光敏化BPD-MA后膀胱癌细胞凋亡的研究

为了研究光动力抑癌作用机制,采用流式细胞仪和TUNEL法检测激光光敏化BPD-MA后人膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡的发生状况.激光光敏化BPD-MA后人膀胱癌细胞株BIU-87组细胞凋亡发生率明显增高,许多细胞核呈棕黄色,高倍镜下可见细胞核内有大量棕褐色颗粒,与阳性对照中凋亡细胞核的特征相符合,而对照组此种细胞少见.TUNEL阴性对照中细胞核均呈蓝色.结果表明,激光激活BPD-MA光动力作用明显诱导人膀胱癌细胞株BIU-87细胞发生凋亡,这可能是其抑癌作用机制之一.     

TMPyP4-PDT对人舌癌Tca8113细胞杀伤作用的实验研究

目的:探讨TMPyP4(〔四-(N-甲基-4-吡啶基)〕卟啉)对人舌癌Tca8113细胞的光动力学杀伤作用。方法:人舌癌Tca8113细胞用浓度分别为0μM、3.3μM、6.5μM、17μM、26μM的TMPyP4孵育4h后,用580nm半导体激光照射,能量密度分别为0 J/cm2、2J/cm2、4 J/cm2、8J/cm2、16J/cm2、32J/cm2,24h后用甲基噻唑四唑法(MTT))检测TMPyP4-PDT对人舌癌Tca8113细胞的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡率,并在光镜及电镜下观察细胞的形态变化。结果:在一定浓度范围内,TMPyP4-PDT对人舌癌Tca8113细胞生长增殖的抑制作用和诱导凋亡作用随着浓度和光照能量的增加而增加。光镜、电镜下可观察到细胞坏死和凋亡样改变。结论:TMPyP4-PDT对人舌癌Tca8113细胞有明显的杀伤作用,并在一定范围内呈光剂量和浓度剂量依赖型。     

雷帕霉素对绒癌JEG-3细胞株的影响

用雷帕霉素对人绒癌层细胞株JEG-3进行处理,探讨其对JEG-3的作用。分别采用MTT法、流式细胞术、Transwell技术检测雷帕霉素处理前后JEG-3细胞在增殖、凋亡和侵袭能力的改变。结果显示雷帕霉素对绒癌细胞的增殖、侵袭能力起着抑制作用,并对凋亡起促进作用。     

低强度中频超声对白血病细胞株k562杀伤作用的初步研究

目的：研究低强度中频超声对白血病细胞株K562的杀伤作用。方法：取对数生长期的K562细胞,分成实验组和假辐照组,用MTT法和台盼兰染色计算细胞抑制率。结果：低强度中频超声照射各组间细胞抑制率与对照组相比有统计学差异,且组间存在统计学差异。结论：单纯低强度中频超声对白血病细胞株K562有较强的杀伤作用,且其杀伤效应与照射强度和时间明显相关。     

光敏化姜黄素对人乳腺癌细胞的抑制作用

目的:探讨光敏化姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用。方法:应用MTT法检测不同浓度和光照时间的姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞生长的影响。结果:光敏化姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的生长起抑制和杀伤作用,并且这种作用随着姜黄素浓度的增加和光照时间的延长而增强。结论:姜黄素是一种新型的光敏剂,能有效的杀伤和抑制人乳腺癌MCF-7细胞的生长。     

uPAR抗体对口腔癌HB细胞增殖的影响

目的:检测uPAR抗体对口腔癌HB细胞增殖的影响,并探讨其作用机制.方法:MTT法检测不同浓度的uPAR抗体(20、50、100μg/ml)作用于口腔癌HB细胞,并检测不同作用时间(24、48和72 h)的细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞周期的变化;Annexin V-FITC/PI染色法检测对细胞凋亡的影响;酶联免疫吸附法检测uPAR抗体对HB细胞分泌VEGF-D的影响.结果:uPAR抗体能抑制HB细胞的增殖,并呈现浓度和时间依赖关系.uPAR抗体可使HB细胞周期停滞于G0/G1期,随着uPAR抗体作用浓度的增加,G0/G1期细胞比例逐渐增高.uPAR抗体可促进HB细胞凋亡并呈现一定的浓度依赖关系.uPAR抗体对HB细胞分泌VEGF-D有抑制作用,随着uPAR抗体浓度的增高,其VEGF-D分泌量也逐渐降低.结论:uPAR抗体可抑制HB细胞增殖,其可能机制是使细胞周期停滞于G0/G1期,促进细胞凋亡及减少VEGF-D的分泌.     

