醋蛋液对巨噬细胞RAW264.7免疫调节活性的影响

采用细胞计数试剂盒（CCK）-8法检测不同剂量的醋蛋液对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节活性的影响,倒置显微镜及荧光显微镜下分别观察不同分组条件下对RAW264.7细胞形态的影响及细胞核的损伤程度,探讨醋蛋液对RAW264.7细胞分泌免疫因子的影响及其免疫调节活性的机理。结果表明,当醋蛋液浓度为40 μL/mL时,RAW264.7细胞活性极显著升高为（145.3±23.02）%（P＜0.01）。醋蛋液高剂量组（20 μL/mL）巨噬细胞体积变大并逐渐伸出伪足,与正常细胞有明显差异,但未达到炎症相关形态学特征;醋蛋液高剂量组（20 μL/mL）可以促进巨噬细胞分泌白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和一氧化氮（NO）分泌,可以有效缓解巨噬细胞细胞核损伤、细胞膜电位降低造成的细胞损伤及细胞凋亡;醋蛋液高剂量组（20 μL/mL）可以上调蛋白激酶B（AKT）以及核因子-κB（NF-κB）的表达量,进而激活巨噬细胞,调节机体免疫力。     

金雀异黄素诱导人胃癌细胞凋亡的形态学研究

为研究金雀异黄素对人胃癌细胞凋亡的诱导作用,采用光镜、电镜观察金雀异黄素（Genistein,Gen）抑制人胃癌细胞SGC－7901增殖的形态学改变。结果显示：经Gen 10μg/mL作用48h后,SGC－7901细胞出现典型的凋亡形态。相差显微镜下表现为细胞变圆、体积缩小;荧光显微镜观察凋亡细胞多为核亮染呈致密斑块、碎片状;电镜下可见染色质浓集、核固缩。结果证实：Gen具有诱导人员癌细胞凋亡的作用。     

不同来源Lfcin诱导Jurkat细胞凋亡的对比研究

本文以牛乳铁蛋白素LfcinB和人乳铁蛋白素LfcinH为研究对象,研究其通过降低线粒体膜电位抑制Jurkat细胞增殖效果及两者的差异性。采用MTT法检测LfcinB和LfcinH对Jurkat细胞增殖影响;Hoechst33258染色法荧光显微镜观察Jurkat细胞核的变化;运用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术将LfcinB和LfcinH促进Jurkat细胞凋亡的阶段进行区分;JC-1染色激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位的改变。结果显示:LfcinH和LfcinB对Jurkat细胞有显著的抑制作用(P0.05),呈剂量依赖性;经LfcinB和LfcinH处理后的Jurkat细胞在荧光显微镜下均可见细胞核皱缩、碎裂呈凋亡特征;激光共聚焦显微镜观察到Jurkat细胞线粒体膜电位下降;流式细胞术检测发现Jurkat细胞经LfcinB和LfcinH处理48 h时主要发生早期凋亡。研究结果表明:Jurkat细胞凋亡的机制可能是通过影响线粒体膜电位导致Jurkat细胞凋亡并抑制细胞增殖;当两者浓度小于250μg/mL时LfcinH对Jurkat细胞抑制效果较强,浓度大于250μg/mL时两者对Jurkat细胞抑制效果相近。     

菹草类胡萝卜素诱导Hela细胞凋亡的细胞学观察

本文研究了菹草类胡萝卜素提取物(CEPC)对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响,采用体外培养技术,用可见光显微镜、荧光倒置显微镜、透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察Hela细胞的形态变化。结果表明:分别用浓度为2.5、5、10μg/ml的CEPC处理Hela细胞,在可见光、荧光显微镜、电镜和LSCM下观察细胞形态,分别出现了细胞数量明显减少、皱缩变形、体积缩小、触角伸长,显示亮黄色荧光的细胞核呈现“新月状”、条状甚至碎片状,细胞膜表面绒毛减少,胞浆内空泡明显增多,细胞核染色体发生固缩,细胞中RNA的含量明显增加等典型的凋亡细胞形态特征。实验结果表明CEPC对Hela细胞的增殖具有明显的抑制作用并能有效地诱导Hela细胞凋亡。     

