干酪乳杆菌鼠李糖亚种冻干保护剂的研究

以存活率为指标,对干酪乳杆菌鼠李糖亚种(Lactobacillus casei subsp.rhamnosus 719)的菌体进行冻干保护研究,通过优化冻干保护剂,以降低冻干过程中的细胞损伤.结果表明,7种保护剂中,保护效果由大到小依次为海藻糖、脱脂奶粉、蔗糖、甘油、可溶性淀粉、硫酸锰、抗坏血酸;复配则以质量分数10%海藻糖+10%脱脂奶粉的组合为最佳,其菌体存活率达100%,冻干菌粉活菌数达1011 g-1.     

罗伊氏乳杆菌冻干保护剂的优选及高密度冻干工艺优化

为提高罗伊氏乳杆菌的冻干存活率及产业化制备效率,系统解析不同种类保护剂对该菌的保护效果并优化高密度冻干工艺降低冻干体积。首先将不同分子量、不同种类的单糖(醇)、二糖(醇)、低聚糖、多糖和蛋白质分别与罗伊氏乳杆菌的菌泥混合冻干测定存活率,然后研究不同分子质量的保护剂复配,及优势保护剂复配其他类物质对菌体的冻干保护效果,最后优化冻干前菌体与保护剂的比例和菌悬液总干物质含量。结果表明,低聚糖对罗伊氏乳杆菌具有最好的冻干保护效果,分子质量大小不同的物质以不同比例复配均不会提高保护效果,谷胱甘肽、甜菜碱、氨基酸、核苷酸、无机盐、维生素等物质均未显著提高低聚糖对该菌的冻干保护效果。菌泥与低聚糖类保护剂以干重比为1∶1. 2混合时,具有最高的冻干存活率,冻干前菌悬液总干物质质量分数最高为29%时菌体存活率达90%以上。该研究结果为乳杆菌的高效冻干提供了指导。     

基于人工神经网络耦联遗传算法（BP-GA）优化干酪乳杆菌LTL1361冻干保护剂配方

为提高干酪乳杆菌LTL1361在真空冷冻干燥过程中的冻干存活率,以脱脂乳为基础保护剂,通过单因素实验以及Plackett-Burman试验确定影响干酪乳杆菌LTL1361冻干存活率的主要因素,基于上述试验结果进行Box-Behnke响应面试验设计构建数据集,并构建人工网络耦联遗传算法（BP-GA）模型对干酪乳杆菌LTL1361的冻干保护剂配方进行深层模拟预测。结果表明:采用单因素及Plackett-Burman试验筛选出主要影响菌株冻干存活率的三个因素为:海藻糖、谷氨酸及甘露醇,并确定将上述三种因素与基础脱脂乳为优化条件开展后续试验。通过构建BP-GA模型进行全局寻优,得到干酪乳杆菌LTL1361的最佳保护剂浓度配比为脱脂乳10.3%、谷氨酸0.8%、海藻糖6.7%和甘露醇4.0%,此时菌株的最高冻干存活率达到89.56%,经过与响应面模型结果比较,发现BP-GA模型具有更好的预测性能。利用BP-GA模型,本研究探索出了一种较高冻干存活率的益生菌冻干保护剂配方,并对制备高活性菌株冻干制剂以及商业化直投式发酵剂研发提供参考。     

鼠李糖乳杆菌冻干保护剂的研究

以菌种冻干后存活率为指标,研究糖类、蛋白质类、多元醇类对鼠李糖乳杆菌的冻干保护作用。实验结果表明,在脱脂乳、甘油、海藻糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖、糊精、抗坏血酸、谷氨酸钠、麦芽糖10种物质中保护效果较好的物质分别为脱脂乳、海藻糖、甘油。将它们确定为单因素进行响应面分析,响应面优化结果为:脱脂乳11.12%、海藻糖4.87、甘油2.96%。菌种冻干后的细胞成活率能达到96.48%±1.27%,与理论预测值接近。     

响应面法对干酪乳杆菌冻干保护剂的优化

采用响应面方法,以存活率为指标优化了干酪乳杆菌冻干保护剂的配方。Plackett-Burman实验表明,脱脂乳、乳糖和谷氨酸钠对存活率具有显著的影响,通过中心复合实验进一步优化保护剂的比例,当脱脂乳、乳糖和谷氨酸钠的质量浓度分别为15.8 g/100 mL,5.73 g/100 mL和0.42 g/100 mL时细胞存活率为92.4%,明显高于不添加保护剂时细胞的存活率(5.25%)。     