MPPA光动力作用诱导人鼻咽癌细胞凋亡的实验研究

为观察MPPa光动力作用对鼻咽癌细胞凋亡的影响,应用AnnexinV—PI双染结合流式细胞仪分析MPPa光动力作用后人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率。结果显示MPPa光动力作用实验组人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率分别增加到16.43 %和4.64 % ,且均显著高于单纯光照射组、单纯MMPa光敏剂处理组和假照射组(P <0 .0 1) ,而三对照组间无明显差异(P >0 .0 5 )。表明MPPa光动力作用能有效诱导低分化人鼻咽癌细胞株CNE2细胞凋亡的发生。这也可能是MPPa光动力作用杀伤鼻咽癌的重要机制之一。     

金丝桃素光动力作用诱导人鼻咽癌细胞凋亡

为了观察中药金丝桃素光动力作用对鼻咽癌细胞凋亡的影响,应用膜联蛋白AnnexinV-PI双染结合流式细胞仪,分析了中药金丝桃素光动力作用后,人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率。中药金丝桃素光动力作用实验组人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率分别增加到53.08%和6.77%,且均显著高于单纯光照射组、单纯金丝桃素光敏剂处理组和假照射组(P< 0.01),而单纯光照组、单纯金丝桃素光敏剂处理组和假照射组三对照组间无明显差异(P> 0.05)。中药金丝桃素光动力作用能有效诱导人鼻咽癌细胞株CNE2细胞凋亡的发生,这也可能是金丝桃素光动力作用杀伤鼻咽癌的重要机制之一。     

低强度中频超声杀伤卵巢癌细胞的初步研究

目的:观察低强度中频超声时人卵巢癌细胞的杀伤作用.方法:取对数乍长期的H08910细胞,分成实验组和假辐照组,以低强度中频超声(频率1.7MHz)辐照用MTT法计算细胞抑制率;光镜观察细胞形态,Hoechst33258荧光染色法检测凋亡细胞.结果:低强度中频超声照射各组间细胞抑制率工对照组相比有统计学差异,光镜下可见细...     

竹红菌素修饰纳米脂质微泡联合LED光源照射对人舌癌细胞Tca8113的作用的实验研究

目的:本实验自制竹红菌素修饰的脂质微泡,联合LED光源对人舌癌细胞Tca8113进行光动力处理后观察细胞.方法:常规培养,取对数生长期的舌癌细胞Tca8113,机械振荡法制备竹红菌素修饰的脂质微泡,联合LED光源对细胞进行光动力治疗,MTT法检测细胞存活率,并用流式分析仪分析其促凋亡作用.结果:MTT法和流式细胞仪显示竹红菌素修饰的脂质微泡联合LED光源照射对Tca8113人舌癌细胞有明显凋亡现象,且在一定浓度范围和光照能量密度范围内,其凋亡作用与HB微泡浓度和能量密度呈正相关.结论:竹红菌素修饰的纳米脂质微泡联合LED光源光动力疗法对人舌癌细胞Tca8113有促凋亡抑制作用.     

