印度毛霉MJ229固态发酵产凝乳酶的研究

由于从小牛皱胃中提取的皱胃酶已无法满足干酪生产的需要,因而不得不寻找其他凝乳酶来替代小牛皱胃酶.本研究在前期小试实验基础上,研究毛霉MJ229固态发酵产凝乳酶的中试制备条件.确定其固态发酵培养基配方为:大米、麸皮和稻草的质量比为5:4:1,吐温-80为0.3％(w/w);加入自来水使液固比为1:1,最佳载曲量为每盘3kg.分别在自然状态与调控水分和温度状态下进行曲盘固态发酵试验,结果表明,毛霉MJ229在调节状态下发酵48h后获得凝乳酶活力可达5333Su/g,与自然发酵条件相比提高了25％.     

凝乳酶及其代用品

前言干酪的生产可能起源于8000年前伊拉克的美索不达米亚。最初人们生产干酪的目的就是想通过降低水分活性,即盐、乳清分离和乳酸发酵的低pH值的方法来保藏食品。从哺乳小牛的胃中提取的小牛凝乳酶(Calf rennet历来是干酪加工中所使用的传统酶。近十多年来,由于干酪产量的增长,越来越多小牛的宰杀,造成了小牛凝乳酶价格的上涨。同时,由于有些地区受宗教戒律的影响,从而使得人们开始寻找各种合适的小牛凝乳酶代用品,来满足需要。     

Paenibacillus spp.BD3526发酵小麦麸皮生产凝乳酶

对Paenibacillus spp.BD3526凝乳酶的发酵条件和凝乳性能进行了研究,探讨了不同培养基、发酵时间、碳源、氮源和装液量对凝乳酶活力和活菌数的影响,并与商业化的小牛皱胃酶、重组凝乳酶、Rhizomucor miehei来源凝乳酶进行凝乳性能比较。实验结果表明:发酵时间、碳源、氮源和装液量对BD3526凝乳酶活力(milkclotting activity,MCA)和蛋白水解活力(proteolytic activity,PA)均有不同程度的影响。选用小麦麸皮培养基进行发酵至24 h时,MCA达到最大至3 279.76±67.11 SU/m L,凝乳性能强,PA值在整个发酵期间变化不大;添加碳源或氮源会不同程度地降低MCA值;装液量为30 m L时,发酵上清液中菌体浓度最高、MCA达到6 000 SU/m L。与商业化的凝乳酶相比,BD3256凝乳酶在凝乳过程中未使凝乳块产生过度水解,也无乳清析出现象,具有应用到干酪生产中的潜力。     

中国曲中凝乳酶高产菌株的筛选及产酶条件的研究

目的:从中国曲中筛选凝乳酶高产茵株以代替小牛皱胃酶作凝乳剂.方法:采用酪蛋白平板进行初筛,测定茵株发酵产酶活力并进行复筛,研究其产酶发酵条件.结果:经多次复筛选育出1株高产凝乳酶活力茵株 Rhizopus arrhizus F34.碳源种类对该菌株产酶影响较大,无机氮源对产酶有抑制作用;MgSO4、FeSO4、ZnSO4对产酶也有较大的抑制作用,CaC12、KC1有利于凝乳酶的产生;pH、发酵温度和发酵时间对F34菌株产酶影响显著.结论:F34菌株产凝乳酶的最佳发酵培养基是:米粉麸皮水解液4.5%、豆粉水解液4.0%、CaC12 0.3%、KC10.5%;最适发酵条件:初始pH 4.5,发酵温度34℃,培养时间60 h.     

