菜芙蓉花乙醇提取物抗氧化性及抑制Hela细胞生长的研究

目的:研究菜芙蓉(Ablmoschus manihot(L.)Medic)花80%乙醇提取物的抗氧化能力以及对人宫颈肿瘤Hela细胞的生长抑制作用。方法:采用Fenton反应法、邻苯三酚自氧化法、DPPH法检测菜芙蓉花提取物对体外羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O-2.)、2DPPH自由基的清除作用并测定其还原力。MTT法评价菜芙蓉黄酮提取物对细胞生长的抑制效果。结果:菜芙蓉花提取物清除.OH、O-2.、DPPH自由基的能力随总黄酮质量浓度的增加而升高,EC50分别为170、20、8.7mg/L,其还原力是对照VC的两倍。菜芙蓉花提取物能够有效抑制肿瘤细胞的生长,且对Hela细胞的抑制作用与总黄酮质量浓度存在显著的剂量效应,IC50为228μg/mL。结论:菜芙蓉花提取物抗氧化性强,具有抑制Hela细胞生长的作用,是一种有效的天然抗氧化剂。     

山楂黄酮提取物的抗氧化活性和对癌细胞生长抑制作用

目的:研究山楂(Crataegus pinnatifida Bunge)黄酮提取物的抗氧化能力以及对人肝癌Hep-G2细胞和人肠癌Caco-2细胞生长抑制作用。方法:比较测定总黄酮含量的直接法和两种铝盐显色法,进一步采用硝酸铝盐显色法测定提取物总黄酮含量,ABTS法和DPPH法分析提取物的抗氧化活性,MTT法评价山楂黄酮提取物对细胞生长的抑制效果。结果:山楂黄酮提取物中黄酮含量占干质量的98%,清除ABTS和DPPH自由基的能力随提取物剂量的增加而升高,EC50分别为88μg/mL和112μg/mL,而标准品Trolox的EC50清除ABTS和DPPH自由基的能力分别为111μg/mL和118μg/mL。山楂黄酮提取物能够有效地抑制癌细胞的生长,且对Hep-G2细胞的抑制效果更强,Hep-G2细胞和Caco-2细胞的IC50分别约为115μg/mL和376μg/mL。结论:山楂黄酮提取物黄酮含量高,抗氧化能力强,有抑制癌细胞的作用,是一种有效的天然抗氧化剂。     

熊猫豆提取物抑制肿瘤活性及诱导结肠癌细胞Caco-2凋亡机制研究

为了探究熊猫豆的抑制肿瘤活性及其诱导Caco-2凋亡的机制,采用80%丙酮浸提法制备熊猫豆粗提物,通过MTT法测定其对人结肠癌细胞Caco-2增殖的抑制效果,琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、酶联免疫分析等技术与方法检测细胞周期、DNA及凋亡相关蛋白相对表达量的变化。结果发现,与空白对照组相比,0.1~1.0 mg/m L熊猫豆丙酮提取物对Caco-2细胞增殖有明显的抑制作用,且呈现剂量效应关系,IC50为0.72 mg/m L。0.4、0.6、0.8 mg/m L熊猫豆丙酮提取物处理72 h后的Caco-2细胞,可以观察到典型的凋亡细胞的梯状DNA条带,细胞周期G1期延长,Cyt C、caspase-9、caspase-3蛋白的相对表达量均有显著上升。熊猫豆丙酮能够抑制结肠癌细胞Caco-2增殖,这种抑制作用是通过阻滞细胞周期和诱导线粒体通路介导的细胞凋亡实现的。     

