葡萄籽提取物脂肪酶抑制活性筛选及抑制机理的研究

为了研究葡萄籽中对脂肪酶有抑制作用的活性成分,葡萄籽粉碎后用95%乙醇提取24h,提取液减压浓缩得乙醇浸膏,乙醇浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取后减压浓缩并冷冻干燥得相应提取物。采用猪胰脂肪酶抑制剂活性筛选模型对各组分进行活性筛选。葡萄籽氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水相提取物对脂肪酶抑制的IC50值分别为46.32、0.95、28.54、150.39mg/mL。初步探讨了葡萄籽乙酸乙酯提取物对胰脂肪酶的抑制机理:抑制剂与酶的活性部位作用,导致酶催化反应速率下降。通过实验测定了抑制常数Ki=0.94mg/mL。Dixon图和Lineweaver-Burk图的特征表明,该抑制剂对胰脂肪酶的抑制呈非竞争性抑制。      

葡萄籽提取物脂肪酶抑制活性筛选及抑制机理的研究

为了研究葡萄籽中对脂肪酶有抑制作用的活性成分,葡萄籽粉碎后用95%乙醇提取24h,提取液减压浓缩得乙醇浸膏,乙醇浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取后减压浓缩并冷冻干燥得相应提取物.采用猪胰脂肪酶抑制剂活性筛选模型对各组分进行活性筛选.葡萄籽氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水相提取物对脂肪酶抑制的IC50值分别为46.32、0.95、28.54、150.39mg/mL.初步探讨了葡萄籽乙酸乙酯提取物对胰脂肪酶的抑制机理:抑制剂与酶的活性部位作用,导致酶催化反应速率下降.通过实验测定了抑制常数Ki=0.94mg/mL.Dixon图和Lineweaver-Burk图的特征表明,该抑制剂对胰脂肪酶的抑制呈非竞争性抑制.     

葡萄籽中胰脂肪酶抑制物提取工艺

以胰脂肪酶抑制率为响应值,采用L25(56)正交设计和Box-Behnken试验法相结合的手段,研究自葡萄籽中提取可抑制胰脂肪酶活性产物的最佳工艺条件,研究结果表明:当料液比为1:8(g/mL)、乙醇浓度54%、浸提温度67.6 ℃、浸提时间1.3 h时,葡萄籽提取物对胰脂肪酶的抑制率达61.53%以上.     

黑豆红色素抑制胰脂肪酶催化反应动力学研究

以黑豆红色素为材料,三油酸甘油酯为底物,采用酶催化反应动力学方法,研究黑豆红色素对胰脂肪酶抑制作用的影响及其抑制作用机制,为进一步探讨黑豆红色素控制和治疗肥胖病的机制及研发相关产品提供理论依据。研究结果表明,黑豆红色素在质量浓度为3 mg/m L、pH7.5、反应15 min、37℃条件下对胰脂肪酶的抑制效果最佳,抑制率达66.67%,为非竞争性抑制作用,半抑制浓度IC_(50)=2.3776 mg/m L,抑制常数Ki=1.64 mg/m L。紫外吸收光谱分析表明,黑豆红色素通过改变胰脂肪酶的构象,而致使其酶活力降低。荧光光谱分析表明,黑豆红色素对胰脂肪酶的荧光有猝灭作用,为静态猝灭,并且随着胰脂肪酶的浓度的增大,猝灭作用越强,其结合位点数n=0.48175,结合常数K_A=3.224×10~4 L/mol。结果显示,黑豆红色素可以作为植物源的胰脂肪酶抑制剂,能有效控制胰脂肪酶的活性。     

辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制研究

探讨辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用,为开发辣木叶天然胰脂肪酶抑制剂提供理论依据。在单因素试验的基础上,用正交试验优化提取条件,研究辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制作用,并结合Dixon图和LineweaverBurk图探讨其抑制类型。结果表明最佳提取条件为:料液比1∶50(g/mL)、提取液乙醇浓度70%、超声功率400 W、超声处理时间600 s、提取温度50℃;该条件下辣木叶粗提物对胰脂肪酶活力的抑制率为79.15%;辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制。辣木叶提取物对胰脂肪酶的活性有明显抑制作用。     