凝乳酶的研究进展

传统干酪制作使用的凝乳酶来源于小牛皱胃,目前小牛皱胃酶的供应量仅能满足世界干酪产量所需凝乳酶的20%～30%。小牛皱胃酶的供需矛盾和价格高昂等因素,使得寻求其替代物成为乳品领域科学研究的热点之一。本文首先介绍了小牛皱胃酶的研究现状,其次从动物、植物、基因重组以及微生物来源,综述了不同凝乳酶之间酶性质差异以及凝乳酶在干酪应用中的研究,旨在为凝乳酶的研究提供一定的理论参考,为寻找凝乳酶替代物提供思路。     

不同凝乳酶在干酪生产中应用效果的研究

对不同凝乳酶在干酪生产中的凝乳特性、干酪出品率及成熟2个月的干酪品质进行了研究。结果表明,小牛皱胃酶和羔羊皱胃酶是干酪生产的最佳凝乳酶;其次为毛霉凝乳酶和胃蛋白酶;木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶应用效果较差。在小牛皱胃酶和羔羊皱胃酶中添加20%木瓜蛋白酶或25%毛霉凝乳酶,可获得较为理想的效果。     

Rhizopus sp.052凝乳酶的部分酶学性质

Rhizopus sp.052在pH1~7范围内,4℃条件下稳定。凝乳酶的最适作用温度为40℃,55℃保持20min完全失去活性,与小牛凝乳酶性质相似,而热失活的温度低于小牛凝乳酶。Rhizopussp.052凝乳酶对热不稳定的特性有利于干酪副产品乳清的加工处理。Rhizopussp.052凝乳酶对酪蛋白的水解能力比蛋白酶低,比小牛凝乳酶高,可以用于干酪的生产。对N-末段15个氨基酸序列GTGSVPVTDYQNDVE进行检索,结果表明,Rhizopus sp.052凝乳酶与其他菌株相比不完全相同,尚未见有研究者对其进行研究和报道。     

不同凝乳酶对切达干酪成熟的影响研究

本文比较了米黑毛霉凝乳酶、小牛皱胃酶和木瓜蛋白酶制备的切达干酪成熟期间的感官品质和理化性质。结果表明,小牛皱胃酶和米黑毛霉凝乳酶制作的干酪在成熟期60d和90d时,感官评价值达到最大,在90d成熟期内,木瓜蛋白酶干酪的感官评分值始终低于小牛皱胃酶和米黑毛霉凝乳酶;在干酪成熟期间,三种干酪在水分含量、pH、总氮、pH 4.6-SN以及12%TCA-SN含量的变化趋势一致;在成熟期0-90d内,三种干酪蛋白降解程度是小牛皱胃酶干酪米黑毛霉凝乳酶木瓜蛋白酶;在成熟期0-30d时,小牛皱胃酶和米黑毛霉凝乳酶对总氮影响差异不显著(P0.05),成熟期0-30d和60-90d时,这两种酶对干酪pH 4.6-SN以及12%TCA-SN影响差异不显著(P0.05)。     

解淀粉芽孢杆菌GSBa-1凝乳酶在马苏里拉干酪中的应用

对分离自酒曲的1 株解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵所产凝乳酶进行研究,该酶凝乳活力高而蛋白水解活力低,纯酶凝乳活力可达1.46×106 SU/g;使用该凝乳酶和商品凝乳酶制作马苏里拉干酪,并对干酪理化成分、成熟过程中pH值和微生物指标及干酪成熟前后质构特性、游离脂肪酸、可溶性蛋白、风味和干酪性能等指标进行对比分析。结果显示,理化成分上菌株凝乳酶与商品凝乳酶制作的干酪相接近（P＜0.05）。干酪在成熟过程中,发酵剂存活数先增加后减少,但其差异不大;菌株凝乳酶制作的干酪pH 4.6可溶性蛋白含量较多,干酪的游离氨基酸总量（76 mg/100 g）也高于商品凝乳酶制作的干酪游离氨基酸总量（55.3 mg/100 g）;菌株凝乳酶制作的干酪质构特性优于商品凝乳酶制作的干酪;电镜结果显示,菌株凝乳酶制作的干酪内部网状结构更充实;菌株凝乳酶具有稍强的蛋白水解活力,导致其制作的干酪风味物质种类多于商品凝乳酶制作的干酪,风味物质更加丰富。干酪样品的保形性和拉丝性实验测定结果显示,2 种凝乳酶制作的干酪性能差异不大（P＞0.05）;对2 种凝乳酶制作的干酪进行感官评定,其总评分相接近。以上结果表明,解淀粉芽孢杆菌GSBa-1凝乳酶在一定程度上可代替小牛凝乳酶应用于马苏里拉干酪的生产。     