干酪乳杆菌菌体表面物质对冻干存活率的影响

为解析干酪乳杆菌的表面物质在冻干过程中的作用,首先优化菌株表面物质的剥离条件,并测定菌株在被剥离表面物质后添加不同保护剂的冻干存活率及表面物质总量与成分,最后测定菌株分别在不同碳氮比、不同碳源条件下培养产生的表面物质含量,探究其与菌体冻干存活的关系。结果表明:干酪乳杆菌17005、173011CQQJ3与PS5-4的菌体表面物质分别在90 W/6 min、90 W/12 min、90 W/12 min条件下被有效剥离,且表面物质中蛋白含量约是多糖的3倍;以海藻糖或水苏糖为保护剂,被剥离表面物质后菌体的冻干存活率提高,菊粉反之;菌株以阿拉伯糖为碳源,较葡萄糖产生更少的表面物质;低碳氮比发酵下也可有效降低菌体表面物质,低含量的表面物质可提高对数期菌体在水苏糖或海藻糖作为保护剂时的冻干存活率。该研究为提高干酪乳杆菌的冻干存活率和单位质量菌粉的活菌数提供了指导。     

保加利亚乳杆菌冻干保护剂的研究

采用正交试验研究了保加利亚乳杆菌在冷冻干燥条件下的最佳保护剂的筛选。结果表明：在所选的冷冻干燥保护剂中,VC影响极显著,脱脂乳和谷氨酸钠影响显著,明胶影响不显著;筛选出最佳复合保护刑组成为脱脂乳10％、VC0．5％、谷氨酸钠0．5％、明胶1．5％。     

保加利亚乳杆菌冻干保护剂保护作用的研究

冷冻干燥前在菌液中加入保护剂,可提高乳酸菌的冻干存活率.研究比较多种保护剂的保护作用,其中海藻糖的保护效果最好;在扫描电镜下放大不同倍数观察了冻干后的保加利亚乳杆菌,并对海藻糖的保护机理进行了探讨.     

青春双歧杆菌冻干保护剂筛选及高密度冻干工艺优化

为了探究青春双歧杆菌最适冻干保护剂配方,提高工业化生产效率,作者对不同糖与蛋白质类保护剂对双歧杆菌冻干保护特性、不同结构的糖类保护剂复配及其与蛋白质复配的保护效果进行研究,同时测定复合保护剂添加其他小分子物质对冻干存活率的影响,最后优化冻干前菌泥干物质与冻干保护剂的比例,以实现高密度冻干。研究结果表明,糖（醇）类保护剂对青春双歧杆菌的保护效果普遍高于蛋白类冻干保护剂,且四糖以下小分子糖的冻干保护效果较好,其中山梨糖醇和棉籽糖效果最优,二者复配（质量比1∶1）后冻干存活率提高到56%左右;将其与蛋白质、抗坏血酸、谷胱甘肽、微量元素等小分子复配,不会提高对菌体的冻干保护效果;考虑到实际应用,将山梨糖醇、棉籽糖与乳清蛋白以质量比3∶3∶2复配以提高菌粉的疏松度;菌泥与保护剂以干物质质量比1∶1.2混合,样品干物质总质量分数为25%时,青春双歧杆菌的冻干存活率达到（77.08±5.20）%。     

乳双歧杆菌冻干保护剂的研究及质量评价

为探究冻干保护剂对乳双歧杆菌存活率的影响,对乳双歧杆菌的冻干保护剂进行筛选及研究。结果显示,乳双歧杆菌冻干保护剂最佳配方为菊粉2%、脱脂乳粉6%、半胱氨酸盐酸盐0.6%、海藻糖9%,此条件下存活率达到83.8%。在70℃处理30 min,存活率达62%。在-20, 4, 20和37℃贮存60 d后,活菌数仍达109 CFU/m L以上。通过添加合适的冻干保护剂,能大幅改善冷冻干燥的效果,从而提高其存活率和稳定性。     

