传统发酵乳制品中乳酸菌的分离及鉴定

对乳酸菌的分类、应用以及传统发酵乳制品中乳酸菌的分离和鉴定方法进行详述,为今后传统发酵乳制品中乳酸菌的分离、鉴定及进一步纯化应用奠定了理论基础.     

传统发酵酸乳中乳酸菌的分离鉴定

对喀什市、疏勒县和疏附县传统发酵酸奶中的乳酸菌进行分离,结合菌落形态特征和凝乳试验,筛选出6株菌株(K3、L1、L2、L3、F1、F2),通过耐盐和耐酸试验,得知菌株L1在5%盐浓度、培养24h时存活率达到45.95%,F1在pH 2、培养2h时存活率为6.33%;通过16SrRNA序列扩增和序列比对后,初步确定K3、L1、L2为德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii),L3、F1、F2为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)。     

伊犁地区乳品中乳酸菌的分离及鉴定

从伊犁地区牧民家庭采集的乳品中分离得到10株乳酸菌,经过对其生物学特性的鉴定,有干酪乳杆菌假植物亚种(L.casei subsp.Plantaman)4株、鸡肠球菌(E.gallins.rum)1株、屎肠球菌(E.faecium)1株、乳酸乳球菌乳酸亚种(L.lactis subsp.cremoris)2株、肠膜明串珠菌肠膜亚种(Lc.Mesenteroides subsp.Mesenteroides)2株。通过研究发现,该鉴定菌株的生物学特性基本符合各属和种的鉴定标准,均属于中温性乳酸菌。     

新疆传统发酵食品中乳酸菌的分离鉴定及其生长代谢特性

从新疆传统发酵骆驼奶、马奶子和辣椒酱中分离筛选得到13株乳酸菌,通过16S rRNA基因序列和phe S基因序列系统发育学分析,结合表型特征确定乳酸菌的分类学地位。通过测定耐酸耐盐特性、产酸特性、降解亚硝酸盐能力、氨基酸脱羧酶活力及抑菌能力,筛选获得了3株具有潜在生产应用价值的乳酸菌,即Lactobacillus pentosus CPC1(CICC 6283)、Lactobacillus pentosus CPC2(CICC 6294)和Lactobacillus kefiranofaciens CC3(CICC 6287),为乳酸菌在果蔬发酵中的应用奠定了菌种基础。     

传统乳制品中乳酸菌的分离及性能研究

从内蒙古地区采集的16个传统发酵乳制品中共分离到27株乳酸菌,其中干酪乳杆菌假植物亚种4株,干酪乳杆菌1株,戊糖乳杆菌1株,阿拉伯糖乳杆菌1株,粪肠球菌1株,屎肠球菌2株,乳酸乳球菌乳酸亚种12株,格氏乳球菌2株,野生链球菌3株。分离菌株发酵10%(W/V)脱脂乳的滴定酸度平均为52.3°T,乳杆菌中IML15-1滴定酸度和黏度分别为101.8°T和1307.5mPa·s;乳酸球菌中IMS8-2的黏度达到1567.5mPa·s。     

布里亚特顿金斯克区发酵乳制品中乳酸菌分离鉴定

通过传统纯培养方法对采集自俄罗斯布里亚特共和国顿金斯克区的奶酪,酸牛奶,乳清,发酵乳饮料等8份发酵乳制品进行乳酸菌的分离纯化.经16S rDNA序列分析将50株乳酸菌鉴定为Lactococcus(20株)、Lactobacillus(12株)、Enterococcus(8株)、Pediococcus(5株)、Leuco...     

西藏地区牦牛发酵乳制品中乳酸菌的分离与鉴定

实验分析西藏牧民家庭制作的牦牛发酵乳制品中酸奶和奶渣的微生物数量,通过菌种选择分离,采用传统分类与16S rRNA基因序列测定的方法对分离的乳酸菌进行了鉴定。结果表明:3份发酵牦牛乳样品中乳酸菌数为1.04×104～2.10×106CFU/ml,酵母菌数为8.20×103～6.70×105CFU/ml;2份奶渣样品中乳酸菌和酵母菌为0.2×10～1.0×10CFU/g;共分离15株乳酸杆菌、4株乳酸球菌和3株酵母;乳酸菌中10株为Lactobacillus paracasei、1株Lactobacillu fermentum、2株Lactobacillus reuteri、1株Lactobacillus brevis、1株Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus、2株Pediococcus acidilactici、另有2株分别为1株Pediococcu和1株Lactococcus菌株,未鉴定到种;L.paracasei为牦牛发酵乳制品中乳酸菌的优势种(占总分离株的55.6%)。     

