应用“克隆法”筛选流行性腮腺炎疫苗毒种

２０００年版《中国生物制品规程》（以下简称《规程》）要求腮腺炎疫苗的半成品滴度不低于４．７５ＬｏｇＣＩＤ５０／１．０ｍｌ,成品３７℃放置７ｄ前后滴度均不低于４．０ＬｏｇＣＣＩＤ５０／１．０ｍｌ。我们通过克隆法筛选主代种子批疫苗毒种,选育出毒力强且稳定性好的工作种子批腮腺炎疫苗毒种。 以常规方法用０．１２５％胰酶消化３个９日龄ＳＰＦ鸡胚,制备鸡胚细胞（ＣＥＣ）悬液６０ｍｌ,每毫升悬液含４×１０６个ＣＥＣ,分别按７×１０５个ＣＦＣ／孔和１０６个ＣＥＣ／孔各接种３个２４孔组织培养板,补加生长液至２．０…     

口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸的稳定性

目的　考察口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸保存在不同温度不同时间毒力的稳定性。方法　将糖丸分别放－２０、２～８、１８～２２和３７℃，并于保存１、１．５、２年；１～６个月；１～６周；１、２、５、７天进行滴度测定。结果　糖丸 放－２０℃２年，２～８℃６个月，１８～２２℃３周，３７℃２天，其毒力滴度仍能达到＞５．７０ＬｏｇＴＣＩＤ５０／ｄｏｓｅ的合格标准。结论口服脊髓灰质炎活疫苗糖丸稳定性良好。     

甲型肝炎病毒(H2株)快速适应变异株全基因序列分析

目的 探索甲型肝炎病毒（Ｈ２株）细胞适应的分于机制。方法 将甲型肝炎减毒活疫苗毒株（ＨＡＶ Ｈ２Ｋ７）在人胚肺二倍体细胞ＫＭＢ１７上快速连续传代增强适应（１４ｄ）,检测连续传代后抗原滴度和感染性滴度,测定 第１８代（ＨＡＶ Ｈ２Ｋ７Ｐ１８）全基因组序列。结果 适应至第１８代抗原滴度达１：５１２,感染性滴度为７．５ＬｏｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ。 整个基因组出现了１０个核苷酸突变,变异卒为０．１３％,变异较大区域位于５’末端非编码区（５’ＵＴＰ）,有３个核苷酸 变异。编码区７个交变,２个是无义突变,５个有义突变导致５个氨基酸变化,分别位于 ＶＰ２ Ａ－Ｓ;２Ｃ,Ｑ－Ｐ;３Ａ,Ｒ－ Ｃ;３Ｃ,Ｔ－Ａ和３Ｄ,Ｖ－Ｇ。结论 ＨＡＶ Ｈ２Ｋ７４因组５’ＵＴＲ、２Ｃ区、３Ａ区、３Ｃ区和３Ｄ区变异协同作用促进在 ＫＭＢ１７ 细胞上快速增强适应。     

保存条件和时间对狂犬病毒毒力的影响

在狂犬病疫苗生产过程中，制备出来的疫苗原液一般不能及时检定或分装，需要保存一定时间。为了解保存时间对原液毒力的影响，我们取沈阳安迪生物高科技公司同期生产的狂犬病疫苗原液６批，分装于无菌的青霉素瓶中，分别放－２０℃及４℃冰箱中保存，于不同时间取出，按《中国生物制品规程》方法进行毒力测定，结果疫苗原液在－２０℃冰箱中保存１周毒力未见改变，保存３、６、１０个月毒力下降０．０８０．５和０．８９ＬｏｇＬＤ５０／０．０３ｍｌ。原液在４℃冰箱保存２天毒力未见下降，保存５天和１０天毒力分别下降０．０８和０．４４…     