夸克生产中凝乳酶筛选的研究

本文以凝乳酶活力、夸克出品率和感官指标为依据,对凝乳酶在夸克生产中的应用进行了研究。结果表明,各种酶的综合性能顺序为:小牛皱胃酶>羔羊皱胃酶>木瓜蛋白酶>乳猪皱胃酶>毛霉凝乳酶>无花果蛋白酶>胃蛋白酶。利用正交试验对性能较好的前三种酶进行优化设计,确定夸克生产中酶的最佳复配添加量为:100L牛乳中加入小牛皱胃酶0.3g、羔羊皱胃酶0.2g以及木瓜蛋白酶0.15g。     

不同凝乳酶生产干酪成熟期间氨基酸的变化

以鲜奶为原料,以进口的EZAL、MAOLL作发酵剂(由乳油连球菌和乳酸链球菌组成),以微生物酶、羔羊皱胃酶、小牛皱胃酶和猪胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶作为凝乳酶生产硬质干酪,研究不同凝乳酶对干酪成熟期间氨基酸变化的影响。结果表明:不同凝乳酶生产干酪成熟期间氨基酸(FAA)含量的变化趋势:羔羊皱胃酶>小牛皱胃酶>微生物凝乳酶>无花果蛋白酶>猪胃蛋白酶>木瓜蛋白酶。     

混料设计优化牦牛“曲拉”凝乳酶干酪素的工艺及产品的性质分析

为提高牦牛产业的附加值,以牦牛乳提取酥油后进行凝固沉淀,再经自然发酵、风干而成的蛋白质含量丰富的产品“曲拉”为原料,采用胃蛋白酶、木瓜凝乳酶和酵母凝乳酶复配成混合凝乳酶,通过单因素实验和混料设计对凝乳干酪素的制备工艺进行研究,并对干酪素的理化性质、红外光谱特性、热力学性质进行分析。结果表明,混合酶质量分数1%(其中胃蛋白酶∶木瓜凝乳酶∶酵母凝乳酶的质量比为0.60∶0.18∶0.22),在pH 6.3、45℃、添加质量分数CaCl 21%条件下,凝乳30 min,出品率为80.35%。混合酶法制备干酪素的理化性质、红外光谱特性和热力学性质与小牛皱胃酶干酪素差异不显著,而且符合GB31638—2016要求。     

用于干酪生产的凝乳酶与小牛皱胃酶的制备

目前在世界各国干酪生产中使用的天门冬氨酸酶(EC3.4.23),无论何种来源,因其均能凝结牛奶,故称为凝乳酶(milk-clotting enzymes)。从哺乳动物器官中提取的含有天门冬氨酸酶的制品为粗制凝乳酶(rennet)。在国际市场上,用于干酪生产的商品化凝乳酶的来源可分为;动物80%、微生物20%,植物不到1%。小牛皱胃酶(calf rennet)多年来在各国的干酪生产中广为使用,它存在于小牛第四胃中,凝乳酶含量为70～90%。另外还含有胃蛋白酶,一般适合于制造各     

根霉产凝乳酶的固态发酵条件优化

对根霉产凝乳酶固体发酵条件进行研究。通过单因素分析和响应面试验设计,确定根霉产凝乳酶的发酵条件及发酵培养基的最佳组成为:24℃发酵7d;麸皮与江米质量比为0.96:1、培养基固液比(m/V)为0.99:1、奶粉添加质量分数为0.81%,所产的凝乳酶活力达到72.92SU/mL。     

