辽宁烟草丛枝病研究初报

在辽宁西丰烟草上发现一种丛枝病,病株严重矮化,侧枝丛生,叶片变小,病株不能开花,即便开花,花瓣也变成叶片状。嫁接可传播。烟蚜和大青叶蝉不能传播。取田间病株韧皮部组织和花瓣制超薄切片,电镜下均观察到各种形态的类菌原体,健株中未见到类似物质,室内嫁接显症的烟草病株韧皮部组织内,也观察到相似的类菌原体。初步认为,这种病害是烟草丛枝类菌原体病。     

烟青虫和棉铃虫在烟草上的生态位及其种间竞争

通过2000~2001两年的田间调查和室内饲养,测定了烟青虫和棉铃虫在烟草上的生态位和种间竞争系数。结果表明:棉铃虫在烟草上的时间生态位宽度、生态位重叠均大于烟青虫,两者的时间生态位相似性比例为0.7342;两种害虫的空间生态位宽度、生态位重叠很相近,生态位相似性比例高达0.8559。烟青虫的竞争系数为0.3122,棉铃虫的竞争系数为1.8320,说明棉铃虫的竞争力大于烟青虫。在烟株同一部位两种害种共存率最高仅有9.30%。      

无花果内生菌WHG1及其胞外蛋白的分离鉴定和抗菌作用的研究

对无花果内生菌WHG1及其胞外蛋白进行分离鉴定,并探讨其抗菌作用。通过形态和生理生化特性及16sRNA序列分析方法鉴定菌株。采用滤纸片和牛津杯法抑菌实验研究其抗菌作用。用80%硫酸铵盐析,Sephadex G-100凝胶层析,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱分离纯化内生菌的胞外抗菌蛋白,通过SDS-PAGE电泳测定其分子质量。WHG1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),它对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、酵母菌、黑曲霉等5种食源性致病菌和食品中常见污染菌均有较强的拮抗作用。WHG1胞外蛋白对大肠埃希氏菌和黑曲霉有较强的抗菌作用,该抗菌蛋白分子质量25～53ku。无花果内生菌WHG1具有产胞外抗菌蛋白的特性。     

烟草废水中红色酵母菌的分离鉴定及其胞内色素和油脂的初步研究

该研究采用马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基从烟草废水中分离红色酵母菌,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并初步探讨其发酵马铃薯葡萄糖水（PDW）产油脂和色素的潜力。结果表明,从烟草废水中分离到一株红色酵母菌YH0902,并鉴定其为一株近玫色锁掷孢酵母（Sporidiobolus pararoseus）。菌株YH0902在马铃薯葡萄糖水（PDW）中培养时,细胞内可积累类胡萝卜素和油脂,30 ℃、150 r/min条件下培养4 d,菌体湿质量为（48.53±0.36） g/L,干质量为（10.63±0.15） g/L,胞内色素产量为（4.33±0.19） mg/L,油脂产量为（3.30±0.17） g/L。因此,菌株YH0902在微生物源天然色素及油脂开发领域具有一定的应用前景。     

肠膜明串珠菌HDE1的分离鉴定及其胞外多糖抗氧化和牛奶凝结特性研究

为了拓展产乳酸菌胞外多糖的来源,获得来源明确、产量稳定、具有优良生物学特性的乳酸菌胞外多糖。本研究从自制橘子发酵液中利用产黏菌落法分离筛选得到一株高产胞外多糖的乳酸菌,综合形态学观察及16S rDNA序列分析结果、API 50 CHL试验,对其进行鉴定,利用抗氧化及牛奶凝结试验研究了该乳酸菌胞外多糖的抗氧化及牛奶凝结等特性。结果表明,本研究获得了一株肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）,该菌株16S rDNA序列片段长度为1444 bp,GenBank登录号为OM302141。菌株HDE1胞外多糖的总糖、蛋白质、糖醛酸含量分别为41.73%±1.74%、0.29%±0.03%和7.69%±0.42%。该胞外多糖在浓度为3 mg/mL时展现出良好的抗氧化活性,当胞外多糖浓度为5 mg/mL时DPPH自由基清除能力达到50.00%±0.05%,ABTS+自由基清除能力达到40.00%±0.02%,H₂O₂-自由基清除能力超过了50%,羟基自由基清除能力达到49.96%±0.03%,胞外多糖的总还原力为38.82%±0.09%。牛奶凝结研究结果表明,HDE1在36 h能够使添加3%（w/v）蔗糖的脱脂牛奶完全凝结。这些结果表明菌株HDE1胞外多糖具有良好的抗氧化和牛奶凝结特性,在食品、医药及益生领域展现出良好应用潜力。     

椰酵假单胞菌与唐菖蒲伯克霍尔德菌16S～23S rRNA基因间区序列的比较研究

目的研究比较我国分离的椰酵假单胞菌与唐菖蒲伯克霍尔德菌不同致病型菌株的16S～23SrRNA基因间区序列,分析不同菌株基因水平的差别,并阐述其系统发育关系。方法设计2对伯克霍尔德菌属特异引物,扩增16S～23SrRNA基因间区序列。应用分子生物学软件,对3株分别代表唐菖蒲伯克霍尔德菌3种不同致病型的国际参考菌株（ATCC10248、NCPPB947、NCPPB3580）、1株伯克霍尔德菌属B．phenazinium种代表株（LMG2247）及8株从我国不同地域、不同食物样品中分离的椰酵假单胞菌（HN2y、Co14、Co8、Co36、Sx8801、90—3、56（2）、56（2））的16S～23SrRNA基因序列进行测定,并与核酸数据库（GenBank）中相关菌株序列进行比较分析。结果通过不同菌株16S～23SrRNA间区序列的分析比较,发现分离的椰酵假单胞菌米酵菌酸产毒株存在2个序列高可变区及特异基因序列,阐述了我国椰酵假单胞菌与唐菖蒲伯克霍尔德菌的系统发育关系,将DNA测序结果在核酸数据库中注册,并绘制了系统发育进化树。结论该研究结果为进一步鉴定椰酵假单胞菌米酵菌酸产毒株,从分子水平探讨其产毒机制及系统发育关系提供了新的、可靠的理论依据和技术支撑。     

保加利亚乳杆菌胞外多糖合成条件的优化及其在发酵乳中的应用研究

研究了不同碳源、氮源、碳氮比及发酵条件等因素对保加利亚乳杆菌Y5菌株产胞外多糖的影响。结果表明,以果糖为碳源时,胞外多糖的产量是55．46mg／L。显著高于用半乳糖作为碳源时的产量（29．59mg／L）;以鱼蛋白胨作为氮源为时,胞外多糖产量可达到46．89mg／L,明显高于用胰蛋白胨作为氮源时的产量（P〈0．01）;当碳氮比为2：1时,Y5菌株产生的胞外多糖最多,可这50．10g／L,显著高于碳氮比为1：2时的产量（P〈0．01）。培养温度为40℃,发酵时间为16h,初始pH值为6．0,葡萄糖添加量为2％的发酵条件是Y-5菌株产胞外多糖的最佳工艺条件,其胞外多糖水平可达105．36g／L。与采用ST和LB菌株的发酵乳相比,应用Y5菌株生产的发酵乳,其乳清析出量仅为7mL（P〈0．01）：冷藏30d后,Y5菌株制备的发酵乳仍能维持10^7mL^-1以上的活菌数,明显高于对照菌株的存活数量（P〈0．01）。