新疆哈萨克族传统发酵驼乳中乳酸菌的分离鉴定

分别从新疆玛纳斯、乌兰巴依、南山、水西沟采集的4份酸驼乳中,分离得到乳酸菌22株。采用传统形态学、生理生化特性方法对乳酸菌进行鉴定,鉴定结果为Lactobacillus16株(72.72%),Lactococcus 3株(13.63%),Enterococcus 2株(9.10%),Streptococcus 1株(4.55%),优势杆菌为Lactobacillus helveticus(18.18%),优势球菌为Lactococcus lactis subsp.lactis(13.63%)。利用16S rDNA序列同源性分析和系统发育树分析对MLS1进行了分子鉴定,鉴定结果为菌株MLS1与Lactobacillus rhamnosus的同源性达到98.1%,与传统生理生化鉴定结果一致,表明了16S rDNA序列分析应用在乳酸菌鉴定上的准确性。     

盐干带鱼中乳酸菌的分离鉴定及其生物学特性研究

研究了盐干带鱼加工过程中微生物的消长规律,并对产品中乳酸菌进行了分离鉴定和生物学特性研究。研究结果表明,盐干带鱼加工过程中细菌总数、酵母、乳酸菌、葡萄球菌和微球菌均呈现逐步增加趋势,其中乳酸菌为优势菌群。从产品中分离得到G+、H2O2-乳酸菌疑似菌株19株,经生理生化鉴定初步确定为食品乳酸菌（6株）、短乳杆菌（5株）和戊糖乳杆菌（2株）,其它未能鉴定种属。食品乳杆菌、戊糖乳杆菌和短乳杆菌均表现出良好的生长性能和耐盐性,未检测到其脂肪酶活性,且仅戊糖乳杆菌表现出弱蛋白酶活性。      

黄酒发酵过程中乳酸菌的分离、鉴定及生物学特性研究

为研究乳酸菌在黄酒发酵过程中的作用,从黄酒不同发酵时期的发酵醪液中分离得到三株乳酸菌,并对其进行鉴定和生物学特性研究。结果表明,MJ0301为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),FH0201和HJ112为希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)。在产乳酸方面,MJ0301产乳酸能力最强,速度最快;HJ112次之,FH0201最弱。在耐酸性方面,三株菌在pH2.0的高酸性环境下均不能生存;在pH2.5的酸性环境下,三株菌虽然能够生存,但活菌数的数量级仅在104CFU/mL;在pH大于3.0的环境下,三株菌生长良好。在耐盐性方面,MJ0301在8%(w/v)的NaCl中依然表现出较强的耐受性,FH0201和HJ112在7%(w/v)的NaCl中虽然活菌数有所下降,但数量级依然在107CFU/mL。三株菌具有的良好产乳酸和耐酸能力对黄酒的顺利发酵起着重要的作用,而良好的耐盐性能为研究其潜在的益生功能奠定了一定的基础。      

新疆自然发酵酸马奶中酵母菌的分离鉴定

从自然发酵酸马奶中分离出25株酵母菌,并对酵母菌进行传统形态学、生理生化特性鉴定。鉴定结果为:12株为克鲁维酵母属Kluyveromyces(8株为马克思克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus,4株为乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis)、1株为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、1株为白地霉Galactomyces geotrichum,其他菌株无法推断出。再利用5.8S rDNA序列同源性分析,对25株酵母菌进行分子生物学鉴定,同时对1、2、18、25、27、28号菌株进行系统发育树分析。鉴定结果为:10株单孢酿酒酵母Kazachstania unispora、8株马克思克鲁维酵母K.marxianus、4株乳酸克鲁维酵母K.lactis、1株酿酒酵母S.cerevisiae、1株白地霉G.geotrichum、菌株27疑似新种。     

新疆塔城地区哈萨克族传统奶酪中酵母菌的分离鉴定

为保护新疆哈萨克族传统奶酪中的优良酵母菌株,从新疆塔城牧区不同牧场采集的10份哈萨克族传统奶酪样品中,分离得到44株酵母菌。采用形态学、生理生化特性鉴定、5.8S rDNA序列同源性分析相结合的方法,对分离菌株进行鉴定。共鉴定出5个种,其中34株库德毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）,为优势菌株,6株戴尔有孢圆酵母（Torulaspora delbrueckii）,2株乳酸克鲁维酵母（Kluyve- romyces lactis ）,1株马克思克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus ）,1株发酵毕赤酵母（Pichia fermentans ）。结果表明,哈萨克族传统奶酪制品中所含酵母菌与其他地区的存在差异性,有其独特的酵母菌资源。     

新疆库尔勒市鸡肉源沙门氏菌的分离鉴定及 耐药性分析

目的了解新疆库尔勒市鸡肉沙门氏菌污染状况和沙门氏菌分离株对常用抗菌药物的耐药性。方法参考食品安全国家标准GB 4789.4-2010,利用生化反应与普通PCR方法结合进行沙门氏菌分离鉴定,采用微量肉汤稀释法进行常见抗菌药物敏感试验。结果 180份鸡肉样品共检出沙门氏菌阳性样品27份,分离鉴定到阳性沙门氏菌28株,污染率为15.00%;10种抗生素药物敏感试验表明:沙门氏菌分离菌株对甲氧苄啶的耐药率高达100%,氯霉素为89.30%、磺胺异噁唑为85.70%,四环素为78.60%、氨苄西林为71.40%、阿莫西林为71.40%、链霉素为64.30%、环丙沙星为53.60%,对诺氟沙星和氟苯尼考的耐药率低于50%,分别为32.10%和25.00%。结论新疆库尔勒市鸡肉中沙门氏菌存在一定程度的污染,耐药状况比较严重。     

