60Co-γ射线辐射诱变寇式隐甲藻6号的技术研究

寇氏隐甲藻是产DHA的优良藻种,期望通过60Co-γ射线诱变提高其DHA的产率,实现商业化生产DHA。寇氏隐甲藻(Crypthecodium cohnii 6号)经不同剂量的60Co-γ射线分别辐照诱变,经分离培养获得了不同诱变剂量下藻体的致死率,并对它们的的生长时间、生长速率以及生物量进行了比较,以确定最佳诱变条件。实验结果表明诱变剂量3.0kGy~5.4kGy时,死亡率达到99.999%以上,诱变剂量为1.8kGy的寇氏隐甲藻经培养后生物量最高,并在开始培养后36h就达到最大生长速率,这为进一步研究提供了科学依据。     

曲酸生产菌的60Co-γ射线诱变选育及表征

为了获得高产曲酸菌株,采用不同剂量60Co-γ射线对出发菌株米曲霉进行辐射诱变处理.结果表明,当60Co-γ射线辐射剂量为800Gy时,对出发菌株的诱变效果最好,使突变菌株C8-128的曲酸产量由出发菌株的15.68g/L增加到61.5g/L,产量提高292.2%,经遗传稳定性实验,得出其有良好的遗传稳定性,产酸能力稳定.将筛选出的高产曲酸菌株C8-128通过菌落形态和摇瓶发酵培养特征与亲株进行比较,得出出发菌株经60Co-γ射线辐射诱变后产生的一些特征性变化.     

60Co-γ辐照对商业化包装无花果保鲜效果初探

以无花果为试验材料,采用不同剂量的⁶⁰Co-γ射线对不同商业化包装无花果进行辐照处理,辐照后置于常温下贮藏,测定外观品质、腐烂率、可溶性固形物含量及感官品质,初步探索⁶⁰Co-γ辐照对商业化包装无花果的保鲜效果。结果表明, ⁶⁰Co-γ辐照可减轻无花果腐烂程度, ⁶⁰Co-γ辐照优化框装无花果腐烂率最低, 1.8 kGy辐照组感官评价分值最高。贮藏结束,对照组无花果腐烂率在58.00%～87.50%,辐照组腐烂率在31.00%～78.60%,低于对照组。通过感官评价, ⁶⁰Co-γ辐照组硬度高于对照组,而且辐照处理延缓无花果感官品质的劣变进程。辐照处理对无花果的可溶性固形物含量无显著影响。其中, 1.8 kGy ⁶⁰Co-γ辐照优化包装的框装无花果可较好维持无花果的品质特征,减轻腐烂程度,对无花果辐照保鲜的参考剂量设定具有参考价值。     

复合诱变选育高产虾青素的红法夫酵母菌株

以红法夫酵母野生型菌株(Phaffia rhodozyma 02)为原始出发菌株,依次进行2轮紫外(UV)-氯化锂(LiCl)和60Co-γ射线诱变,以40μmol/L二苯胺为抗性筛选剂,筛选得到1株遗传稳定的高产虾青素红法夫酵母突变菌株H4-4,命名为HSC-125,虾青素产量为25.36 mg/L,是原始出发菌株P.rhodozyma 02(4.75 mg/L)的5.34倍。采用2轮UV-LiCl和60Co-γ射线复合诱变结合二苯胺作为抗性筛选剂,选育得到的高产虾青素的红法夫酵母突变株,其遗传性质稳定,展现良好效果。     

60Co-γ射线和电子束辐照对红碎茶杀菌效果与品质的影响

采用不同剂量的^(60 )Co-γ射线和电子束辐照红碎茶,分析其对红碎茶中微生物、品质成分和感官品质的影响。结果表明,2种辐照方式均能有效抑制红碎茶中微生物污染情况,^(60 )Co-γ射线和电子束辐照红碎茶菌落总数D₁₀值分别为1.70,2.66kGy,^(60 )Co-γ射线对红碎茶的杀菌能力强于电子束辐照。2种辐照方式不会对红碎茶水浸出物和氨基酸产生明显影响,但能引起茶多酚和咖啡碱含量减少,可溶性糖含量增加,且电子束辐照对茶多酚、咖啡碱和可溶性糖的影响大于^(60 )Co-γ射线辐照的;^(60 )Co-γ射线辐照后红碎茶灰分含量增加,电子束辐照后红碎茶灰分含量无明显变化,^(60 )Co-γ射线对红碎茶的灰分含量影响强于电子束辐照;2种辐照方式对红碎茶感官品质均有一定提升。综上,^(60 )Co-γ射线和电子束辐照对红碎茶卫生品质的影响存在一定差异性。     

紫外-LiC1复合诱变选育高产糖化酶菌株

对糖化酵母As2.1548的紫外-LiC1复合诱变条件进行研究.在紫外照射时间90 s、LiC1用量0.5%时,其正突变率达到21.8%.成功选育出一株遗传性能稳定的高产糖化酶菌株A-U-90-8,其产糖化酶活力为324 U/g,比出发菌株提高了48.6%.     