干酪乳杆菌LC2W胞外多糖的提取

研究了干酪乳杆菌LC2W胞外多糖的提取工艺,确定提取条件为：沸水浴10min灭酶活,离心除去凝结蛋白和菌体;终质量浓度为40g/L的三氯乙酸除蛋白质;上清液超滤（滤膜MWCO为10ku,压力250kPa,温度25℃）浓缩4倍;终体积分数为75％的乙醇沉淀多糖;热水溶解多糖,透析、冷冻干燥得粗多糖。粗多糖的得率为153．4mg／L。     

Effects of Lactobacillus Casei YBJ02 on Lipid Metabolism in Hyperlipidemic Mice

Traditionally fermented yak yogurt as a Tibetan dairy product is high not only in nutrients but also in probiotics. A probiotic strain with a potential lipid reducing effect was isolated from yak yogurt. An animal model for hyperlipidemia was evaluated using the blood index and expression levels of lipid metabolism‐related proteins in mice to determine the effect of Lactobacillus casei YBJ02 (LC‐YBJ02) on lipid metabolism in hyperlipidemic mice and the underlying mechanism. LC‐YBJ02 at different concentrations exhibited certain inhibitory effects on the increase in blood lipid in mice. Particularly, high concentrations of LC‐YBJ02 can reduce the cholesterol, triglycerides, and low‐density lipoprotein content; however, no significant effect on the high‐density lipoprotein of the body has been reported. LC‐YBJ02 can effectively increase the reduction in cholesterol level by fecal excretion. In this study, the gene‐affecting mouse obesity was determined using experimental results in mice. The expression levels of peroxisome proliferator‐activated receptor γ (PPARγ), CCAAT enhancer binding protein alpha (CEBP)/α, sterol regulatory element binding protein (SREBP)‐1c, and FAS could improve because of the high‐fat diet in kidney fat. Bacteria at different concentrations could also decrease these expression levels. Specifically, the high concentration of LC‐YBJ02 could suppress the expression of PPARγ, CEBP/α, and SREBP‐1c; however, the expression of FAS was not significantly inhibited. PPARγ and FAS expression levels in the liver were low, but no significant difference was indicated. CEBP/α and SREBP‐1c expression in mouse liver was further detected by Western blot analysis; CEBP/α was considerably low and could not be detected. On the basis of these results, LC‐YBJ02 could be used as probiotics through its lipid reduction effects.     

不同保护剂影响植物乳杆菌冻干菌粉发酵活力的研究

以植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum CGMCC 6016,L. P. dy-1)为分析对象,研究不同冻干保护剂、贮藏温度和贮藏时间对冻干菌粉活菌数及发酵活力的影响。研究分别采用10%和22.4%的纯菊粉、菊粉复合保护剂、脱脂乳复合保护剂制备冻干菌粉。结果显示,在-20℃贮藏8个月,其活菌数均可保持在10~(10)CFU/g以上;4℃贮藏8个月,仅菊粉复合保护剂组活菌数维持在较高水平,为(0.94±0.17)×10~(10)CFU/g;不同保护剂制备的冻干菌粉在-20℃下贮藏6个月或4℃下贮藏4个月,可维持较高的产酸活力,其中,菊粉复合保护剂组的细胞活力下降最为缓慢。流式细胞术(flow cytometry,FCM)与p H值测定法对细胞活力分析结果的关联度较好,R2值为0.77,可快速评价保护剂作用下冻干植物乳杆菌细胞的增殖;FCM分析结果显示,与脱脂乳复合保护剂相比,菊粉保护剂组与直接活化组的细胞增殖活力最为接近。     

干酪乳杆菌胞壁蛋白酶提取条件优化及其水解特性研究

干酪乳杆菌细胞壁蛋白酶是其蛋白水解系统中一个关键的蛋白酶.采用Ca2+-free法研究干酪乳杆菌细胞壁蛋白酶的提取方法,确定其最佳实验条件.菌体用含有30 mmol/L CaCl2的50 mmol/L Tris-HCl (pH 7.0)缓冲液洗涤3次,然后用含有50.03 mmol/LEDTA-Na2的50 mmol/LTris-HCl(pH6.98)缓冲液悬浮,39.75℃保温,60 min后取出离心(4 500 r/min、20 min、4℃),上清液即粗酶液.用粗酶液与纯化后的酶分别水解各种酪蛋白,粗酶较纯化后的酶能产生更高的ACE抑制能力,而纯化后的酶水解β-酪蛋白产生的抗ACE活性能力最强.     