菹草类胡萝卜素提取物诱导人肝癌细胞QGY-7703凋亡的细胞学观察

采食菹草的蛋鸭所产红心蛋蛋黄的类胡萝卜素提取物具有良好的抑制S180肿瘤的作用，为阐明其抗肿瘤作用机制，研究了菹草类胡萝卜素提取物(CEPC)对人肝癌细胞QGY-7703细胞增殖和凋亡的影响，本文报道采用体外培养、细胞增殖实验，然后以可见光、荧光、激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察肝癌细胞的形态变化。结果表明：分别用含10、20和40μmol／L的CEPC的培养介质处理QGY-7703细胞24、48和72h，在可见光、荧光显微镜、LSCM下观察细胞形态，分别出现了肝癌细胞数量明显减少、皱缩变形、体积缩小、触角伸长、细胞表面凸起多个小泡，显示亮黄色荧光的细胞核呈现“新月状”、条状甚至碎片状形状，细胞核中呈黄色的DNA面积较明显减小等典型的凋亡细胞形态特征。用荧光显微镜观察计数凋亡细胞的方法测定了CEPC对QGY-7703细胞凋亡指数影响，细胞凋亡指数随CEPC剂量的增加及处理时间的延长而上升。因此CEPC对QGY-7703细胞的增殖具有明显的抑制作用，在较短的时间内及使用较小的CEPC剂量能有效地诱导QGY-7703细胞凋亡。本项研究说明菹草中的类胡萝卜素化合物具有明显的抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡的功能。     

珠母贝糖胺聚糖PG-Ⅱ诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的:探讨珠母贝糖胺聚糖PG-II诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,从而抑制其增殖。方法:MTT法检测珠母贝糖胺聚糖PG-II对人宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用。倒置显微镜、荧光显微镜观察HeLa细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂片段,流式细胞仪定量检测细胞凋亡的百分率及对其细胞周期的影响。结果:MTT法显示PG-II可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖。倒置显微镜和荧光显微镜形态学观察可见HeLa细胞凋亡的形态明显变化。琼脂糖凝胶电泳显示PG-II作用HeLa细胞24h,出现分子质量为200bp到2000bp不等的细胞凋亡的特征性DNA梯状条带。流式细胞术测试表明:PG-II可使HeLa细胞阻滞于G1期,剂量为100mg/L作用24h阻滞作用最明显,凋亡指数为42.6%。结论:珠母贝糖胺聚糖PG-II可能通过诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡而抑制其增殖。     

莲房原花青素通过线粒体介导的内源性Caspase途径诱导HepG2细胞凋亡

研究莲房原花青素(LSPCs)诱导肝癌Hep G2细胞凋亡的机制。利用MTT法检测LSPCs对肝癌Hep G2细胞的生长抑制作用,Hochest 33258染色观察凋亡细胞的核形态,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡水平,彗星实验用来检测细胞DNA损伤,JC-1染色用来检测线粒体膜电位,Western blotting法检测细胞凋亡蛋白水平的表达。LSPCs作用细胞后,显著抑制Hep G2细胞的增殖;细胞凋亡征象明显,核染色体高度凝聚,细胞核碎裂,核固缩,染色质凝聚的细胞数从3.86%增至42.76%(p0.01);活细胞率急剧减少,而凋亡率从5.32%增至67.05%(p0.01);LSPCs诱发细胞产生DNA损伤,线粒体膜电位下降,导致Cytochromec、Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达量增加,Bax蛋白的表达量上调,Bcl-2蛋白的表达量下调,Bax/Bcl-2的比值上升。而凋亡抑制剂Z-VAD能够削弱LSPCs对Hep G2细胞增殖的抑制作用,显著下调细胞核聚缩,抑制线粒体损伤及Caspase相关蛋白的表达量,最终阻断LSPCs的致凋亡作用。由此得出结论,LSPCs可通过线粒体介导的内源性Caspase途径诱导人肝癌细胞凋亡。     

菱灵颗粒有效成分的抗肿瘤作用研究

目的:研究菱灵颗粒有效成分-化合物Ⅰ在体外对Hela细胞的作用及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原法检测化合物Ⅰ对肿瘤生长抑制作用,应用光学显微镜、透射电子显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果:化合物Ⅰ对人宫颈癌细胞生长具有明显的抑制作用及诱导细胞凋亡作用,且这种作用有剂量依赖关系,化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组30h抑瘤率为52.04%、34.44%、23.72%,100、50、25、12.5、6.25、3.125mg/L剂量组30h抑瘤率显著正相关,相关系数r=0.9860(p<0.01),IC50值为10.9mg/L。透射电子显微镜对化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组受试细胞观察,均出现不同程度细胞凋亡现象,细胞核明显皱缩、染色质趋边凝聚、线粒体空化等特征。流式细胞仪检测发现凋亡峰。结论:化合物Ⅰ对Hela细胞增殖抑制作用明显并且有诱导细胞凋亡作用。     

醋酸棉酚抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖

目的:研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响及其可能作用机制.方法:采用MTT法检测GAA对MG-63细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核的形态变化,流式细胞仪分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达情况.结果:GAA对MG-63细胞具有显著的增殖抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;Hoechst 33258荧光染色可观察到明显核固缩、染色质凝集等细胞凋亡现象;流式细胞仪检测发现细胞凋亡相关基因Bcl-2表达下调,而Bax表达则相对上调.结论:GAA能够抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax实现.     