60 Co-γ辐照对琥珀酸产生菌原生质体的诱变选育

采用不同剂量的^60Co-γ辐照对琥珀酸产生菌MS-23的原生质体进行诱变处理,结果表明,辐照剂量为30kGy时致死率超过90％,具有很好的诱变效果。经多次筛选得到1株高产琥珀酸的突变株MSCo-24,高效液相色谱法测定其琥珀酸产量为2．08g／L,比出发菌株产酸量提高了63．78％,遗传性状稳定。     

γ-聚谷氨酸高产菌株的诱变选育研究

本文对一株产γ-聚谷氨酸的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)进行了紫外照射、紫外-硫酸二乙酯、紫外-亚硝基胍复合诱变筛选研究以及诱变株的摇瓶筛选研究,建立了聚谷氨酸产生菌地衣芽孢杆菌最佳诱变方法:紫外诱变8min,致死率为90.6%;紫外-硫酸二乙酯复合诱变致死率94%;紫外-亚硝基胍复合诱变致死率89.8%诱变效果最好。诱变株γ-聚谷氨酸产率最高达到了3.55%,比出发菌株1.48%提高了140%。     

海藻酸钠涂膜及60Co-γ辐照处理对小枣的保鲜作用

以全红期的山东省乐陵小枣为实验材料,分别进行60Co-γ辐照处理、海藻酸钠涂膜处理及二者结合处理后,与对照组同时于(2±0.5)℃冷库贮藏,并对低温贮藏过程中枣的失重率、总糖、还原糖、VC、可滴定酸含量及糖酸比的变化进行测定。结果表明:涂膜、辐照、涂膜+辐照处理均能有效减少水分散失,延缓VC和可滴定酸的下降,抑制糖酸比的上升,涂膜+辐照处理能保持较高的总糖、还原糖含量。其中,60Co-γ辐照+海藻酸钠涂膜处理于(2±0.5)℃冷库贮藏保鲜效果显著优于其他实验处理组,有助于提高乐陵小枣采后的低温贮藏品质。     

不同诱变方法选育嗜酸乳杆菌NX2-6类细菌素高产菌株

采用60Coγ射线、硫酸二乙酯（DES）、原生质体紫外3种诱变方法对嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）NX2-6进行诱变,以期获取高产类细菌素菌株。结果表明,60Coγ射线诱变的最佳辐照剂量为2.0k Gy,DES处理的最佳条件是浓度为0.7%的DES处理菌体10min,原生质体紫外诱变最佳照射时间为20s,分别得到高产菌γ56,D47和UV156,它们的抑菌效价分别为6096.78,5384.98U/m L和6230.79U/m L,是出发菌株抑菌效价（2819.36U/m L）的2.16、1.91、2.21倍。传代表明,突变株γ56、D47、UV156具有稳定的遗传性。      

海藻酸钠涂膜及60Co-γ辐照处理对小枣的保鲜作用

以全红期的山东省乐陵小枣为实验材料,分别进行60Co-γ辐照处理、海藻酸钠涂膜处理及二者结合处理后,与对照组同时于（2±0.5）℃冷库贮藏,并对低温贮藏过程中枣的失重率、总糖、还原糖、VC、可滴定酸含量及糖酸比的变化进行测定。结果表明:涂膜、辐照、涂膜+辐照处理均能有效减少水分散失,延缓VC和可滴定酸的下降,抑制糖酸比的上升,涂膜+辐照处理能保持较高的总糖、还原糖含量。其中,60Co-γ辐照+海藻酸钠涂膜处理于（2±0.5）℃冷库贮藏保鲜效果显著优于其他实验处理组,有助于提高乐陵小枣采后的低温贮藏品质。      

60Co-γ射线辐照灭菌对白芍药材中有效成分的影响

目的考察⁶⁰Co-γ射线辐照灭菌对白芍中6种成分[儿茶素、没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖(β-PGG)和苯甲酰芍药苷]含量的影响。方法采用Tnertsil^?ODS-2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为A-乙腈,B-0.05%磷酸水溶液系统,梯度洗脱,检测波长230 nm,流速为1.0 ml/min,柱温30℃。分别选择剂量为0,2,5,8 kGy对白芍药材进行辐照,比较辐照前后活性成分含量的变化,并进行配对t检验考察其显著情况。结果白芍药材中儿茶素、没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、β-PGG和苯甲酰芍药苷分别在0.005~0.128,0.007~0.178,0.034~0.850,0.178~4.440,0.023~0.580,0.005~0.120 mg/ml范围内呈良好线性,平均加样回收率分别为99.1%,98.4%,99.9%,100.0%,99.8%和96.4%;辐照剂量不超过5 kGy时,各组分含量无显著变化(P>0.05)。结论为保证白芍药材安全有效,采用⁶⁰Co-γ射线对白芍药材进行辐照灭菌时,辐照剂量不宜超过5 kGy。     