冻干乙型脑炎活疫苗在不同温度下保存对免疫力的影响

目的 了解冻干乙脑活疫苗在不同温度下保存对滴度及免疫力的影响。方法 冻干乙脑活疫苗 在不同温度下存放不同时间后,进行病毒滴度及免疫力检测。结果 疫苗在４－８％下存放１年半滴度稍有下降 （０．３２ＬｏｇＰＦＵ）,其免疫力仍稳定在高水平（ＩＤ５０＝４．１×１０－５;在 ２５℃下存放 １个月和 ３７℃下存放７ｄ,滴度分别下降 ０．３２和 ０．６５ＬｏｇＰＦＵ,其免疫力仍保持在较高范围内（ＩＤ＝８．８ ×１０－5和 ６．０×１０－５）;在５０℃下存放２４ｈ滴度和免疫 力均显著下降（近１０倍）;存放７２ｈ后基本无免疫力。结论 疫苗不论在４－８、２５、３７℃下存放,其滴度保持在４． ８７ＬｏｇＰＦＵ以上时,仍有免疫力;疫苗滴度不低于５．７ＬｏｇＰＦＵ／ｍｌ时,仍保持高免疫力。     

聚乙烯醇存在下耐尔蓝－铈钼、钪钼杂多酸体系连续光度测定铈和钪

在聚乙烯醇（ＰＶＡ）存在下，耐尔蓝（ＮＢ）与铈钼、钪钼杂多酸络阴离子形成离子缔合物，其最大吸收均位于５８５ｎｍ，表观摩尔吸光度分别为εｃｗ＝３．５２×１０６和εＳｃ＝３．５９×１０＿５Ｌ·ｍｏｌˉ１·ｃｍˉ１，铈和钪服从比耳定律的浓度范围分别为０～０．８μｇ／２５ｍｌ和０～２．０μｇ／２５ｍｌ，测定极限分别为１．３ｎｇＣｅ／ｍｌ（ｎ＝１０）和３．０ｎｇＳｃ／ｍｌ（ｎ＝７），对于０．０２μｇＣｅ／ｍｌ或０．０４μｇＳｃ／ｍｌ测定的相对标准偏差分别为２．７％（ｎ＝９）和２．８％（ｎ＝１０），离子缔合物的摩尔比分别为Ｃｅ：Ｍｏ：ＮＢ＝１：６：４和Ｓｃ：Ｍｏ：ＮＢ＝１：１２：３。本法用于地质标样分析，结果满意。     

硫代硫酸盐法添加氯化钠和十二烷基磺酸钠浸取金矿

对湖北氧化铁型金矿进行了Ｎａ２Ｓ２Ｏ３法添加ＮａＣｌ而不加Ｃｕ２＋的浸取条件优化研究,当［Ｓ２Ｏ２－３］＝０．８ｍｏｌ／Ｌ、［ＮＨ３］＝１～２ｍｏｌ／Ｌ、［ＮａＣｌ］＝１．０ｍｏｌ／Ｌ、浸取温度５０℃、浸取时间为３ｈ时,浸出率达到９８％．对广东河台、山东招远硫化金矿进行了浸取研究,当［Ｓ２Ｏ３２－］＝０．８ｍｏｌ／Ｌ、［ＮＨ３］＝２ｍｏｌ／Ｌ、［ＮａＣｌ］＝１．０ｍｏｌ／Ｌ、十二烷基磺酸钠１１．０ｍｏｌ／Ｌ、浸取温度５０℃、浸取时间３ｈ时,浸取率分别达到９６％和９３％．     

火山灰质混合材的一种简易测定法

１复合火山灰质组分的测定１．１方法原理根据我厂水泥中所掺加的火山灰质混合材页岩、烧粘土、熟料、石膏以及水泥五组分的各自不同的化学特性,分别测定其耗酸值和ＳＯ３,来推算混合材的掺加量。１．２主要试剂ＨＣｌ标准溶液：０．５ｍｏｌ／Ｌ;ＮａＯＨ标准溶液：０．２５ｍｏｌ／Ｌ;１％酚酞乙醇溶液;ＮａＯＨ标准溶液：０．０５ｍｏｌ／Ｌ。１．３操作方法１．３．１水泥耗酸值称水泥试样０．５ｇ,于２５０ｍｌ锥形瓶中,加水约２０ｍｌ,由滴定管准确加入０．５ｍｏｌ／ＬＨＣｌ标准溶液３０ｍｌ,以水冲洗瓶壁,在低温电炉上加…     