ALA-PDT在耐药白血病细胞株HL-60/ADR中的实验研究

目的:本研究观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法(ALA-PDT)对耐药白血病细胞株HL-60/ADR的诱导凋亡作用.方法:以耐药白血病细胞株HL-60/ADR为实验模型.实验分为4组,对照组、单纯ALA组、单纯光照组及ALA PDT组.用MTT法检测细胞的存活率,瑞特染色观察细胞形态学改变,用双染法检测细胞凋亡率,并用共聚焦激光显微镜观察凋亡细胞的特征.结果:ALA PDT组光照后瑞特染色可见凋亡改变;MTT法显示细胞存活率明显下降,24h为(48.67±8.14)%,48h进一步降低至(22.23±6.07)%,两者比较差异有统计学意义;流式细胞仪检测显示细胞凋亡率3h、4h和24h分别为(6.35±1.40)%、(8.07±1.87)%和(57.66±7.55)%,与对照组相比差异有统计学意义;LSCM观察AnnexinV-FITC单阳性及AnnexinV-FITC/PI双阳性细胞均具有典型的凋亡特征,而单纯ALA组、单纯光照组及对照组则无上述改变.结论:ALA-PDT能灭活耐药白血病细胞株HL-60/ADR,主要通过诱导凋亡的方式实现的,并呈一定的时间依赖性.     

LPS诱导的胸腺细胞凋亡对瘦素的抑制作用

要提高声表面波(SAW)气体传感器的测量精确度,温度补偿是主要难题.目前有许多补偿方法,但其效果不佳.采用软件方法进行温度补偿的研究在国内外已成热点,但选用神经网络对声表面波气体传感器进行温度补偿罕见报道.该文以西北工业大学研发的声表面波CO气体传感器为研究对象,通过理论分析和实验,得到了声表面波CO气体传感器的温度特性曲线.提出了一种利用BP人工神经网络对声表面波CO气体传感器温度误差进行修正的新方法.计算机仿真和试验结果表明,该法能有效改善传感器的输出特性,且速度快,精度高,鲁棒性强,便于用硬件实现,具有较高的推广应用价值.     

Ultrastructural basis for the transition of cell death mode from apoptosis to necrosis in menadione-treated osteosarcoma 143B cells

Time-dependent ultrastructural changes of menadione-treated human osteosarcoma 143B cells were correlated with those in their stainability to Annexin V and propidium iodide (PI). Populations of both apoptotic (Annexin V(+)/PI(-)) and necrotic (Annexin V(+)/PI(+)) cells, judged by flow cytometry, began to increase at 2 h after menadione treatment. The former reached a maximum at 6 h followed by abrupt decreases thereafter, while the latter continued to increase. Electron microscopically, cells obtained at 6 h after the menadione treatment consisted of mixed populations of cells with typical apoptotic features and those with a mixture of apoptotic and necrotic features, while cells obtained at 8-24 h consisted exclusively of cells with a mixture of apoptotic and necrotic features. Thus, necrotic cells, as judged by flow cytometry, were in a transitional state of cell death mode from apoptosis to necrosis and are thus designated as 'intermediate cells'. Lack of apoptotic bodies, judged by flow cytometric analysis on sub-G1 nuclei and by electron microscopy in menadione-treated cells, suggested that the transition of cell death mode from apoptosis to necrosis occurred before the apoptotic processes were completed. Effects of N-acetylcysteine and Z-VAD-fmk on menadione-induced ultrastructural changes were also studied.     

雷公藤内酯醇通过介导热休克蛋白27的表达诱导Hut78细胞凋亡

目的：探讨雷公藤内酯醇（Triptolide,TP）诱导皮肤T细胞淋巴瘤Se’zary综合征Hut78的凋亡及机制。方法：采用MTT法检测Hut78细胞的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测Hut78细胞的凋亡率,Westernblot检测Hut78细胞中小分子热休克蛋白27（HSP27）的表达。结果：雷公藤内酯醇可诱导Hut78细胞凋亡（P〈0.01）,雷公藤内酯醇干预组,HSP27的表达被抑制。用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后,雷公藤内酯醇诱导Hut78细胞凋亡率下降,HSP27的表达被抑制效应减弱。结论：雷公藤内酯醇可诱导Se’zary综合征细胞Hut78凋亡,该作用与抑制HSP27的表达密切有关,同时该作用可被p38MAPK特异性抑制剂SB203580显著抑制,提示p38MAPK信号通路也参与雷公藤内酯醇介导的Se’zary综合征细胞株Hut78中HSP27的表达。     

