Urinary exosomes and proteomics

A number of highly abundant proteins in urine have been identified through proteomics approaches, and some have been considered as disease-biomarker candidates. These molecules might be clinically useful in diagnosis of various diseases. However, none has proven to be specifically indicative of perturbations of cellular processes in cells associated with urogenital diseases. Exosomes could be released into urine which flows through the kidney, ureter, bladder and urethra, with a process of filtration and reabsorption. Urinary exosomes have been recently suggested as alternative materials that offer new opportunities to identify useful biomarkers, because these exosomes secreted from epithelial cells lining the urinary track might reflect the cellular processes associated with the pathogenesis of diseases in their donor cells. Proteomic analysis of such urinary exosomes assists the search of urinary biomarkers reflecting pathogenesis of various diseases and also helps understanding the function of urinary exosomes in urinary systems. Thus, it has been recently suggested that urinary exosomes are one of the most valuable targets for biomarker development and to understand pathophysiology of relevant diseases.     

尿沉渣自动检测系统设计

尿沉渣成分分析是泌尿系统疾病诊断的主要方法之一.提出了一种沉渣自动检测系统,可以实现自动加样、清洗及染色,并且通过由显微镜、摄像头和图像采集卡组成的摄像系统显示红细胞、白细胞、上皮细胞、管型和细菌等有形成分组成的尿沉渣图像,从而实现尿沉渣有形成分的人工或自动计数.检测自动化水平的提高,使检测更加标准化,结果准确,操作方便、快捷.这里介绍了系统的工作原理、单片机控制电路和软件及单片机和微机之间的通讯协议.     

人体尿液中兴奋剂美散痛代谢物的GC／MS分析研究

本文用GC/MS方法,对人尿中美散痛代谢物进行研究,鉴定了美散痛的几个主要代谢物和它们的代谢模式。     

尿中度冷丁及其代谢产物的GC／MS分析研究

本文应用ＧＣ／ＭＳ（ＥＩ、ＰＣＩ）方法，对人尿中度冷丁的代谢产物进行研究。鉴定了度冷丁的４种代谢物，并讨论其代谢模式。     

LC-ESI/MSn法鉴定大鼠尿中泮托拉唑代谢物

泮托拉唑(Pantoprazole)是国内外临床应用较广的安全、高效的抗消化道溃疡药物.临床数据表明,其口服吸收快,但不规则,吸收入血后与血浆蛋白的结合率为97%左右,个体差异显著,与体内的羟基化酶CYP450 2C19的遗传多态性有关[1,2].虽然有其体外代谢研究的报相关道[3],但很少有其在体内代谢研究的文献报道.本工作旨在应用高灵敏度、高选择性的高效液相色谱-离子阱质谱联用技术鉴定大鼠尿中的代谢物,为深入了解泮托拉唑在哺乳动物体内的代谢途径和苯并咪唑类新药的设计具有指导意义.     

尿胰蛋白酶原激活肽测定对急性重症胰腺炎诊断价值

目的探讨尿胰蛋白酶原激活肽测定对急性重症胰腺炎的诊断价值。方法选择51例急性胰腺炎患者,按Atlanta标准分为轻型（MAP）28例,重型（SAP）23例,比较轻型和重型患者发病后、24h、48h、72h血CRP、ESR、血淀粉酶和尿TAP水平,并以尿TAP诊断试验与同期APACHEⅡ评分系统比较,确定尿TAP对SAP诊断的灵敏度、特异性、准确率,并观察TAP与SAP合并症的关系。结果SAP患者尿TAP水平在入院时、24h、48h均高于MAP组（P〈0.05）,TAP测定结果法与APACHⅡ系统法对急性胰腺炎轻、重型的评估,差异无统计学意义（P〉0.05）,小于、大于临界值35 nmol/L时,尿TAP预测SAP的敏感性、特异性和准确性分别为86.9%、67.8%、76.5%和78.3%、75.0%、80.4%。有无腹水及是否合并MODS,TAP的检测结果差异有统计学意义（P〈0.05）。结论尿TAP水平与急性胰腺炎患者病情的严重程度有关,在发病24h内对早期SAP具有一定预测价值,与APACHEⅡ评分系统效果相当。     

人尿液蛋白质N-糖肽富集和质谱鉴定的新方法研究

蛋白质的N-糖基化修饰参与了许多重要的生理过程,是研究多种重大疾病诊断标志物的热点。与其他体液活检样本相比,尿液可以无创、大量获取,并且不受稳态调节的影响,能够在一定程度上反映整个机体的生理和病理状态。因此,人尿液蛋白质N-糖基化的规模化研究对疾病诊断标记物的筛选和治疗靶点的发现均具有重大意义。由于人尿液中的N-糖蛋白含量有限,修饰比例较低,在质谱分析时N-糖肽易被高丰度的非糖肽所掩盖,难以鉴定。因此,发展高效、高选择性的富集材料是实现尿蛋白N-糖基化深度覆盖的必要前提。本研究利用巯基-烯点击化学反应,使用［3-(甲基丙烯酰氨基)丙基］二甲基(3-硫代丙基)氢氧化铵内盐（SPP）制备了两性离子修饰亲水硅胶材料（SPP-SiO₂）。该材料成功地应用于标准糖蛋白和健康人尿蛋白N-糖肽的富集和质谱检测,共鉴定了包含1 065个位点的633个尿液糖蛋白,比文献报道的鉴定规模提高了12.2%,证明了该亲水材料在尿液糖蛋白质组研究中的应用潜力。