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目的 利用表面离子共振系统建立检测H5、H7、H9三种亚型禽流感病毒的方法。方法 取原核表达的H5、H7、H9亚型的血凝素HA蛋白偶联于CM5芯片上, 利用HBS缓冲液梯度稀释病毒参考抗原并分别与固定浓度的三种亚型的禽流感抗血清进行反应, 采用竞争法制备标准曲线并用以计算样品的浓度和确立检测灵敏度低限。对不同亚型之间及五种其他常见禽类病毒抗体进行特异性检测试验。结果 建立的表面离子共振方法在检测各亚型时相互之间无交叉反应, 未检测到其他禽源病毒的阳性响应信号, HA重组蛋白的检测极限可达0.5 μg/mL。结论 研究表明该方法可用于同步鉴别主要流行的禽流感病毒亚型。 相似文献
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了解丽水市禽蛋标本禽流感病毒的感染状况。方法 对随机抽样的690只鸡、鸭、鸽蛋及126份农贸市场外环境对照标本采用荧光定量PCR方法检测禽流感病毒H7N9、H5和H9亚型核酸。结果 690只禽蛋标本H7N9、H5及H9亚型禽流感病毒核酸检测均为阴性,126份外环境对照标本H7N9亚型禽流感病毒核酸检测均为阴性,H5和H9亚型阳性标本各2份,阳性率为3.17%。结论 禽蛋中H7N9、H5及H9亚型禽流感病毒污染率低,但丽水市禽间存在H5和H9亚型禽流感的传播。各有关部门应加强合作,采取切实有效措施,防止人感染禽流感。 相似文献
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目的以表面离子共振(surface plasmon resonance,SPR)系统为技术平台,利用捕获法建立检测鸭坦布苏病毒适配单抗的SPR方法,并对抗坦布苏病毒单克隆抗体的亲和力及抗原抗体结合的动力学进行研究。方法将鼠抗抗体偶联于CM5芯片上,采用Kinetics程序将HBS缓冲液梯度稀释的不同浓度的单克隆抗体进行捕获反应,拟合解离曲线计算不同单抗的K_D值并确立检测灵敏度低限并对其他不同亚型及5种常见禽类病毒抗体进行特异性检测试验。结果测得3株单抗的K_D值分别为1.50×10~(-13)、1.16×10~(-11)、7.85×10~(-12),建立的表面离子共振方法在检测其他禽源病毒时无阳性响应信号,坦布苏重组E蛋白的检测极限达0.625nmol/L。结论该方法可用于快速筛选检测坦布苏病毒的稳定适配单抗,并可有效获知其亲和力数据,为大规模推广建立免疫筛查方法奠定基础。 相似文献
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为了解南沙区肉菜市场外环境中禽流感病毒的流行特点和趋势,为预防人感染禽流感病毒提供依据,本项目从2021年1月到2022年6月,历时共18个月,一共采集南沙区8个街镇的肉菜市场外环境相关样本1 160份,采用实时定量RP-PCR的检测方法进行禽流感病毒的H5/H7/H9分型检测。Ct值≤32.00时结果判定为阳性,共有184份样本检出禽流感病毒,检出率为15.86%。其中,9份检出禽流感病毒H5亚型,检出率为0.78%;173份检出禽流感病毒H9亚型,检出率为14.91%;H5和H9混合亚型阳性2份,检出率为0.17%;所有样本均未检出禽流感病毒H7亚型。检测结果提示南沙区肉菜市场外环境中存在一定的禽流感病毒传播风险,应通过定期的消毒和清洁等措施,降低此风险。 相似文献
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1997年发现H5N1禽流感病毒(H5N1 AIV)跨越物种障碍使人感染,致死率60%,表明H5N1是一强致病力的流感病毒。H7N9禽流感病毒是2013年3月在我国上海和安徽发现并感染人的一种新的禽流感病毒株。我国立即采取了重大措施加以控制。H7N9禽流感的出现受到了世界许多国家和世界卫生组织的严重关注。本文介绍了禽流感病毒的分类和命名法,及以往H7禽流感的流行和人感染病例,讨论了H7亚型致病力的机制,综述了H7N9流感病毒及抗病毒药物研究进展,为H7N9禽流感的预防、治疗的研究和新药开发提供有益的参考。 相似文献
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目的建立金黄色葡萄球菌肠毒素B悬浮芯片定量检测方法。方法利用双抗体夹心法免疫学原理,以金黄色葡萄球菌肠毒素B的特异性抗体包覆微球为载体,利用悬浮芯片(Bio-Plex)系统建立检测模型;检测不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B,测定方法的灵敏性;通过该方法对大肠杆菌、普通变型杆菌、蓖麻毒素和禽流感病毒HA、NH蛋白和金黄色葡萄球菌热休克毒素的检测,判断方法的特异性;将不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B添加到奶粉中验证方法的实用性和稳定性。结果悬浮芯片方法对金黄色葡萄球菌肠毒素B的检测线性范围为0.2~1653.4ng/ml,最低检测值为203pg/ml,均优于酶联免疫吸附实验;除与2.3μg/ml金黄色葡萄球菌热休克毒素有交叉反应外,和其他几种细菌、毒素、蛋白均无交叉反应;对添加相同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B奶粉的检测的相对标准偏差在1.30%~16.93%。结论悬浮芯片定量检测方法对于模拟添加的金黄色葡萄球菌肠毒素B具有良好的检测效果。 相似文献
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3月31日,国家卫生和计划生育委员会发布通报,我国首次确认发现3例人感染H7N9禽流感病例.这是全球首次发现H7N9禽流感病毒引发人类疫情.
