免疫学检测羊乳中掺入牛乳成分

由于营养、价格和原料等原因，市场上在羊乳中掺入牛乳的现象常有发生。针对这种乳源性掺假陆续产生了多种检测方法，本文主要综述了以ELISA为主的免疫学快速检测方法。     

羊乳制品中牛乳源成分的鉴别检测技术

羊乳含有丰富的蛋白质、脂肪和矿物质,与其他乳相比营养组成最接近母乳。羊乳中的脂肪球小,乳糖含量低,并含有丰富的腺苷三磷酸促进乳糖的分解,更适于具有乳糖不耐受症的亚洲成年人和婴幼儿饮用。国内外对羊乳及羊乳粉的需求不断增长。然而由于羊乳产量过低,价格高,不法商家在羊乳及羊乳制品中容易掺入一些价格低廉、方便易得的牛乳及牛乳源成分不时有报道。为了保护消费者权益和健康,规范市场,避免进出口贸易损失,鉴定纯正的羊乳及制品,检测其中的掺假牛乳源成分十分迫切。从免疫学法、色谱法、电泳法、基因检测法等方面综述了目前羊乳及羊乳制品中牛乳源成分鉴别和检测技术。     

水牛乳及其乳制品中掺入牛属动物乳源的检测方法研究进展

综述了电泳、色谱、免疫化学、DNA技术等在掺假水牛乳检测中的研究进展及各自优劣,旨在为我国开展类似研究提供理论依据。     

IEF快速鉴别牛乳中掺入豆蛋白的方法

ＩＥＦ快速鉴别牛乳中掺入豆蛋白的方法杨锋，柳琪，滕葳，黎秀卿山东省农业科学院中心实验室２５０１００牛淑珍，林秋萍河南省农业科学院实验中心近年向牛乳及乳粉中掺假的现象时有发生。据卫生部门调查表明，乳与乳制品中掺假物质种类繁多，掺假物质达几十种。虽然掺假...     

毛细管电泳技术检测羊乳婴幼儿配方粉中的牛乳成分

婴幼儿配方乳粉的乳源鉴别对于保障产品安全和真实性至关重要。采用毛细管电泳技术对羊乳来源的婴幼儿配方粉中的牛乳成分进行检测。通过比较不同乳源产品中主要蛋白质组分的电泳图谱,筛选出牛乳表征蛋白峰。通过方法验证以及检测市售样品,证实毛细管凝胶电泳在准确度、精密度及重复性方面表现良好,筛选的表征蛋白峰峰面积与羊乳中牛乳含量呈现良好线性相关性(R~20.99),检测灵敏度0.5%,表明该方法可用于羊乳来源婴幼儿配方粉中牛乳成分的定性和定量检测。     

羊乳中牛乳成分的环介导等温扩增高分辨熔解检测

为了提高检测效率,节省时间、试剂和样本,建立了基于高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)的双重环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术用于羊乳中牛乳成分的检测。通过引物设计优化,牛引物目标产物的Tm值在80℃,羊引物目标产物的Tm值在83℃,由于在传统熔解曲线中峰型有交叉重叠,同时检测存在干扰,因此使用HRM技术,实现了2种不同动物源性成分的有效区分。该方法特异性好,不需要针对牛、羊源性成分单独进行检测,当体系中存在其中一种或两种都存在时都可将其快速检出,且对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,成功应用于市售羊乳及其制品的检测。     

牛乳、羊乳和人乳中的蛋白质组成及消化特性研究

在分析牛乳、羊乳和人乳蛋白质组成的基础上,通过模拟胃肠消化环境,研究牛乳、羊乳和人乳中蛋白质的消化特性.结果表明:牛乳中的蛋白质主要由αs1-酪蛋白、β-酪蛋白和β-乳球蛋白组成,羊乳中的蛋白质主要由αs2-酪蛋白、β-酪蛋白和β-乳球蛋白组成,人乳中的蛋白质主要由β-酪蛋白和α-乳白蛋白组成.牛乳、羊乳和人乳中酪蛋白...     

羊乳制品中掺杂牛乳鉴别技术研究进展

概述了目前应用于羊乳及羊乳制品掺假检测方法的基本原理及其研究进展,包括基于牛抗原特异性实现的ELISA技术、基于DNA的聚合酶链式反应技术、基于乳源蛋白荷质比差异的电泳技术、基于蛋白组学和甘油三酯组成的色谱和质谱技术.同时从方法准确性、可靠性、检测效率以及方法适用性和经济性等方面比较了各类检测方法的优缺点,期望为羊乳及...     