醋酸棉酚抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖

目的研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响及其可能作用机制。方法采用MTT法检测GAA对MG-63细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核的形态变化,流式细胞仪分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达情况。结果 GAA对MG-63细胞具有显著的增殖抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;Hoechst 33258荧光染色可观察到明显核固缩、染色质凝集等细胞凋亡现象;流式细胞仪检测发现细胞凋亡相关基因Bcl-2表达下调,而Bax表达则相对上调。结论 GAA能够抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax实现。     

基于高通量测序与培养方法分析新鲜佛手与老香黄中的细菌多样性

老香黄为植物佛手的腌制品。为了解其加工前后微生物组成及其与老香黄品质之间的联系,采用高通量测序技术分析加工前后的样品中的细菌菌群组成,并结合纯培养和16S rRNA基因测序方法对菌株进行分离鉴定。结果显示,在门水平上,佛手鲜果的优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)、蓝细菌门(Cyanobacteria);老香黄的为变形菌门、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)。属水平上,鲜果的优势菌群为unidentified Cyanobacteria、泛菌属(Pantoea)、肠杆菌属(Enterobacter);老香黄的为Ignatzschineria、漫游球菌属(Vagococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)。采用纯培养方法从鲜果中分离出枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、产气克雷伯氏菌(Klebsiella aerogenes)和粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)等,但未从老香黄中分离出有害细菌。结果显示,佛手经加工制成老香黄后,其中的有益菌双歧杆菌属、乳杆菌属的丰度增加,但其生产和食用的微生物安全需加以重视。     

几种果品的腌制方法

为深入挖掘我国古代传统酱腌菜文化遗产,对佛手、香橼、梨子等腌制方法进行了详细研究,提出了对以上3种果品全新的腌制工艺。佛手经过挑选、清洗后进行盐制、酱制等加工后成熟,成品色泽酱红,形似佛手、酱香浓郁、甜成适口。梨子经过整理洗净后经入缸初腌、起缸压卤、复腌、脱成、压卤、酱渍、翻缸成酱梨子,成品色泽酱红、鲜脆嫩甜,酱香浓郁。香橼切制洗净后用盐水渍,后进行起缸、压卤、装袋酱渍、翻袋成酱香橼,成品色泽酱红、鲜甜适口、有酱香和桔香味,能下气除痰。     

表面活性剂SDS辅助微波提取金佛手总黄酮工艺及抗氧化活性评价

通过单因素试验和正交试验设计,分别研究了表面活性剂十二烷基磺酸钠（sodium dodecyl sulfonate,SDS）质量分数、料液比、微波功率和微波时间对金佛手总黄酮提取量的影响。确定微波提取最佳工艺条件为表面活性剂SDS质量分数0.6%、料液比1∶20（g/mL）、微波功率50 W、微波时间30 s,在此工艺条件下金佛手总黄酮提取量为18.706 0 mg/g。金佛手总黄酮对DPPH自由基和ABTS自由基清除率分别为79.15%和65.25%,其抗氧化活性略低于槲皮素。结果表明,金佛手总黄酮具有显著抗氧化活性,可作为抗氧化剂应用到食品和医药领域。     

基于GC-MS和GC-IMS联用法分析不同采收期广佛手精油挥发性成分

以不同采收期广佛手提取的精油为研究对象，采用气相色谱-质谱（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）和气相色谱离子迁移谱（gas chromatography-ion mobility spectrometry，GC-IMS）技术分析广佛手精油含量和挥发性成分的变化。结果表明，广佛手精油含量在9月达到峰值。GC-MS和GC-IMS技术在5?个采收期广佛手精油中分别鉴定出54?种和61?种挥发性成分，主要为萜烯类，其次为醇类、醛类和酯类等化合物。GC-MS结果表明，醇类、醛类、酯类、烷烃类和酚类物质主要存在于8月、9月样品中，且含量较少。GC-IMS结果表明，醛类、酯类和酸类化合物主要存在于6月、7月和8月样品中。通过热图聚类和主成分分析化学计量法对5?个采收期广佛手精油进行区分。2?种技术的检测结果呈现一定的差异性，GC-MS技术检测出的大部分为大分子（C9～C21）高含量挥发性成分，而GC-IMS检测出的多为小分子（C2～C10）低含量挥发性成分。2?种技术相结合扩大了样品中挥发性组分的检测范围，更加全面直观地反映广佛手精油中挥发性成分的变化情况，为广佛手精油品质鉴别和其最佳采收时间的选取提供科学依据。     