银条水苏糖抑制人结肠癌Caco-2细胞增殖的作用及机制

研究中国传统蔬菜银条中所含天然活性成分——银条水苏糖对人结肠癌细胞Caco-2增殖的抑制作用及其可能机制。采用无血清培养基培养Caco-2细胞,分析银条水苏糖对Caco-2细胞增殖的抑制作用,流式细胞术考察银条水苏糖对Caco-2细胞凋亡的影响,通过检测LDH释放率分析细胞损伤程度。结果表明:银条水苏糖对Caco-2细胞株具有生长抑制作用,且存在剂量和时间依赖关系,Annexin-V-PI双染的结果提示,Caco-2细胞凋亡率随着银条水苏糖浓度的升高而上升,同时比较各试验组Caco-2细胞LDH释放率,发现银条水苏糖抑制了Caco-2细胞还原丙酮酸为乳酸的能力,限制了Caco-2细胞能量通路,影响了细胞周期,进而导致细胞凋亡,说明抑制细胞能量通路,"饿死细胞"可能是银条水苏糖抗肿瘤作用的机理之一。     

Caco-2细胞模型用于乳源ACE抑制肽LL、LPEW的小肠吸收研究

通过建立并验证Caco-2细胞模型,分析血管紧张素转化酶(angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制肽LL、LPEW在小肠中的转运量,研究LL、LPEW的小肠吸收机制。从细胞形态、跨膜电阻和碱性磷酸酶活性3个方面验证Caco-2细胞模型可用性。分析ACE抑制肽LL、LPEW的Caco-2细胞转运量,LL的表观渗透系数(P_(app))为(275.17±8.28)×10~(-7 )cm/s,肠道吸收良好;LPEW的P_(app)为(5.13±1.49)×10~(-7) cm/s,相比于LL,肠道吸收量较低。加入旁路转运促进剂去氧胆酸钠、内吞抑制剂渥曼青霉素(Wortmannin)、肽转运载体竞争性抑制剂Gly-Pro,对比无抑制剂时LL的转运量,分析得到LL的跨膜转运机制可能为内吞途径。加入ATP能量生成抑制剂叠氮化钠、多药耐药蛋白抑制剂MK-571、P-糖蛋白抑制剂维拉帕米,对比无抑制剂时肽LL的转运量,得出LL没有外排作用,所以LL肠道吸收较好。     

乳清蛋白Maillard反应产物对Caco-2细胞抗增殖抑制的影响

利用Caco-2细胞培养技术,结合MTT检测法,研究乳清分离蛋白(WPI)和还原糖(核糖、半乳糖以及乳糖)的美拉德(Maillard)反应产物对Caco-2细胞生长抑制的影响,以判断乳清蛋白Maillard反应产物的毒理学特性.结果表明,加热处理时间为0,2和4h的乳清蛋白Maillard反应产物,在作用Caco-2细胞质量浓度在0.01～2 g/L范围内,随着Maillard反应产物浓度的增加,Caco-2细胞存活率降低.在相同的作用质量浓度条件下,不同加热处理时间的乳清蛋白Maillard反应产物对Caco-2细胞存活率影响差异显著,即加热处理时间越长的乳清蛋白Maillard反应产物,对Caco-2细胞抑制作用越大.加热处理时间为4h的WPI、WPI-核糖、WPI-半乳糖和WPI-乳糖的Maillard反应产物对Caco-2细胞存活率分别为68.7％,87.5％,86.8％和70.9％,这说明乳清蛋白Maillard反应产物对Caco-2细胞生长具有微弱抑制作用,可作为功能性基料,在食品工业中广泛应用.     

