骨髓间充质干细胞与相关载体的联合应用及调控

骨髓间充质干细胞（BMSCs）是成骨细胞的前体细胞,具有类似于多种中胚层及神经外胚层来源组织细胞分化的潜能。它具有较强的自我增殖能力、分化多潜能性、来源丰富、取材简单、对机体的损伤小等优点,是一种较为理想的种子细胞,在组织工程研究中占有一席之地。目前,BMSCs的分离培养方法已日趋成熟,     

甲状旁腺素对骨髓间充质干细胞增殖、分化和旁分泌功能的影响

目的观察甲状旁腺素(PTH)对体外培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖、分化、干性(stemness)和旁分泌功能的作用。方法采用标准培养基体外培养人骨髓间充质干细胞,并将其分为对照组和PTH干预组,用细胞计数测试和BrdU增殖检测细胞增殖变化。用碱性磷酸酶染色、油红染色、阿利新蓝染色检测细胞分化情况。用Real-time PCR检测hMSCs OCT-4、Nanog、SOX-2、CCND1、C-MYC等基因表达情况。用ELISA方法检测hMSCs培养上清液基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、胰岛素样生长因子(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、骨形态发生蛋白2(BMP2)和Angiopoietin1蛋白水平。结果使用10-8mol/L~10-9mol/L的PTH干预6 d可明显促进hMSCs增殖(P<0.05),PTH 10-8mol/L促进成骨、软骨分化,抑制脂肪分化。PTH 10-8mol/L可明显诱导CCND1和C-MYC基因表达(均P<0.01),抑制OCT-4表达(P<0.01),抑制Nanog和SOX-2等表达(均P<0.05)),升高培养液中SDF-1、IGF-1、VEGF、BMP2和血管生成素1(Angiopoietin 1)蛋白水平(均P<0.05)。结论 PTH能促进hMSCs增殖,调节其分化,但不能维持hMSCs的干性。调节hMSCs的旁分泌功能对局部微环境合成代谢、细胞迁移和血管发生产生影响。     

兔脂肪垫滑膜间充质干细胞分离、纯化及诱导定向分化研究

目的：探讨兔脂肪垫滑膜间充质干细胞（SMSCs）的分离、培养、生物学特性及其定向分化的能力。方法采用兔脂肪垫组织块培养法分离原代 SMSCs,有限稀释法纯化和扩增 SMSCs,观察 SMSCs 形态学特点;CCK8法测定第2代及第4代 SMSCs 增殖能力;Alcian Blue、碱性磷酸酶,以及油红“O”染色法观察第4代 SMSCs 在定向诱导液中向成软骨、成骨、成脂肪细胞的分化能力。结果脂肪垫滑膜组织经组织块培养2～3 d 见 SMSCs 生长,12～14 d 可获大量 SMSCs,纯化传代后细胞形态均一;第2、4代 SMSCs 细胞增殖能力比较差异无统计学意义（P ＞0．05）;SMSCs 经诱导可向软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞定向分化。结论关节内脂肪垫滑膜组织采用组织块培养法能有效地分离出 SMSCs,其间充质干细胞具有多向诱导分化潜能。     

淫羊藿苷通过激活Notch信号通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究

目的:观察淫羊藿苷骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化过程中的促进作用及其对Notch信号通路的影响。方法:通过对BMSCs细胞进行体外分离培养,将细胞分为对照组与给药组,给药组加入0.1mg·L-1、0.2 mg·L-1、0.4 mg·L-1、1 mg·L-1、2 mg·L-1、4 mg·L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1淫羊藿苷分别培养3 d、7 d、10 d、14 d、21 d,测定细胞上清液中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,确定最佳给药剂量。将细胞分为3组,对照组、骨分化诱导组、骨分化诱导+淫羊藿苷处理组(联合组),培育7~21 d后测定ALP阳性染色率,Western blot法检测不同处理后Notch信号通路中Noth1、CBF1、Jagged-1蛋白表达情况,RT-PCR法检测淫羊藿苷对Hes1、Runx2 mRNA的影响。结果:与对照组比较,0.1~1.0 mg·L-1淫羊藿苷处理后ALP活性升高较明显,7~14 d内活性均逐渐升高,14 d时活性达到最大值,其中0.4 mg·L-1处理活性最高。因此,选择淫羊藿苷最佳处理质量浓度为0.4 mg·L-1。对照组、联合组在细胞培养7~14 d间,ALP活性逐渐升高,14~21 d活性逐渐下降,第21天ALP活性维持较低水平;诱导组在培养期间ALP活性持续维持较高水平。第7天、第14天,与对照组比较,诱导组、联合组ALP活性升高,且诱导组升高程度高于联合组,差异有统计学意义(P<0.05)。第21天,联合组ALP活性高于对照组、诱导组,差异有统计学意义(P<0.05)。诱导组、联合组ALP阳性染色率均高于对照组,且联合组高于诱导组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,联合组、诱导组Noth1、CBF1、Jagged-1蛋白表达量均升高,联合组蛋白表达量明显高于诱导组。RT-PCR结果显示诱导组Hesl、Runx2 mRNA表达量均高于对照组,联合组Hesl、Runx2 mRNA表达量高于诱导组。结论:淫羊藿苷能够促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,并通过上调Hesl、Runx2 mRNA表达以及增加Noth1、CBF1、Jagged-1蛋白表达来实现。     

