘油酯的研究

研究利用树脂对脂肪酶LipozymeCALB L进行固定化,然后将固定化酶用于催化富含二十二碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的脂肪酸乙酯与甘油进行酯交换反应合成甘油酯。在17种常用树脂中,环氧树脂(ECR8285)在缓冲液p H 5、缓冲液离子浓度1 mol/L、酶加量120mg/g(以载体质量计)时,通过共价结合固定化的LipozymeCALB L酶活力最高,可以达到22 967U/g,蛋白质吸附率为91.88%。以ECR8285固定化的LipozymeCALB L催化富含EPA和DHA的脂肪酸乙酯与甘油反应合成甘油酯,在叔丁醇体系中催化PUFA乙酯与甘油反应8 h后,PUFA乙酯的转化率可以达到51.1%;将叔丁醇回收后,在真空状态下继续反应24 h,PUFA乙酯的转化率可以达到91.7%,产物中甘油三酯的含量可以达到70%以上。     

酶法合成富含DHA、EPA甘油三酯的研究

以甘油和PUFA乙酯为底物,通过酶催化酯交换反应合成富含DHA、EPA的甘油三酯。首先以叔丁醇为溶剂合成甘油酯混合物,优化后的条件为:选择Novozyme 435脂肪酶为催化剂,反应温度50℃,甘油与PUFA乙酯摩尔比1:3,底物在叔丁醇中的质量浓度为200 g/L,酶加量为底物质量的2%,在此条件下反应12 h后PUFA乙酯的转化率可达到51.5%。将在此条件下得到的反应混合物除去叔丁醇,在真空条件下继续反应24 h,PUFA乙酯转化率可达到87.8%。得到的产品混合物甘油酯组成为:甘油三酯67.1%,甘油二酯18.2%,甘油单酯2.1%。     

DHA单细胞油脂的萃取与浓缩

裂殖壶茵Schizochytrium sp.FJU-512细胞内富含生理活性物质二十二碳六烯酸(DHA),极具开发潜力.采用超临界CO2萃取技术对Schizochytrium sp.FJU-512 DHA单细胞油脂进行萃取,结合尿素包合法对所得单细胞油脂中的DHA进行浓缩.通过工艺优化,得到最佳提取条件为:萃取压力45 MPa,萃取温度35℃,萃取时间3 h,在该条件下单细胞油脂的得率高达25.9%;最佳浓缩工艺为:包合温度4 ℃,脂肪酸乙酯、尿素与乙醇的配比为1:2:12,包合时间6 h,该条件下DHA含量由46.1%提高到85.6%.     

酶促乙酯化和分子蒸馏联用制备高DHA乙酯的工艺

利用固定化脂肪酶催化乙酯化反应将裂殖壶菌总脂转化为乙酯,并借助分子蒸馏手段制备得到了高DHA含量的乙酯产品。实验考察了反应温度、时间、底物质量配比和脂肪酶添加量等参数对酶促乙酯化反应的影响。在较优条件下(反应温度40℃,反应时间24h,底物质量比10∶2,Lipozyme 435添加量为油脂质量的6%),固定化脂肪酶的操作稳定性良好。采用分子蒸馏技术富集酶促醇解所得裂殖壶菌乙酯中的DHA,可得到DHA含量高于80%的乙酯产品,通过多级分子蒸馏和将轻相组分回流的方式可以显著提高DHA含量乙酯的得率。     

高含量EPA/DHA甘油三酯的制备工艺

以EPA/DHA乙酯和甘油为原料,甲醇钠作为催化剂制备高含量EPA/DHA甘油酯。通过对反应温度、反应时间、甘油用量和催化剂用量的优化,得到制备EPA/DHA甘油三酯的最佳反应条件:温度为120℃,甲醇钠添加量为原料油的0.4%,甘油为原料油的7.0%,反应时间5 h。反应终止后产物中EPA/DHA甘油三酯含量可达47.0%以上,进一步经分子蒸馏精制后,终产物中EPA/DHA甘油三酯的含量高达75.0%以上。     