白茶乙醇提取物体外抗氧化活性研究

研究福鼎白茶乙醇提取物的体外抗氧化能力及其对人结肠腺癌Caco-2细胞氧化损伤保护效果。采用化学比色法测定白茶提取物中茶多酚和总黄酮物质含量。利用二苯代苦味酰基自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和超氧阴离子(O₂^-)自由基清除率及总还原力来评价白茶乙醇提取物的体外抗氧化能力。此外,建立过氧化氢(H₂O₂,150 μmol/L)诱导的人Caco-2细胞氧化损伤模型来评估白茶乙醇提取物对氧化损伤细胞的保护效果。MTT法测定白茶提物对细胞生存率的影响。细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平按说明书使用试剂盒测定。丙二醛(malondiadehycle,MDA)的含量以硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)测定。结果表明,白茶乙醇提取物含较丰富的茶多酚(343.00±27.90 mg没食子酸/g)与黄酮类(24.95±0.56 mg芦丁/g)物质,并具有良好的DPPH自由基(半清除浓度为330.63 μg/mL)、超氧阴离子清除力(半清除浓度为342.90 μg/mL)及较强的总还原力。同时,白茶乙醇提取物可抑制H₂O₂对Caco-2细胞所造成氧化损伤并提高其生存率至85.6%。白茶乙醇提取物还能提高受损细胞内SOD和GSH-Px的活性,并能降低由于氧化应激损伤所导致的细胞损伤标记物MDA水平的升高。综合而言,白茶乙醇提取物具有较强的体外抗氧化能力并对氧化损伤细胞有较好的保护作用。白茶提取物对氧化应激损伤细胞的保护作用可能与其所含有的茶多酚和黄酮类物质有关。     

中国沙棘乙醇提取物的体外及对HepG2细胞的抗氧化活性

本文从生化角度全面分析了中国沙棘乙醇提取物的体外抗氧化活性,并在评价细胞毒性的基础上,以Hep G2细胞为模型,利用流式细胞仪评估了提取物的细胞抗氧化能力。结果表明,中国沙棘乙醇提取物对ABTS自由基具有良好的清除效果,当浓度为5 mg/m L时,其清除能力与阳性对照BHT相当;中国沙棘乙醇提取物对NO自由基也有良好的清除效果,但其整体清除能力不及BHT;当浓度为5 mg/m L时,中国沙棘乙醇提取物对亚油酸脂质过氧化表现抑制,但其抑制效果低于BHT;中国沙棘乙醇提取物的总抗氧化能力随浓度的增大而增强,当浓度为5 mg/m L时,其总抗氧化能力与同浓度下的BHT接近。在浓度为0.05~5 mg/m L范围内,中国沙棘乙醇提取物对Hep G2细胞不显示毒性;当处理浓度为0.5、1、5 mg/m L时,中国沙棘乙醇提取物的阳性细胞率与阳性对照相比分别降低了75.22%、72.36%和78.2%。中国沙棘乙醇提取物不仅在体外条件下具有良好的抗氧化活性,而且在Hep G2细胞内表现出良好的抗氧化能力。      

共轭亚油酸混合物对人结肠癌细胞(Caco-2)的抑制作用

研究不同浓度、不同作用时间的共轭亚油酸混合物对人结肠癌细胞Caco-2增殖的影响。采用体外细胞培养方法，通过MTT试验，观察不同浓度、不同作用时间的共轭亚油酸混合物对Caco-2细胞的增殖抑制作用。结果表明：共轭亚油酸混合物抑制了Caco-2细胞的增殖。且对Caco-2细胞增殖的抑制作用与浓度和作用时间密切相关。共轭亚油酸混合物对人结肠癌细胞Caco-2的增殖有抑制作用。     

苦荞麸皮多酚抑制人结肠癌细胞Caco-2增殖活性研究

研究了产自重庆酉阳的苦荞(Fagopyrum tartaricum L.Gaerth,FG1)麸皮和四川西昌的苦荞(Fagopyyrum tartaricum L.Gaerth,FG2)麸皮中酚类化合物的含量、抗氧化和抗增殖活性。结果表明:FG1和FG2 2种苦荞麸皮总酚含量分别为(26.40±0.41)和(27.00±0.72)mg GAE/g DW,且游离态是其酚类化合物的主要存在形式(约占其总酚含量的93%);2种苦荞麸皮酚提取物均表现出一定的抗氧化性,并且FG2的抗氧化能力强于FG1(P0.05),FG1和FG2的DPPH自由基清除能力总IC50值分别为(39.56±2.76)和(24.69±0.33)μg·mL~(-1);还原力总EC_(50)值分别为(97.92±1.4)和(73.18±4.32)μg·mL~(-1);在抗增殖试验中,与对照组相比,FG1和FG2游离酚提取物均能明显抑制人结肠癌细胞Caco-2增殖(P0.05)。然而,在不产生细胞毒性的浓度范围内,其结合酚提取物却表现出极弱的抗增殖作用。     