基于电子舌的掺假牛乳的快速检测

以掺假牛乳样品为检测对象,利用电子舌结合主成分分析法进行研究,旨在寻求一种能有效监控牛乳品质的快速检测方法.对几种常见的掺假(掺入水、食盐、蔗糖、尿素、大豆油)牛乳样品、复原乳以及纯牛乳样品进行检测和评价.试验结果表明:电子舌可以很好地区分纯牛乳和掺入不同物质的牛乳样品,纯牛乳、纯鲜牛乳、复原乳及其混合乳样品得到有效辨识,同时各种掺假牛乳样品随掺入物质的比例在主成分得分图中呈规律性分布.电子舌可用于掺假牛乳的快速检测.在建立典型标准样品数据库的前提下电子舌可有效监控牛乳品质,其在乳制品的质量控制及评价中具有较大的应用潜力.     

基于非线性化学指纹图谱的羊乳广谱掺假检测研究

目前羊乳中发现的掺假物质种类繁多,而检测方法多为针对单一掺假物质的检测.本研究基于非线性指纹图谱技术构建非特异性的广谱掺假物质判定方法.本研究在测定32个纯山羊乳样品及添加5％、1％和0.1％不同浓度氯化钠、大豆蛋白胨、尿素和蔗糖羊乳样品的非线性指纹图谱基础上,对纯山羊乳与掺假羊乳的指纹图谱进行直观的比较和相似度比较....     

Indirect ELISA for detection of goats' milk in ewes' milk and cheese

An indirect ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) has been developed successfully for the detection of defined amounts of goats' milk (1–25%) in ewes' milk and cheese. The assay uses polyclonal antibodies raised in rabbits against goats' caseins (GC). The anti-GC antibodies were recovered from the crude antiserum by immunoadsorption and elution from a column containing immobilized goats' caseins. The anti-GC antibodies were biotinylated and rendered goats' milk specific by mixing them with lyophilized bovine and ovine caseins. The assay was developed in a non-competitive ELISA format and it comprised coating plates with extracts from samples. ExtrAvidin-peroxidase was used to detect the biotinylated anti-GC antibodies bound to goats' caseins immobilized on 96-well plates. The colour developed by the subsequent enzymic conversion of the substrate resulted in discernible differences in optical densities when assaying mixtures of ewes' milk and cheese containing variable amounts of goats' milk.     

Effect of Freezing and Frozen Storage on Chemical and Microbiological Characteristics in Sheep Milk Cheese

ABSTRACT: Most chemical components and water activity of an the Los Pedroches' brand ewes' milk cheese were not altered by frozen storage. Lactic acid concentration and pH were significantly different (p < 0.05) in control cheeses and those kept in frozen storage for 3 and 6 months from those stored for 9 months. Proteolysis continued slowly during frozen storage, with significantly higher rates of non protein nitrogen and amino acid nitrogen (p < 0.05) present at the end of the storage period. Counts of microorganisms, except for enterococci, tended to decrease during frozen storage. Freezing rates did not affect the chemical and microbiological characteristics studied.     

羊奶牛奶混合干酪加工工艺研究

为改进羊奶牛奶混合干酪加工工艺,本实验以羊奶粉和鲜牛奶为原料,研究了牛奶添加比例、不同凝乳酶、杀菌条件、酸化条件和氯化钙添加量对混合干酪凝乳效果、出品率和感官品质的影响。结果表明,添加35% 的鲜牛奶,选用羔羊皱胃酶为凝乳酶,巴氏杀菌(63℃,30min),酸化pH6.20,氯化钙添加量为0.02% 时混
合干酪的品质较好。     

豆奶,牛奶混合型干酪的研制

以豆奶和牛奶为原料，通过干酪制作条件的优化研究，得出了生产混合型干酪的重要工艺参数和技术要点。实验表明，用含有２０％豆浆的牛奶作为混合原料奶，消毒后加入２％的发酵剂和凝乳酶，经１－２月成熟，即可得到风味与纯牛奶干酪无显著差异的优质混合型干酪。     