萘降解菌的分离、鉴定及降解特性的研究

该研究对乌梁素海水中高效萘降解菌进行筛选并分析了降解特性。筛选出8株以萘为唯一碳源和能源的萘降解菌,对其进行了形态观察、生理生化试验和16S rRNA基因序列分析。结果表明,这8株菌分别属于细杆菌属（Microbacterium）、短波单胞菌属（Brevundimonas）、红球菌属（Rhodococcus）、迪茨氏菌属（Dietzia）和假单胞菌属（Pseudomonas）。其中,菌株S2、S8、C4和C8在培养10 d内可降解88%、64%、65%和76%的质量浓度为3.5 g/L的萘。当以硝态氮为唯一氮源时,可不同程度地增加萘的降解率,微量元素和混合维生素对萘降解菌的生长及萘降解有一定的促进作用,在最适pH条件下萘降解效果较好。     

新疆阿勒泰地区酸奶疙瘩中乳酸菌的分离和鉴定

从新疆阿勒泰地区牧民制作的传统酸奶疙瘩中分离、筛选出菌株SA,通过过氧化氢酶试验阴性初步确定其为乳酸菌,对菌株SA进行菌落和细胞形态、生理生化特征及16S rDNA基因序列分析及系统进化树分析。结果表明,分离菌株SA与Weissella cibaria KACC 11862 AEKT01000037聚为一类,其同源性为99%,故将其鉴定为食窦魏斯氏菌（Weissella cibaria）。其最佳生长条件为40 ℃、pH 6.0,并且能够耐受3%的NaCl。     

海洋氨肽酶菌株的筛选鉴定及其酶学特性研究

从大连渤海海域海泥海水样品中分离出一株高产海洋氨肽酶(aminopeptidase)菌株YZ1-2,对其进行形态学、生理生化、分子生物学(16S rDNA)鉴定,确定该菌株为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。并对其产海洋氨肽酶进行酶学特性研究,结果表明,最适作用温度为30 ℃;最适作用pH值为8.5;Co2+、Zn2+等能较强地激活氨肽酶的活性,Ni2+、Ca2+等对酶的抑制性较强;乙二胺四乙酸(EDTA)可以有效地抑制氨肽酶活性。     

产苯乳酸乳酸菌的筛选鉴定

利用厌氧培养法,从猪的盲肠、小肠、大肠和粪便中筛选得到24株乳酸菌,液相色谱法测定产苯乳酸,有7株乳酸菌的苯乳酸产量在80～110mg/L之间,有4株的产量超过119mg/L,其中分离自猪粪便的菌株r16的苯乳酸产量最高,达到233.0mg/L。经16SrDNA系统发育分析,结合菌落形态、细胞形态、生化反应实验,最终确定菌株r16和m15为植物乳杆菌,而菌株m343和m462为粪肠球菌。      

自然发酵蔬菜制品中降解亚硝酸盐乳酸菌的分离与鉴定

以自然发酵蔬菜为原料,采用平板计数和钙溶圈法分离纯化菌株,并分析菌株的亚硝酸盐降解能力。结果表明,钙溶圈法分离的产酸能力较强的9株细菌,经生理生化鉴定均为乳酸菌。乳酸菌在MRS培养基中都具有亚硝酸盐分解能力,其中H12、L7和X1三株乳酸菌亚硝酸盐降解率高于89%,且降解速度较快,其中X1降解亚硝酸活性最强。乳酸菌X1还表现良好的产酸能力和耐盐性,经16S rDNA鉴定为植物乳杆菌(Lactobcillus plantarum)。     

新疆酿酒葡萄表皮乳酸菌的分离鉴定及耐受性分析

以新疆酿酒葡萄表皮为原料,经分离、鉴定和耐受性分析,筛选适合新疆葡萄发酵的乳酸菌。结果表明,使用MRS培养基从新疆酿酒葡萄表皮中共分离纯化出37株乳酸菌,主要分为4类。通过形态观察及16S rDNA基因序列分析,其中菌株axb81、axb80、axb79均被鉴定为柠檬明串珠菌（Leuconostoc citreum）,菌株axb74被鉴定为乳酸乳球菌乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp. lactis）。菌株axb74和axb79的pH、乙醇、SO2、盐的耐受性分析结果表明,菌株axb74最高耐受12%乙醇、pH 3.5、80 mg/L SO2、8%氯化钠,菌株axb79最高耐受11%乙醇、pH 3.0、80 mg/L SO2、9%氯化钠。     

自然发酵酸豆角中优势乳酸菌的分离鉴定和生长特性研究

在自然发酵的酸豆角中筛选优势乳酸菌,并对其生长特性进行研究.在自然发酵酸豆角中筛选得到一株明串珠菌.该菌株在温度为20℃～45℃,氯化钠浓度为0%～7%,蔗糖浓度为0%～5%情况下生长良好;其代谢产物具有明显的抑菌作用.