燕麦乙醇提取物分级萃取组分对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

选用不同极性的溶剂对燕麦乙醇提取物进行分级萃取,并对得到的4 种不同萃取组分进行体外DPPH 自由基清除能力、抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖能力及促进VSMC 释放NO 能力进行评价。结果发现：4 种组分中,乙酸乙酯萃取组分具有最强的DPPH 自由基清除能力,其EC50 值为(2.5 ± 0.4)mg/mL;通过抑制VSMC 增殖的实验研究发现,乙酸乙酯萃取组分能显著抑制VSMC 增殖,提高VSMC 产NO 能力。选用HPLC 对乙酸乙酯萃取组分进行初步分析发现其主要含有3 种蒽酰胺组分,分别为Bc、Bp 和Bf。     

烘焙工艺及杏仁种皮对杏仁油品质的影响

为探究不同烘焙工艺及杏仁中杏仁种皮的存在对杏仁油理化品质的影响,将带种皮杏仁和去种皮杏仁在130、160、190 ℃烘箱里,分别烘烤5、10、15、20 min,压榨得杏仁油,测定两种杏仁油的酸值、过氧化值、碘值、皂化值、色泽和脂肪酸含量。结果表明:低温130 ℃(5~10 min)、160 ℃(5、10 min)条件下烘焙制备的杏仁油酸值和过氧化值降低,其他理化指标变化不明显,油脂品质提高。随着烘焙温度继续升高,S-AKO(带种皮杏仁油)和N-AKO(去种皮杏仁油)酸值分别上升16.05%和26.76%,N-AKO过氧化值上升18.46%,S-AKO和N-AKO的碘值降低6.56%和10.74%,不饱和脂肪酸含量降低0.93%和0.76%,油脂色泽加深,高温长时间烘焙制备的油脂品质下降。两种杏仁油理化指标对比,S-AKO的品质更佳,杏仁种皮的存在对杏仁油产生有益的影响。此研究结果为加热预处理油料种子制备油脂,保证油脂品质提供理论依据和技术支持。     

不同杏品种果仁油脂的脂肪酸组成分析

为研究山西晋中地区不同杏品种果仁中脂肪含量与脂肪酸的组成特点,采用索氏提取、气相色谱分析法分析测定了15个杏品种果仁中的总脂肪含量及脂肪酸组成,结果表明:15个杏品种果仁中共检测出脂肪酸组分10种,总脂肪含量在28.11~53.15 g/100 g,其中不饱和脂肪酸占脂肪酸总含量的91.60%~95.15%,油酸与总脂肪含量之间呈极显著正性相关且油酸的偏相关系数最大;应用聚类分析可将其划分为"高含油率-高油酸-高亚麻酸""低含油率-高亚油酸""高含油率-高油酸-低亚麻酸"杏仁品种类型;根据主成分分析对杏仁的品质进行综合评价,扁杏综合评分最高。扁杏是高含油率-高油酸-高亚麻酸重要种质资源,该结果为杏栽培、育种及产业化的发展提供依据。     

苦杏仁多酚氧化酶的理化特性

研究苦杏仁多酚氧化酶粗提物的理化特性。结果表明：苦杏仁多酚氧化酶活性的最佳测定波长为410 nm,底物邻苯二酚最佳浓度为1.0 mol/L,Km和Vmax分别为20.53 mol/L和1.27 U/min,最适缓冲液pH值为7.40,最适反应温度和时间分别为40 ℃和3 min。热稳定性实验表明：苦杏仁多酚氧化酶在30～50 ℃范围内,热处理时间对其活性影响较小;在60～100 ℃范围内,随着温度增加酶活力也随之快速下降,使苦杏仁多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性丧失50%所需时间从60 ℃的15 min缩短到100 ℃的3 min左右。     