复合诱变选育γ-癸内酯生产菌株

以紫外诱变和化学诱变相结合的复合诱变方法,对γ-癸内酯产生菌株Yarrowia lipolytica酵母进行诱变。经过一次紫外诱变后,γ-癸内酯产量为过去的2.5倍,但多次诱变后其产量并没有进一步提高,且稳定性不好。其后采用硫酸二乙酯进行化学诱变稳定其产量。最终γ-癸内酯产量为出发菌株的2.3倍。     

微波诱变选育耐热糖化酶菌株

采用微波诱变糖化酶生产菌株Aspgillus niger 3.4309,用SDS双层梯度平板进行筛选,最终得到比出发菌株糖化酶耐热性提高15～20 ℃的突变株9-1,经多次传代证明该菌株遗传性能稳定.     

原生质体诱变筛选香菇多糖高产菌株

对香菇原生质体进行诱变,以期望得到香菇多糖高产菌株.选择合适剂量的60Coγ射线,根据香菇多糖的产量,筛选出高产香菇多糖的菌株.选择剂晕为600Gy的,0coy射线对香菇原生质体进行诱变,得到香菇多糖产量比出发菌株提高了20.6%的突变菌株,传代8代后,其产香菇多糖遗传稳定性保持良好.通过对香菇原生质体进行60Coγ射线诱变,可以得到能提高香菇多糖产量的菌株,为香菇的良种选育和香菇多糖的开发提供参考.     

氨肽酶产生菌60Coγ射线诱变育种的研究

采用呻^60Coγ射线对氨肽酶产生菌米曲霉U42进行照射诱变，获得4株高产菌株，经多次摇瓶发酵实验表明，其中菌株UCo42-3发酵酶活为6210U／mL，其平均产氨肽酶比出发菌株提高了约150％，连续传6代，产酶能力稳定。     

高产γ-氨基丁酸乳酸菌菌株的诱变选育与鉴定

本文以从内蒙古传统发酵食品中分离的80株乳酸菌为研究对象,在GYP培养基中进行高产γ-氨基丁酸（GABA）菌株的筛选后,利用紫外线进行诱变处理,得到GABA突变菌株,并对其进行了菌种鉴定。结果表明,从80株供试乳酸菌中筛选出4株高产γ-氨基丁酸的菌株,再经紫外诱变后得到1株高产突变菌株US3-3。该菌株紫外诱变后,其γ-氨基丁酸含量为2.482 g/L,是诱变前提高1.9倍,并对其多次传代稳定性较好,经16S r DNA序列分析,鉴定为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）。      

N~+离子束辐照诱变选育细菌纤维素高产菌株

为获得细菌纤维素(Bacterial cellulose,BC)高产菌株,同时改善BC材料学性能,采用低能N+离子束辐照技术对木醋杆菌(Acetobacter xylinum)进行了诱变选育。将菌落大小、光滑度、致密度、润湿度以及BC膜形成速率、柔韧度、BC产量等作为筛选依据,建立了平板-96孔板-试管筛选体系,筛选得到2株BC产量提高且产物材料学性能改良的目标菌株5D、2D。菌株5D BC产量为4.84 g/L,比出发菌株BC产量提高了89.06%,菌株2D BC产量为4.53 g/L,比出发菌株BC产量提高了76.95%。利用FT-IR、XRD、SEM、拉力试验等方法对目标菌株产物性能进行了研究,结果表明,目标菌株5D、2D发酵BC均具有高于出发菌株发酵BC的结晶度、抗拉强度及较小的断裂伸长率,具有更为致密的层状结构以及清晰的纤维束三维网状结构,表明其具有较为优良的力学性能。目标菌株的获得对BC产量的提高和性能改良奠定了基础。     

低能离子束诱变选育高产内切型菊粉酶菌株

从18株黑曲霉菌株中,筛选得到产内切型菊粉酶酶活最高的一株菌株,编号为08013,酶活为3.01U/mL。用低能离子束N~+对选育出的黑曲霉菌株进行诱变研究,当N~+注入能量为10Kev,注入靶室的真空度为10~(-3)Pa,脉冲剂量为10~(14) N~+/cm~2s,N~+注入剂量为60×2.6×10~(13)N~+/cm~2时,筛选出一株内切型菊粉酶酶活最高的菌株,编号为08-DT-60-09,酶活为4.20 U/mL,比出发菌株的酶活提高了39.53%。