牛乳和双峰驼乳中乳脂球膜蛋白的差异分析

为阐明双峰驼乳中乳脂球膜蛋白（milk fat globule membrane proteins,MFGMP）的组成以及与牛乳MFGMP之间的差异,以牛乳和双峰驼乳中的MFGMP为研究对象,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳和液相色谱-串联质谱（liquid chromatograph-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）技术对其中的高丰度蛋白质进行表征,并对双峰驼乳MFGMP提取方法进行选择。结果显示,双峰驼乳和牛乳MFGMP中含量最高的蛋白组分依次为嗜乳脂蛋白、黄嘌呤氧化还原酶/脱氢酶、乳凝集素（MFG-E8或PAS6/7）、脂肪分化相关蛋白（ADRP或PLIN2）,3 种方法分析双峰驼乳和牛乳中MFGMP中高丰度蛋白组分的结果具有一致性。基于LC-MS/MS技术对双峰驼乳的MFGMP进行鉴定,并将对鉴定出的蛋白质进行基因本体功能注释和京都基因与基因组百科全书路径分析,发现这些蛋白主要是细胞膜、线粒体、内质网膜等组分,参与的生物途径有翻译和翻译的起始、氧化还原过程、细胞内蛋白质转运、蛋白质折叠、细胞氧化还原稳态等,具有结合活性和分子催化等分子功能。     

电导率法检测原料乳掺假的方法研究

研究了使用电导率法检测原料乳中掺假的方法,根据乳中掺入电解质时电导率有显著增大、掺乳非电解质时电导率有显著减小的特性,使用电导率仪测定待检乳样的电导率,根据一定温度下电导率值与该温度下正常乳样的电导率对比,有显著差异的判定为乳样中有掺假物。此法具有成本低廉,操作方便快捷,检验时间短等特点,为快速定性检测方法,可以在线应用,适用于乳品企业进行原料乳掺假的快速检测。     

基于牛乳非蛋白生物标志物定量检测山羊乳中掺加的牛乳

为克服酶联免疫吸附法无法检测羊乳中掺加的经过热处理的牛乳的局限,本研究首先通过气相色谱-质谱法发现牛乳区别于山羊乳的关键非蛋白生物标志物为N-乙酰氨基葡萄糖,然后基于该标志物开发基于高效液相色谱手段定量检测山羊乳中掺加的牛乳的方法.样品在70℃经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生60 min后,在高效液相色谱仪上使用...     

母乳和牛乳中乳脂肪球膜蛋白质的差异分析

为比较乳脂肪球膜（milk fat globule membrane,MFGM）蛋白在母乳和牛乳中的差异,采用有机试剂提取法,从母乳和牛乳中提取分离出MFGM蛋白,经皮尔斯TM去垢小柱去除十二烷基硫酸钠后,通过液相色谱-质谱联用技术检测分析,检测结果根据特异性肽段匹配数不小于1筛选后,在母乳和牛乳中分别检测到863 种和454 种蛋白,其中二者共有175 种,分别独有688 种和279 种。将母乳中差异表达的688 种蛋白质按PANTHER数据库进行蛋白质的Gene Ontology（GO）功能注释,这些蛋白主要是细胞部分、细胞器、细胞膜等组分,参与的生物途径有新陈代谢过程、生物调节、刺激性反应、免疫系统过程、再生作用等,具有催化、黏合、转运、酶调节等多种分子功能。另外,母乳中的这些差异蛋白参与氨酰tRNA生物合成、致病性大肠杆菌感染、脂肪酸代谢、丙酸代谢、甾体合成、酸降解等都是牛乳中的乳脂肪球膜蛋白不具有的功能。通过分析得出母乳和牛乳中的MFGM蛋白具有明显差异,虽然有部分组成和功能的重叠,但在丰度和代谢路径上,牛乳MFGM蛋白不能替代母乳MFGM蛋白。     

Determination of Milk Fat Adulteration with Vegetable Oils and Animal Fats by Gas Chromatographic Analysis

This study assessed the potential application of gas chromatography (GC) in detecting milk fat (MF) adulteration with vegetable oils and animal fats and of characterizing samples by fat source. One hundred percent pure MF was adulterated with different vegetable oils and animal fats at various concentrations (0%, 10%, 30%, 50%, 70%, and 90%). GC was used to obtain the fatty acid (FA) profiles, triacylglycerol (TG) contents, and cholesterol contents. The pure MF and the adulterated MF samples were discriminated based on the total concentrations of saturated FAs and on the 2 major FAs (oleic acid [C18:1n9c] and linoleic acid [C18:2n6c], TGs [C52 and C54], and cholesterol contents using statistical analysis to compared difference. These bio‐markers enabled the detection of as low as 10% adulteration of non‐MF into 100% pure MF. The study demonstrated the high potential of GC to rapidly detect MF adulteration with vegetable and animal fats, and discriminate among commercial butter and milk products according to the fat source. These data can be potentially useful in detecting foreign fats in these butter products. Furthermore, it is important to consider that several individual samples should be analyzed before coming to a conclusion about MF authenticity.