酶法催化制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯

研究了两步酶法催化制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯工艺。首先利用脂肪酶Lipozyme 435催化1-十八烷氧基甘油和DHA乙酯合成1-十八烷氧基-2,3-二DHA烷氧基甘油二酯(DEAG1),然后利用脂肪酶Lipozyme RM IM催化油酸乙酯和DEAG1进行酯交换反应制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯。通过单因素实验研究了反应温度、反应时间、底物摩尔比和加酶量对酯交换反应的影响,得到了最佳工艺条件。结果表明:在反应时间48 h、DHA乙酯与1-十八烷氧基甘油摩尔比2∶1、加酶量为底物总质量的10%、反应温度50℃条件下,合成的DEAG1含量最高,为75.41%;在反应时间12 h、油酸乙酯与DEAG1摩尔比3∶1、加酶量为底物总质量的7%、反应温度60℃条件下,Sn-3位油酸结合率为30.23%,烷氧基甘油二酯总含量为80.49%。     

鱼油精炼副产物中EPA和DHA的回收工艺研究

以鱼油精炼副产物的皂脚和固脂为原料,采用酸催化乙酯工艺回收皂脚、碱催化乙酯工艺回收固脂,结果表明:酸催化回收皂脚时无水乙醇/脂肪酸为0.8 mL/g,硫酸/脂肪酸为0.09 mL/g,78℃下反应4 h,鱼油乙酯化得率达到97%;碱催化回收固脂时无水乙醇用量0.6 mL/g,NaOH用量3%,78℃下反应3 h,鱼油乙酯化得率达到94.5%。以酸、碱催化得到的乙酯化鱼油为原料,分别经二次三级分子蒸馏和一次尿素包合,产品中EPA、DHA的总质量分数分别可达到78.42%和76.15%。     

尿素包合法联合分子蒸馏技术提纯乙酯化鱼油中EPA及DHA的工艺研究

联合尿素包合法及分子蒸馏技术对乙酯化鱼油中的EPA和DHA进行提纯.尿素包合试验中考察了脲酯比、醇脲比、结晶温度及结晶时间等因素对产品纯度及回收率的影响,选择试验条件为脲酯比2:1、醇脲比4:1、结晶温度0℃及结晶时间1h进行尿素包合试验,得到EPA及DHA总纯度为63.5％的产品,回收率为48.5％.分子蒸馏试验中考察了蒸馏温度、预热温度、内冷温度、刮膜器转速及进料速率等因素对试验结果的影响,选择在蒸馏温度90℃、预热温度40℃、内冷温度15℃、刮膜器转速360 r/min、进料速率2 mL/min及真空度0.1 Pa的条件下对乙酯化鱼油进行二次提纯,产品中EPA及DHA总纯度为78.9％,回收率为49％.     

酶促DHA乙酯甘油解制备DHA甘三酯的工艺研究

采用高纯度DHA乙酯(DHA含量(78. 7±0. 6)%)为原料,在Novozym 435酶的催化作用下甘油解制备DHA甘三酯。考察DHA乙酯与甘油摩尔比、反应温度、反应时间以及加酶量对反应过程中甘一酯、甘二酯、甘三酯、乙酯含量及乙酯转化率的影响,得到最佳条件为反应温度100℃、加酶量为DHA乙酯质量的6%、DHA乙酯与甘油摩尔比3∶1、反应时间12 h,在此条件下乙酯转化率为(97. 0±0. 2)%,产物中甘三酯含量为(95. 6±0. 1)%,DHA含量为(76. 2±0. 0)%。     