BPD-MA光动力作用对膀胱癌细胞凋亡及bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究激光活化BPD-MA光动力诱导肿瘤细胞凋亡及其可能机制。方法:应用流式细胞仪分析BPD-MA光动力作用后细胞凋亡及免疫组化染色检测凋亡相关蛋白bcl-2蛋白表达水平。结果:激光活化BPD-MA光动力实验组人膀胱癌细胞株BIU-87凋亡发生率达26.11±2.59%,与对照组相比,差异非常显著性(P<0.01);光动力作用后膀胱癌细胞线粒体相关调控蛋白bcl-2表达显著低于对照组(P<0.05)。结论:激光活化BPD-MA光动力作用具有诱导人膀胱癌细胞株BIU-87凋亡的生物效应,而线粒体相关调控蛋白bcl-2表达水平的降低可能是激光活化BPD-MA光动力诱导人膀胱癌细胞株BIU-87凋亡的重要机制之一。     

He-Ne激光照射引起小鼠胸腺细胞早期凋亡的实验研究

用Ｈｅ－Ｎｅ激光照射引起离体小鼠胸腺细胞凋亡,利用流式细胞计定量检测ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ或Ｒｈ１２３和ＰＩ双标记早期凋亡的胸腺细胞,利用透射电子显微镜对凋亡细胞作形态观察。发现激光照射６０ｍｉｎ（光剂量为４７．６９４～５１．８２２Ｊ／ｃｍ２）,细胞早期凋亡明显增加,随着照射时间延长,光剂量增加,细胞早期凋亡百分率也随之增加,表明胸腺细胞经激光照射后,早期凋亡细胞膜上磷脂酰丝氨酸由质膜内侧外翻至质膜的外表面;同时线粒体功能损失,其跨膜电势下降。     

人参总皂苷对K562细胞的增殖抑制及诱导分化作用

目的:研究人参总皂苷TSPG对人慢性粒细胞白血病细胞株(K562细胞)增殖及分化的影响,探讨TSPG抗肿瘤作用.方法:取对数生长期K562细胞,分为阴性对照组、不同浓度TSPG组及阳性对照组进行体外培养,以噻唑蓝(MTT)比色法、台盼蓝活细胞计数法观察TSPG对K562细胞增殖的影响;用联苯胺染色及血红蛋白测定检测其诱...     

竹红菌乙素光动力对人舌鳞癌Tca8113细胞杀伤作用的初步研究

目的：本文是用实验的方法,初步探讨中药光敏剂竹红菌乙素（HB）在光动力（PDT）作用下,对体外人舌鳞癌Tca8113细胞的杀伤作用。方法：常规培养、选取对数生长期人舌鳞癌Tca8113细胞,用含有竹红菌乙素（HB）浓度分别为0μM、0．25μM、0．5μ／M、1μM、2μM的RPMI-1640培养液孵育细胞4h后,经470nmLED定制多光源半导体激光光照处理（PDT）,能量密度设置分别为0J／CM^2、1J／CM^2、2J／CM^2、3J／CM^2、4J／CM^2。PDT处理后细胞继续孵育24h后,分别在光学显微镜和荧光显微镜下观察细胞形态学变化,并用甲基噻唑四唑法（MIT法）检测竹红菌乙素（HB）对细胞的抑制作用。并分别在激光照射6h及24h后,用流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果：经PDT处理后细胞在光学显微镜及荧光显微镜下均可观察到细胞坏死和凋亡样改变;在一定浓度范围和光照能量密度范围内,竹红菌乙素（HB）在PDT作用下对人舌鳞癌Tca8113细胞生长增殖的抑制和诱导凋亡作用与药物浓度和能量密度成正相关变化。结论：竹红菌乙素（HB）在光动力（PDT）作用下,对人舌鳞癌Tca8113细胞具有显著的杀伤作用,并在一定范围内呈浓度剂量和光剂量正相关依赖性。