杏仁种皮黑色素提取工艺优化

以杏仁种皮为试验材料,采用碱溶解酸沉淀的方法提取黑色素,以氢氧化钠溶液浓度、提取温度、提取时间、料液比为考察因素,以黑色素得率为指标,通过单因素和正交试验,研究山杏种皮黑色素的提取工艺。结果表明：氢氧化钠浓度、提取温度、料液比3个因素对黑色素的得率均表现出极显著(P＜0.01)影响;3个因素对黑色素提取得率影响的主次顺序为提取温度＞氢氧化钠浓度＞料液比;最佳工艺为氢氧化钠浓度0.4mol/L、提取温度80℃、提取时间6h、料液比1:20(g/mL),黑色素得率达到7.2%。     

蒲公英黄酮类醇提物对食管鳞癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:研究蒲公英黄酮类醇提物对人食管鳞癌细胞(Esophageal squamous cell Carcinoma,ESCC)增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法:采用CCK-8法检测蒲公英黄酮类醇提物对ESCC细胞增殖的影响;通过细胞划痕和Transwell迁移实验检测药物对ESCC细胞迁移和侵袭的影响;Western blot法初步分析药物对细胞迁移和侵袭的作用机制。结果:蒲公英黄酮类醇提物对食管鳞癌细胞增殖呈时间和浓度梯度依赖性,且随着浓度增加明显抑制ESCC细胞的迁移和侵袭;蒲公英黄酮类醇提物呈浓度依赖性增加上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin的蛋白表达量,减少N-cadherin、Snail-1、ZO-1等蛋白的表达量。结论:蒲公英黄酮类醇提物显著抑制ESCC细胞增殖,并且通过阻遏EMT,进而抑制ESCC细胞迁移和侵袭能力,为蒲公英防治食管鳞癌提供有效实验依据。     

核桃青皮乙醇提取物对采后无花果的保鲜效果

为解决无花果采后贮藏保鲜和核桃采收后核桃青皮资源浪费的问题,本文探究核桃青皮提取物对无花果的保鲜作用。以硬度、可滴定酸含量、维生素C含量、呼吸速率为指标,在常温环境和低温(0±2) ℃条件下,测定浓度为3%、5%的核桃青皮乙醇提取物和0.3 mol/L CaCl₂处理后无花果的生理生化变化情况。结果表明:在常温环境保存5 d后,5%的核桃青皮乙醇提取物处理无花果的硬度、可滴定酸含量、维生素C含量、呼吸速率分别为4.52 N、0.19%、25.83 mg/100 g、25.99 mg CO₂/(kg·h),在低温环境冷藏30 d后,5%的核桃青皮乙醇提取物处理无花果的硬度、可滴定酸含量、维生素C含量、呼吸速率分别为5.42 N、0.14%、35.83 mg/100 g、15.64 mg CO₂/(kg·h)。在常温和低温环境下5%的核桃青皮乙醇提取物对无花果果实的保鲜效果仅次于0.3 mol/L CaCl₂化学处理组,且无花果果实的品质和风味均能得到较好的保持,故选择5%核桃青皮乙醇提取物作为植物源保鲜剂。     

超临界CO2处理对苦杏仁皮不溶性膳食纤维部分特性的影响

研究超临界CO2处理对苦杏仁皮不溶性膳食纤维部分特性的影响,以不溶性膳食纤维的持水力和膨胀力为响应值,超临界CO2处理的压力、时间和温度为变量,采用响应面优化法对超临界处理参数进行了优化。结果表明：在本研究实验条件下,经超临界CO2处理后不溶性膳食纤维的持水力和膨胀力分别有5.6%～44.13%和5.3%～38.5%的提高幅度;而且颜色变浅、颗粒更细,内部螺旋结构遭到一定程度破坏。表明超临界CO2处理可以作为对不溶性膳食纤维进行适当改性的有效方法。