活性炭基固体酸催化合成酒用脂肪酸乙酯的研究

以白酒酒糟为原料,通过浓硫酸磺化制备了活性炭基固体酸催化剂,并催化合成乙酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯和丁酸乙酯4种酒用脂肪酸乙酯。结果表明,乙酸乙酯最佳反应条件为活性炭基固体酸催化剂添加量3%,酸醇物质的量比1∶5,酯化时间4 h,酯化温度80 ℃,酯化率达86%;乳酸乙酯最佳反应条件为催化剂添加量4%,酸醇物质的量比1∶8,酯化时间10 h,酯化温度95 ℃,酯化率达76%;己酸乙酯最佳反应条件为催化剂添加量4%,酸醇物质的量比1∶10,酯化时间12 h,酯化温度98 ℃,酯化率达68%;丁酸乙酯最佳反应条件为催化剂添加量4%,酸醇物质的量比1∶9,酯化时间8 h,酯化温度90 ℃,酯化率达73%。活性炭基固体酸催化剂可以重复使用6次。     

Optimization of omega-3 enriched-diacylglycerol production by enzymatic esterification using a response surface methodology

Incorporation of an eicosapentaenoic acid/docosahexaenoic acid (EPA/DHA) moiety into diacylglycerol (DAG) oil using lipase-catalyzed esterification was optimized using an ethyl ester form of EPA/DHA. A response surface methodology (RSM) was used to optimize reaction parameters (time, temperature, and substrate mole ratio) for incorporation of DHA and EPA into DAG oil. Predictive models for DHA+EPA contents of DAG and the amount of DAG produced after esterification were adequate and reproducible. DHA+EPA contents of DAG significantly increased with reaction time and substrate mole ratio (p<0.05). In contrast, the reaction temperature negatively affected the amount of DAG after esterification. Synthesis of DHA+EPA-enriched DAG was optimized for a maximum DAG content with the highest DHA+EPA content, in which 630.0 mg of DAG containing 34.8% DHA and EPA was predicted using the RSM model. The optimal reaction conditions were predicted at 20.6 h, 57.9 and a DHA/EPAenriched ethyl ester: DAG oil ratio of 2.5:1.     

超临界CO2状态下直接酯化法制备共轭亚油酸甘油酯

在超临界CO2状态下,采用脂肪酶催化共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)与甘油反应制备共轭亚油酸甘油酯,分别应用单因素和正交试验考察分子筛添加量、酶用量、反应压力、温度和时间对CLA酯化率的影响。结果表明,最佳工艺条件为分子筛用量6%、酶用量4%、反应温度60℃、反应时间20h、反应压力11MPa,此条件下CLA的酯化率可达到90.98%。这种CLA甘油酯的脂肪酸组成中,9c,11t-CLA和10t,12c-CLA的含量分别为37.79%和41.66%。     

红曲霉发酵液酯化酿酒尾水制备酯化液的研究

利用红曲霉发酵生成的酯化酶液,催化酿酒尾水中的有机酸和醇,来制备含酯量较高的酯化液。本研究采用液态发酵法制备酯化酶液,添加到酿酒尾水、乙醇、己酸的混合液中,在一定条件下进行酯化反应,以混合液总酯含量和各有效成分含量为指标,设计单因素实验考察影响酯化反应因素的范围,采用正交设计实验优化各酯化反应的条件。正交实验所得的最优条件为乙醇添加量为10%、酯化酶液添加量为9%、己酸添加量为1.5%、酯化反应温度为35℃,在此条件下混合液中总酯的含量达137.01 mg/100 mL,其中己酸乙酯含量高达222.71 mg/L,乳酸乙酯的含量由92.93 mg/L下降到74.61 mg/L,乳酸乙酯与己酸乙酯的比值小于1。所得酯化液适合用于白酒的勾调,不仅大幅提高了酒体中总酯含量,还减少了乳酸乙酯对主体香型的抑制和青涩杂味,使酒体香气更为突出协调。     