苦瓜多糖对胰脂肪酶抑制作用的研究

研究测定苦瓜多糖在不同的反应条件下对胰脂肪酶的抑制率,探讨了浓度、pH、反应时间、反应温度等条件下苦瓜多糖对胰脂肪酶活性的影响。结果表明,苦瓜多糖浓度为30mg/mL,pH为7.5,反应时间为15min,反应温度为37℃时,对胰脂肪酶的抑制效果最佳。在此条件下,苦瓜多糖对胰脂肪酶半抑制浓度IC50为29.86mg/mL,抑制率为51.24%。抑制类型为非竞争性抑制作用,抑制常数Ki=21.62mg/mL。苦瓜多糖对脂肪酶具有明显的抑制作用,为新型减肥药物的开发提供了新的思路。     

板栗壳黄酮结构分析及其对胰脂肪酶活力的抑制作用

在分析板栗壳黄酮结构的基础上，研究其对胰脂肪酶的抑制作用及类型。采用醇提法提取板栗壳中的黄酮，并用AB-8大孔吸附树脂进行纯化，冻干后得到的黄酮含量为（107.50±1.00）mg/g，提取得率为（5.66±0.05）%。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用技术对板栗壳黄酮进行结构分析，鉴定出8 种黄酮类化合物。采用对硝基苯酚法测定胰脂肪酶活力，分别考察板栗壳黄酮对胰脂肪酶的抑制效果及不同反应条件下板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响，结果表明，板栗壳黄酮对胰脂肪酶有较好的抑制作用，半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC50）为0.074 mg/mL，且使胰脂肪酶最适pH值向碱性偏移。通过Lineweaver-Burk双倒数作图法确定其抑制类型为非竞争性抑制，抑制常数Ki＝53.19 mg/mL。由此可见，板栗壳黄酮是一种效果良好的胰脂肪酶抑制剂。     

米胚芽中胰脂肪酶抑制剂的抑制机理研究

由米胚芽中提取的胰脂肪酶抑制剂主要为蛋白质,研究了不同因素对抑酶活性的影响,并初步探讨了从米胚芽中提取的脂肪酶抑制剂对胰脂肪酶的抑制机理抑制剂不直接与酶分子作用,而是间接改变底物乳化来阻碍底物-酶结合达到抑制作用。通过试验测定了抑制常数Ki=9.8×10-2mg/mL。从Dixon图和Lineweaver-Burk图的特征,表明该抑制剂对胰脂肪酶的抑制呈非竞争性抑制。     

琯溪蜜柚柚皮苷纯化鉴定及其对胰脂肪酶的抑制作用

为了探索琯溪蜜柚黄酮作为胰脂肪酶抑制剂的应用价值,本实验采用Sephadex LH-20葡聚糖柱层析、高效液相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱对琯溪蜜柚柚皮黄酮进行分离纯化及结构鉴定,并通过酶反应动力学和分子对接技术研究其对胰脂肪酶的抑制类型和分子间相互作用。高效液相色谱-质谱联用和傅里叶变换红外光谱分析结果表明,纯化后的琯溪蜜柚柚皮主要黄酮成分为柚皮苷;纯化鉴定的柚皮苷对胰脂肪酶半抑制浓度（half inhibitory concentration,IC50）为0.99 μg/mL,抑制类型为可逆非竞争型,抑制常数Ki＝0.58 μg/mL;该黄酮与胰脂肪酶的结合自由能为－30.14 kJ/mol,相互间的分子作用力包括范德华力、疏水相互作用、氢键、π键等,结合区域位于酶催化活性中心之外的位点。本研究表明琯溪蜜柚的主要黄酮成分柚皮苷对胰脂肪酶具有强烈的抑制作用,为利用琯溪蜜柚黄酮开发高效安全的胰脂肪酶抑制剂提供了理论依据。     

苦瓜皂甙的提取及其对胰脂肪酶抑制活性的研究

苦瓜皂甙可有效抑制胰脂肪酶的活力,是一种潜在的减肥辅助食物补充剂。通过响应面法对苦瓜皂甙的最佳提取工艺进行优化,并测定其对胰脂肪酶的抑制率。研究结果表明:苦瓜皂甙的最佳提取工艺为乙醇提取液的浓度为50%、料液比1∶13.5(g/mL)、提取温度38℃、浸提时间77 min、浸提次数1次,此条件下苦瓜皂甙的提取产率为1.419 1%,其对胰脂肪酶抑制的IC50值为0.384 7 mg/mL。