基于GC-MS和GC-O联用法分析佛手精油关键香气成分

研究佛手精油的挥发性物质和关键香气成分。佛手经水蒸气蒸馏法提取精油,利用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)结合气相色谱-嗅闻(gas chromatography-olfactometry,GC-O)技术对挥发性物质和香气成分进行分析。GC-MS-O检测出36种挥发性物质,主要成分为D-柠檬烯(34.69%)、γ-松油烯(20.42%)、β-甜没药烯(4.59%)。采用稀释法和强度法分析发现D-α-蒎烯、D-柠檬烯、β-芳樟醇、别罗勒烯、4-松油醇、α-佛手柑烯具有较大的香气强度;D-α-蒎烯、β-蒎烯、β-罗勒烯、橙花乙酸酯、α-佛手柑烯具有较大风味稀释因子。综合分析认为D-α-蒎烯和α-佛手柑烯是佛手精油的关键特征香味成分。     

Antimicrobial efficacy of citron essential oil on spoilage and pathogenic microorganisms in fruit-based salads

The aim of this study was the evaluation of the effects of pure citral and citron essential oil on microbial spoilage and growth and survival of pathogenic microorganisms during storage. They were added in the syrup of industrial ready-to-eat fruit salads stored at 9 degrees C. Both citral (25 to 125 ppm) and citron essential oil (300, 600, 900 ppm) were able to prolong the microbial shelf life of the fruit-based salads. The essential oil gave excellent results, avoiding the undesirable effects attributable to the cytotoxicity of citral. Citron essential oil doubled the time needed for the wild microflora to reach concentrations able to produce a perceivable spoilage in condition of thermal abuse (9 degrees C). The same essential oil had reduced effects on the survival of Gram-negative species Salmonella Enteritidis and Escherichia coli, but showed a strong inhibition toward the Gram-positive pathogen Listeria monocytogenes.     

蜂蜜柚子茶工艺优化

以柚子皮和柚子肉为原料,辅以蜂蜜和增稠剂等配料,通过单因素与正交试验,解决蜂蜜柚子茶生产工艺中脱苦工艺、增稠剂配比等问题,确定蜂蜜柚子茶最佳工艺配方,即:柚子皮:柚子肉1:1,蜂蜜45%,柠檬酸0.125%,苹果酸0.25%.制得的蜂蜜柚子荼色泽自然,风味醇正,胶凝稳定性好.本工艺不添加任何防腐剂、香精、色素,具有一定的市场潜力.     

Properties of some citrus seeds. Part 2. Functional properties of seed flours

Water and fat absorption, gelation, protein solubility, emulsification and foam capacities of flours from citron, orange and mandarin seeds were determined. The protein solubility of the flours was increased as sodium chloride concentration increased up to 0.8 M for citron, mandarin and mixture seed flours and 1 M for orange seed flour, then decreased at higher concentrations. The minimum solubility was sharp for mandarin and orange seed flours, while, it was broader for mixture and citron seed flours. The least concentration for forming gel was 6%, 6.5% and 7% for mandarin, orange and both citron and mixture seed samples, respectively. The flours of orange and mandarin seeds were the highest and lowest in water absorption capacity. Also, the highest value of fat absorption capacity was noticed for citron and lastly for mandarin on flour basis. The emulsification and foam capacity-pH patterns were similar to protein solubility-pH profiles for all citrus seed flours. Foam capacity of mandarin and mixture seed flour were lower than that of citron and orange seed flours. The emulsification and foam capacities patterns in sodium chloride solution showed an increase up to 0.6 M and then decreased in all citrus seed flours. Foam stability of citrus seed flours was increased with sodium chloride concentration up to about 0.6 M and then decreased. The foam stability of all citrus seed flours at pH 4.5 was very poor but at pH 2, it was comparable to that at pH 8.     

杂交枸树木质部制浆性能初探

对杂交枸树木质部进行了硫酸盐法和APMP制浆性能的试验.结果表明,在适宜药品用量下,均能制得较好性能的硫酸盐浆和APMP浆.硫酸盐法制浆,其细浆得率为49.5%,采用HD两段漂白,纸浆白度可达80%ISO,且有较好的强度性能指标.APMP制浆,纸浆白度72.1%ISO,裂断长4.59km,有较好的不透明度和光散射系数.     

金佛手香气物质的多维分析及其特征香气物质的确定

采用顶空固相微萃取(headspace solid-phase microextraction,HS-SPME)和Tenax TA吸附剂吹扫捕集(purge and trap,PT)提取金佛手肉和皮的香气,通过气相色谱-质谱分别检测出44种和45种香气物质,结果显示采用HS-SPME和PT萃取金佛手香气物质具有良好的互补性。采用HS-SPME萃取金佛手肉和金佛手皮,通过全二维气相色谱-四极杆质谱分别检测出43种和40种相似度高的香气物质。此外有23种物质香气活力值大于1,结合偏最小二乘回归分析得出对金佛手香气贡献较大的物质是柠檬烯、芳樟醇、α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、γ-松油烯、异松油烯、辛酸乙酯、香叶醇、柠檬醛和叶醇等。