虽然H7N9禽流感病毒来表现出较强的人传入的能力,但想到10年前的SARS疫情,和近年来频频造访的高致病性禽流感H5N1疫情,我们不禁又绷紧了神经.确实,这次的H7N9禽流感疫情也有自己的特点: 相似文献
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为了从本质上揭示H1N1病毒分子的变异、流感流行等关系,提出一种构建H1N1型流感病毒进化树的新方法。在1902—2013年全球22 455条H1N1型流感病毒HA蛋白序列和16444条NA蛋白序列数据的基础上,利用其特征向量构建基于内积的蛋白序列相似度;采用基于相似度的完全聚类图的方法进行数据系统粗粒化的相似信息提取;最后,利用基于模糊邻近关系的结构聚类方法构建H1N1型禽流感病毒HA、NA蛋白序列的进化树及算法研究。试验结果表明:H1N1病毒的变异不仅与爆发时间密切相关,还与所分布地域及地域间的距离有很大关系,且分布地域间的距离越近,爆发的病毒进化的相似程度越高。因此这种基于大数据处理的新方法能有效揭示流感病毒的进化关系,为进一步研究流感病毒的变异、进化与预测奠定了基础。 相似文献
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近年全球受各种流感病毒威胁,包括H7N9及H5N1禽流感等。香港大学医学院与美国国家卫生研究院在天花疫苗中.加入流感病毒基因,成功研发新型甲型流感疫苗.可对抗禽流感病毒H7N9及H5N1、季节性流感H3N2及H1N1,及高致病性H7N7。一旦爆发大型流感,可于短时间内大规模生产疫苗。 相似文献
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目的利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,建立快速定量测定牛奶中生物素的方法。方法将生物素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面,并对竞争结合的生物素结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化,检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的生物素,利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线,并对市售10个奶粉样品进行检测。结果制备的芯片稳定,50个循环相对标准偏差(relative standarddeviation,RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为8.75%,该方法的检测限为0.1μg/100g,回收率为80.4%~91.2%。10个牛奶产品中生物素含量全部在固定的允许范围内。所建立的方法可以在4 h内完成样品的前处理和检测。结论该方法是一种简便、快捷的定量检测方法。 相似文献
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甲型流感H1N1病毒遗传进化关系分析 总被引:2,自引:0,他引:2
探讨研究当前流行性甲型流感H1N1病毒与已知人流感H1N1病毒、禽流感H1N1病毒,猪流感H1N1病毒之间的遗传进化关系,对7株甲型H1N1、32株已知人流感H1N1、18株禽流感H1N1、33株猪流感H1N1病毒的基因组各基因片段分别进行基因序列遗传进化分析,选取同源性高的毒株构建进化树.结果显示,新型人流感病毒A型H1N1中HA,MP、NA,NP、NS、PB1基因片段与猪流感病毒分离株有很高的同源性,而PA、PB2基因与禽流感病毒分离株同源性较高. 相似文献
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目的 利用表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)技术, 建立快速定量测定牛奶中维生素B12的方法。方法 将钴胺素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面, 并对竞争结合的维生素B12结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化, 检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的维生素B12, 利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线, 并对市售10个奶粉样品进行检测。结果 制备的芯片稳定, 50个循环相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为0.54%, 该方法的检测限为0.006 μg/100 g, 回收率为92.1%~104.1%。测得的10个牛奶产品中维生素B12含量与对应商品标签值全部在标准规定的范围内。结论 所建立的方法可以在6 h内完成样品的前处理和检测, 是一种简便、快捷的定量检测方法。 相似文献
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目的利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,建立快速定量测定牛奶中维生素B12的方法。方法将钴胺素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面,并对竞争结合的维生素B12结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化,检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的维生素B12,利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线,并对市售10个奶粉样品进行检测。结果制备的芯片稳定,50个循环相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为0.54%,该方法的检测限为0.006μg/100 g,回收率为92.1%~104.1%。测得的10个牛奶产品中维生素B12含量与对应商品标签值全部在标准规定的范围内。结论所建立的方法可以在6 h内完成样品的前处理和检测,是一种简便、快捷的定量检测方法。 相似文献