凝乳酶及其在干酪生产中的应用

凝乳酶是制造干酪过程中起凝乳作用的关键性酶。本文介绍了凝乳酶的一般特性、小牛皱胃酶的代用品及其鉴别，以及凝乳酶在干酪生产中的应用。     

山羊乳农家干酪加工中凝乳酶的筛选研究

选取5种凝乳酶应用于山羊乳农家干酪加工,通过不同凝乳酶在山羊乳农家干酪生产中的凝乳特性、干酪出品率及对干酪品质影响三方面试验研究,结果表明:液态小牛皱胃酶是山羊乳农家干酪加工的最佳凝乳酶,微生物凝乳酶次之,番木瓜蛋白酶不适合使用。     

树木凝乳酶的研究与应用

引言凝乳酶(Chymosin)是制造干酪时凝固牛乳用的酶制剂,传统方法是将出生10天至30天的小牛屠宰,从其第四胃中用盐浸提出来制成粉末、片剂或液体加以应用,又称为粗制凝乳酶(Rennet)。但进入60年代以后,由于全世界食肉量剧增,小牛一般要育成肉牛而使其屠宰数大为减少,凝乳酶的供需矛盾日益突出。因此,以各种生物组织及     

凝乳酶对发酵乳特性影响研究

凝乳酶可专一性水解酪蛋白Phe105-Met106之间的肽键,改变发酵乳的凝胶结构,有利于凝固型发酵乳的运输和贮藏。实验对添加凝乳酶及氯化钙的发酵乳特性进行研究,综合凝乳时间、发酵终点酸度、凝胶强度、黏度、感官评价等指标确定了凝乳酶及氯化钙的最佳添加量。凝乳酶的添加量为0.00050%,氯化钙的添加量为50μL/100 mL(1 mol/L的氯化钙溶液)。采用SDSPAGE电泳法对贮藏期间发酵乳的多肽分布进行分析,其相对分子质量主要集中在(10~20)ku。添加凝乳酶的发酵乳多肽相对分子质量比同一贮藏时间的空白组发酵乳的分子质量小,说明添加凝乳酶的发酵乳的蛋白水解能力较强。在冷冻扫描电镜观察下,同一贮藏时间,添加凝乳酶的发酵乳凝胶结构与空白组发酵乳相比,其网状结构更加连续、致密、均匀、坚固,从而在贮藏期间发酵乳的物理稳定性较高,发酵乳品质好。因此,凝乳酶可以添加于发酵乳中,提高发酵乳的物理稳定性,使其更具市场竞争力。     

酒酿凝乳剂研制干酪初探

随着干酪生产量的增加，小牛凝乳酶出现世界性短缺，开发微生物凝乳酶代用品已势在必行，本文进行了采用酒酿代替小牛凝乳酶制作干酪的研究。主要研究了采用不同的酒酿用量、凝乳温度、凝乳时间和加热排乳清温度对制作干酪的影响，其最佳工艺参数为：酒酿用量5％，凝乳温度25℃，凝乳时间15-17h，加热排乳清温度45℃。     

猪胃蛋白酶制备新鲜干酪及其特性分析

以新鲜猪胃黏膜为原料,提取并初步纯化得到猪胃蛋白酶(PPe),分别从化学成分、产率、质构3 方面研究PPe 在新鲜干酪中的作用效果。结果表明：在化学成分上,PPe 优于微生物凝乳酶,尤其中剂量效果最好;在质构特性方面,PPe 制得的干酪比微生物凝乳酶及市售猪胃蛋白酶制得的干酪更接近皱胃酶(CR)制得的干酪,且高剂量PPe 制得的干酪硬度、弹性、内聚性、胶黏性和咀嚼性均与小牛皱胃酶制得的干酪无显著差异(P ＞ 0.05)。PPe 优于微生物凝乳酶及市售猪胃蛋白酶,可以作为小牛皱胃酶的替代物应用于新鲜干酪的生产。