Screening of Useful Lactic Acid Bacteria and Function of Lactobacillus Casei Strain Shirota

Lactobacillus casei strain Shirota (LcS) was found and isolated by Dr. Minoru Shirota in 1930. It has been already passed 70 years since LcS was firstly used in maintenance of healthy. Today, "yakult " has been consumed 25million bottles per day all over the world in 26 countries and regions and has been useful in human health. The ideas of Dr. Minoru Shirota, founder of yakult (Shirota-ism) are still valuable today, though social environment has been changed. These consist of three ; (1)…     

产共轭亚油酸干酪乳杆菌的诱变选育

共轭亚油酸(CLA)是世界公认的具有抗癌、减肥和抗动脉硬化作用的脂肪酸.以共轭亚油酸的生成菌株干酪乳杆菌为出发菌株,经紫外诱变处理,筛选出一株高产共轭亚油酸的菌株,并优化其培养条件,在亚油酸添加量0.05%,乳糖添加量2%,接种量4%,初始pH6.5,37℃发酵36 h时,共轭亚油酸生物合成量可达394.1μg/mL.     

琼脂—聚内烯酰胺凝胶固定化干酪乳杆菌生产乳酸

将干酪乳杆菌(Lactobacillus Ceasei)细胞固定有琼脂——聚丙烯酰胺凝胶内,用于生产乳酸。研究了底物浓度,酵母膏浓度,培养温度等因素对固定化细胞生产乳酸的影响。对置换发酵过程中固定化细胞的活性及操作稳定性也进行了研究。     

抗冻剂在冷冻鱼糜生产中的应用

研究了不同抗冻剂对冷冻鱼糜性能的影响。实验结果表明,添加抗冻剂低聚糖、蔗糖、山梨醇可以有效地防止鱼糜在冷冻过程中蛋白发生变性,并能提高冷冻鱼糜的凝胶强度,混合磷酸盐能有效的提高冷冻鱼糜的保水性。通过试验得出,4种抗冻剂的优化配比是:低聚糖4%,山梨醇2%,蔗糖1%,混合磷酸盐0.3%,生产的冷冻鱼糜凝胶强度最高可达14 148.1 g/cm2。     

益生菌Lactobacillus casei Zhang与商业益生菌对胃肠转运耐受性及发酵特性的比较

比较益生菌干酪乳杆菌Zhang(L.casei Zhang)与商业化益生菌嗜酸乳杆菌NCFM(NCFM)、鼠李糖乳杆菌GG(LGG)、干酪乳杆菌Shirota(kS)、动物双歧杆菌Bb12(Bb12)对人工胃肠液的耐受性及发酵特性.将各菌置于人工消化液及含3.0g/L牛胆盐的MRS培养基中,37℃培养,分别于3h和8h时测定人工胃液和肠液中各菌株的存活率,同时每小时测定MRS培养基的浊度,以延迟时间评价各菌株对胆盐的耐受性.对由各菌株制得的发酵乳在发酵及贮藏期间酸度与活菌数的变化进行了测定,结果表明,在pH 2.5的人工胃液消化3 h后,干酪乳杆菌Zhang存活率低于NCFM(p<0.05),高于其它3株对照菌(p<0.05);在pH 3.0和pH 4.0的人工胃液消化3 h后,干酪乳杆菌Zhang的存活率与4株对照菌无显著差异(p>0.05);在pH 8.0的人工肠液消化8h后,干酪乳杆菌Zhang的存活率高于Bb12(p<0.05),低于NCFM(P<0.05),与其它2株对照菌元差异(p>0.05).干酪乳杆菌Zhang对3.0g/L牛胆盐的耐受性与LcS差异不显著(p>0.05),而高于其它3株对照菌(p<0.05).脱脂乳37℃发酵24 h后,接种干酪乳杆菌Zhang的样品的酸度低于4株对照菌.4℃贮藏28 d内,各益生菌在发酵乳中继续生长,其中干酪乳杆菌Zhang发酵乳的pH值变化(降低0.55)显著高于4株对照菌(p<0.05);贮藏28 d后干酪乳杆菌Zhang活菌数为1.0×109 cfu/g,显著高于4株对照菌(p<0.05),说明干酪乳杆菌Zhang具有良好的胃肠转运耐受性和极佳的贮藏稳定性.