相转移催化合成大豆油蔗糖多酯初步研究

以大豆油和蔗糖为原料,十六烷基三甲基溴化铵为相转移催化剂,采用两步法合成大豆油蔗糖多酯。初步筛选了合适的助熔剂(脂肪酸皂),并确定了最佳工艺条件:蔗糖粒度120目,搅拌速率500 r/min,催化剂用量3%,反应温度130℃,n(乙酯)∶n(蔗糖)为12∶1,反应时间6 h。在最佳工艺条件下反应得到蔗糖多酯产率达到89.12%,酯化度6.8。对蔗糖多酯和大豆油的理化特性进行了比较,两者性质接近。最后借助薄层色谱(TLC)、红外光谱(IR)对产品结构做了初步鉴定,产品达到预期目标,可以作为普通食用油替代品。     

高乳酸乙酯酯化液的制备及其在调味酒生产中的应用

该研究利用筛选自老白干酒醅中的一株高产乳酸干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）发酵制得乳酸发酵液,通过南极假丝酵母（Candida antarctic）脂肪酶B催化乳酸发酵液与酒尾合成乳酸乙酯,并通过单因素试验和正交试验对其催化工艺进行优化,最后通过蒸馏浓缩得到乳酸乙酯调味酒。结果表明,乳酸乙酯合成最佳催化工艺为：酒精度40%vol的酒尾与乳酸发酵液体积比1∶1,pH值3.0,酯化酶添加量0.5%,反应温度30 ℃,反应时间21 d。在此最优催化工艺下,酯化液中乳酸乙酯含量达12.05 g/L。将其浓缩后得到乳酸乙酯含量为17.62 g/L的调味酒（酒精度45%vol）,其清澈透明,酯香突出,适用于勾调冬季或机械化生产中乳酸乙酯含量偏低的基酒,增加酯含量,提升酒的品质。     

植物甾醇酯的脂肪酶促催化合成及其分析表征

运用中心组合设计,以酯化率为考察指标,对脂肪酶(由Candida rugosa生产)催化合成植物甾醇油酸酯进行优化研究。通过甾醇酯化率的响应面分析,研究反应温度、反应时间、底物物质的量的比(油酸:植物甾醇)和酶量及其交互作用对酯化反应的影响,构建相应的回归模型,并进行验证。结果表明：反应温度41℃、反应时间19h、底物物质的量的比2.4:1、加酶量7%为最佳条件,验证实验酯化率可达77.43%。并采用红外光谱和气相色谱-质谱对甾醇酯进行有效检测分析及结构表征。     

酶促鱼油选择性水解制备EPA、DHA甘油酯的研究

研究了假丝酶母脂肪酶催化鱼油选择性水解反应 ,确定了油水比、脂肪酶浓度、反应温度、pH、激活剂、溶剂、反应时间、水解率等因素对反应的影响 ,同时对鱼油水解产物进行了分离和检测 ,使EPA、DHA在甘油酯型产品中含量达到 5 0 %以上     

降低高度不饱和脂肪酸乙酯中的过氧化值方法的研究

以LiAlH_4为还原剂,试图降低富含高度不饱和脂肪酸乙酯(主要是5、8、11、14、17、——廿碳五烯酸乙酯,5、8、11、14、17、20——廿二碳六烯酸乙酯。分别简称为EPA乙酯,DHA乙酯)的鱼油酸乙酯的过氧化值。其中,以乙醚为溶剂,LiAlH_4的用量为3％,反应时间为60～90min,去过氧化值的效果显著,方法较简便。     

脂肪酶催化鱼油醇解富集EPA和DHA的研究

研究了固定化脂肪酶Lipozyme RM IM催化鱼油部分醇解反应,探讨了油醇比、酶加量等因素对反应的影响,在优化条件下,可以使鱼油中EPA、DHA的含量由26.1%升至43.O%,得率大于75%,对鱼油醇解产物进行了分子蒸馏提纯,得到了富含EPA、DHA的甘油酯型鱼油产品.