肝细胞生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞的研究进展

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)最初发现于肝组织中,是一种多功能细胞生长因子,拥有促血管生成、促细胞分裂等作用.骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潜能.有研究[1]表明,将BMSCs与HGF联合起来,HGF可以抑制低营养引起的BMSCs凋亡,提高细胞存活率,同时BMSCs可以成为HGE基因理想的细胞表达载体.这可能成为组织工程和细胞治疗等领域的研究热点.本文就近年来HGF基因载体的转染效率,经HGF 修饰后的BMSCs (HGF-BMSCs)的生物学特性、其对实验动物模型的影响和HGF在口腔中的生物学作用等相关研究作一综述.     

骨髓间充质干细胞移植在儿童肾病综合征鼠模型中的实验研究

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)在儿童肾病综合征(NS)鼠模型中作用,探讨BMSCs移植治疗儿童NS的可能性。方法:分离、纯化、扩增和鉴定BMSCs。21日龄刚断奶的SD大鼠适应性喂养后,筛选尿蛋白浓度<0.8 g/L作为实验用鼠。随机选取5只实验用鼠作为正常对照称A组,其余实验鼠按照Bertani法尾静脉注射盐酸阿霉素制作MCNS鼠模型。成模后随机分成B、C、D组,每组5只,分别按计划注射生理盐水、泼尼松灌胃和注射BMSCs细胞悬液。各组大鼠按计划进行24 h尿蛋白定量和血肌酐检测。结果:造模前,各组24 h尿蛋白和血肌酐水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);造模后,B、C、D组24 h尿蛋白和血肌酐水平均升高,且A组24 h尿蛋白和血肌酐水平均低于其他三组(P<0.05);干预后1、4、8周,B、C、D组24 h尿蛋白和血肌酐水平均持续升高,C、D组24 h尿蛋白和血肌酐水平均低于B组(P<0.05),且D组干预后8周血肌酐水平低于C组(P<0.05)。结论:BMSCs移植可改善阿霉素诱导的肾损伤,降低蛋白尿和血肌酐水平。     

间充质干细胞治疗产品开发现状与趋势

目的:从产品开发角度分析间充质干细胞治疗产品的发展现状和未来趋势。方法:检索科睿唯安(Clarivate Analytics)的Cortellis数据库的数据,利用定量分析法和对比分析法对检索结果进行分析。结果:目前已有5种间充质干细胞治疗产品上市,9种间充质干细胞治疗产品处于注册及临床Ⅲ期,未来市场上的间充质干细胞治疗产品将呈现快速增长趋势。Mesoblast、FCB等公司在间充质干细胞治疗产品的拥有量上具有优势。间充质干细胞产业内部的商业交易也越来越多,目前共发生包括药物开发及商业化许可、专利资产出售以及早期药物研发合作等12起交易,其中药物开发及商业化许可是最主要的交易模式。尽管中国的间充质干细胞治疗产品研究尚处于起步阶段,但中国的西比曼生物、北科生物等公司已有多款产品处于临床阶段,中国本土的间充质干细胞治疗产品前景可期。结论:虽然间充质干细胞治疗产品市场尚处于起步阶段,但其技术发展快,市场需求大,相关企业产品研发与商品化积极性高,上升潜力巨大。     

骨髓间充质干细胞移植在肺气肿大鼠模型肺组织内定植研究

目的:观察骨髓间充质干细胞移植在肺气肿大鼠模型肺组织内的定植情况。方法:选择健康SD大鼠34只,按随机数字表法分为MSCs干预组(A组,10只,慢阻肺大鼠,尾静脉输注MSC 1×106个/mL),肺气肿模型组(B组,10只,慢阻肺大鼠,尾静脉输注等体积PBS)及MSC对照组(C组,10只,正常大鼠,尾静脉输注MSCs 1×106个/mL),正常对照组(D组,4只,正常大鼠,尾静脉输注等体积PBS),采用烟熏法复制大鼠肺气肿模型。全骨髓培养法体外培养扩增雄性SD大鼠来源的MSCs,经GFP标记细胞后将其经尾静脉注入肺气肿模型SD大鼠体内,24 h内处死大鼠,取肺组织迅速冰冻切片,共聚焦激光显微镜下观察观察转染GPF的间充质干细胞在大鼠肺内定植情况。结果:成功培养具有分化潜能的骨髓间充质干细胞,MSCs传至第4代时有99.5%表达CD44、99.6%表达CD29等间充质干细胞表面标志,仅有0.4%表达CD34、1.0%表达CD45单核细胞以及造血干细胞表型;成功复制大鼠肺气肿模型,香烟烟雾暴露组(A、B组)平均肺泡间隔为(119.0±26.2)μm,高于对照组(C、D组)的(89.8±17.3)μm,差异有统计学意义(P<0.05);平均肺泡数为(173.9±68.3)个/mm2低于对照组的(280.3±104.0)个/mm2,差异有统计学意义(P<0.05);显微共聚焦发现MSCs经尾静脉注入大鼠体内24 h后可见A组大鼠肺组织内转染绿色荧光蛋白质粒的MSCs,而B组、C组及D组均未见转染荧光。结论:骨髓间充质干细胞经尾静脉输注入后可在肺气肿模型大鼠肺内定植,为MSCs治疗慢阻肺可能提供理论依据。     

间充质干细胞输注治疗再生障碍性贫血研究进展

查阅相关文献,概述间充质干细胞对造血微环境、造血干/祖细胞、免疫功能、基因水平的影响。由于再生障碍性贫血治疗周期长且容易复发,而间充质干细胞有强大的增殖能力和多向分化潜能,可对免疫系统进行多项调节,因此具有良好的应用前景。     

型材允许偏差对钢结构设计的影响

对我国现行国家标准、行业标准、企业标准中,针对常用钢制型材生产加工精度的相关规定进行简要介绍。并根据结构设计特点,讨论钢板厚度允许偏差、热轧型钢截面允许偏差、冷弯型刚截面容许偏差对截面模量等设计参数的影响。提出考虑加工精度偏差的钢构件净截面系数建议值,并提出钢结构设计中有必要根据需要提出钢制型材加工精度要求的建议,为合理控制用钢量提供参考。     

土木结构振动控制中的时滞影响分析

时滞是振动控制过程中的较普遍的现象,时滞不仅降低控制系统的性能,严重时会导致系统失效。针对此实际问题,本文对时滞反馈系统的主动控制方法进行了研究,由单自由度系统入手,进而得出系统最大允许时滞量的解析确定方法。     

强风对高层钢框架结构的影响分析

分析强风对高层钢框架结构的影响,对于高层钢框架结构设计和现役高层钢框架结构寿命的预测有重要意义。基于实际台风的风速时程选取了5种不同强度的基本风压作用于一栋高层钢框架结构,运用ANSYS软件对受到强风作用后的高层钢框架结构进行了静力和模态分析。比较研究了高层钢框架结构受不同强度风荷载作用后的位移和内力的变化情况,探讨了高层钢框架结构受不同风荷载作用后的整体损伤情况,估算了台风对高层钢框架结构的损伤累积值的上限。     

支撑体系对大跨空间结构受力性能的影响

空间结构设计过程中易忽视支撑体系对整体结构受力性能影响的分析,通过对两种常见结构体系及实际工程分析,总结支撑体系对不同结构形式的影响规律。对于平面空间结构体系,若各榀桁架跨度及受力情况不同,支撑体系会协调各榀桁架的变形,改变单榀桁架内力分布;对于曲面空间结构体系,支撑体系可能会改变结构的传力路径,纵向支撑可能会在曲面内产生壳体内力,改变结构内力分布。因此,应对带有支撑体系的整体结构进行分析。     

钢结构住宅连接位置接缝处理方法研究

从现有钢结构住宅接缝处理常见问题出发,综合考虑住宅系统中围护墙板与主体结构、围护墙板之间、墙板与楼板、门窗洞口及特殊部位等的连接及接缝处理方法,系统总结钢结构住宅体系接缝处理构造方法,为装配式钢结构住宅系统设计人员和施工人员提供参考。     

土-结构相互作用对结构风振响应的影响

通过框架结构的风振响应计算，说明土-结构相互作用（简称SSI）对结构风振响应的影响，计算结果表明，在结构的风振响应分析中，考虑SSI并不总是安全的，在土中阻尼较小时，考虑SSI后，体系的第一频率较不考虑SSI时（即所谓的“刚性地基”）明显降低，而弹性位移反而较刚性地基时的值大，后一现象在相对刚度较小时更加明显。此外，考虑SSI后，无论结构高度如何，结构各楼层的总位移总是远无远大于刚性地基时的位移，这可能使人体产生明显的不舒适感，因此，在风振响应分析中应当考虑SSI效应。     

张弦梁结构若干参数对承载性能的影响分析

张弦梁结构已在我国大型工程中有所应用,但对该种结构的理论研究并不完善。通过分析在全跨荷载或半跨荷载作用下,初始缺陷、矢跨比、垂跨比和预应力水平对结构承载性能的影响,得出拱矢跨比基于承载性能的最优值。对张弦梁结构的设计具有有益的参考。     

大跨钢结构中钢棒自重对受力的影响

推导了钢棒挠度的精确计算公式 ,并通过简化方法给出了近似计算公式。通过算例分析了钢棒自重对跨中挠度、弯矩和应力的影响。     

多壁碳纳米管的分散效果对水泥净浆电学和力学性能的影响研究

研究分散处理后的多壁碳纳米管对水泥净浆材料的电学性能和力学性能影响。试验结果表明:多壁碳纳米管水泥净浆材料的电阻率随着测试频率的升高而降低,随养护时间的增长而增大。当多壁碳纳米管分散均匀时,电阻率随掺量的增加而减小,两者呈良好的相关性;当分散不均匀时,电阻率随多壁碳纳米管掺量变化不确定,呈现离散性。在低掺量条件下,当多壁碳纳米管在水泥净浆分散均匀时,多壁碳纳米管能提高水泥净浆的抗压强度和抗折强度,且提高幅度随多壁碳纳米管掺量增加而增大;而当多壁碳纳米管分散不均匀时,掺入多壁碳纳米管会削弱水泥净浆的抗折强度和抗压强度,其力学性能与多壁碳纳米管掺入量之间关系呈不确定性。     

综合疼痛护理干预措施在改善小儿腹股沟斜疝患儿疼痛状态中的作用

目的:探讨综合疼痛护理干预措施在改善小儿腹股沟斜疝患儿疼痛状态中的作用。方法:选取2016年6-12月在本医院儿科住院的30例小儿腹股沟斜疝患儿为对照组,2017年1-6月30例小儿腹股沟斜疝患儿为研究组。对照组给予常规疼痛管理,研究组给予综合疼痛护理干预。统计两组患儿手术返回后(T0)、手术返回后2 h(T1)和手术返回后4 h(T2)心率(HR)、血压(DBP、SBP)以及疼痛评分变化情况,观察两组患儿家属术前1 d、手术当天和出院时S-AI状态焦虑量表评分,比较两组患儿家属护理满意度。结果:研究组患儿T0、T1、T2时刻DBP、SBP均低于对照组,T1、T2时刻HR均低于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患儿T1、T2时疼痛评分均低于对照组(P<0.05);研究组患儿家属术前1 d、手术当天和出院时S-AI状态焦虑量表评分均低于对照组(P<0.05);研究组患儿家属护理总满意度为93.33%,高于对照组的63.33%(P<0.05)。结论:综合疼痛护理干预措施可显著改善小儿腹股沟斜疝患儿疼痛状态,降低生命体征波动,使患儿家属的焦虑状态得到缓解,提升患儿家属对护理的满意度。