宇佐美曲霉酸性蛋白酶发酵工艺研究

宇佐美曲霉Ｌ３３５是一株分泌高单位酸性蛋白酶的产生菌,本研究采用单因素搜索和正交试验,通过摇瓶发酵和２Ｌ搅拌罐发酵,对其发酵工艺进行优化。结果表明,较适宜的发酵培养基（ｇ／１００ｍＬ）为黄豆粉５．０、玉米粉１．２、鱼粉０．８、ＣａＣｌ２ ０．５、Ｎａ２ＨＰＯ４ ０．２、ＮＨ４Ｃｌ１．０、蚕蛹水解液１０．０;通气量控制２５ｈ前为１：０．４ｖ／ｖ／ｍ、２５－５０ｈ１：１．０ｖ／ｖ／ｍ,５０ｈ后１：３ｖ     

甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)不同间隔时间加强免疫的效果

为进一步探讨甲型肝炎减毒活疫苗的优化免疫方案，我们进行了不同间隔时间加强免疫的效果观察，现将结果报告如下。 甲型肝炎减毒活疫茵（Ｈ２株）为浙江普康生物技术股份有限公司生产。滴糜为１０６．５ＴＣＩＤ５０／ｍｌ，每剂１ｍｌ，皮下注射。 观纂对象为浙江省台州市椒江区，随机挑选４个小学的学生，年龄在７－１３岁之间，以前从未接种过甲肝央苗，且抗－ＨＩＶ－ＩｇＧ队为阴性（ＥＬＩＳＡ法）。总人数２５９名，分别于第１针接种后６个月，１２个月，３年和６年接种第２针，观察抗－ＨＡＶ－ＩｇＧ阳转率及几何平均滴度（ＧＭＴ…     

高密度CaCO_3的制造

摘１４７４高密度ＣａＣＯ＿３的制造──Ｔｒｙｐｕｅ，Ｍｉｅｃｚｙｓｌａｗ等；波兰专利：１５８６７３。在２０～５０℃下把含有０．１～０．７ｍｏｌ／ｌＣａＣｌ＿２液体与索尔维制碱的碱液（含Ｎａ＿２ＣＯ＿３０．１～０．９ｍｏｌ／ｌ）反应。用缓倾法分离产生的...     

应用转基因小鼠作为脊髓灰质炎活疫苗神经毒力实验动物模 …

选用Ⅲ型脊髓灰质炎病毒,３批活疫苗样品（ＷＨＯ／Ⅲ,参考疫苗,９３／３６３和３Ｊ２批猴体神经毒力实验不合格的疫苗）和１株标准强毒株,脊髓内注入携带有人细胞脊髓同炎病毒受体转基因小鼠。临床观察和组织病理学检查表明,Ｌｅｏｎ病毒的毒力和极强,２．０ＬｏｇＴＣＩＤ５０可使１００％小鼠麻痹和死亡。ＷＨＯ／Ⅲ参考疫苗毒力最弱,５．５１ＬｏｇＴＣＩＤ５０才能使８１．７％小鼠力５１．７％小鼠死亡。另２种疫苗样品     

双硫腙水相显色测定至宝锭中的铜和汞

双硫腙水相显色测定至宝锭中的铜和汞杨辉许立芹康维钧（河北医科大学石家庄市０５００１７）实验条件Ｃｕ２＋Ｈｇ２＋测试波长／ｎｍ６５０５５０、６４０３ｍｏｌ／ｌＮａＯＨ用量／ｍｌ１．８～３．０１．８～３．０显色剂用量／ｍｌ０．５～２．００．５～２．０ＯＰ...     

石灰石矿夹石的充分利用

１概述我厂地处龙岩南郊 ,总规模为２条２０００ｔ／ｄ熟料的新型干法水泥生产线 ,一期工程已于１９９７年５月投产。投产初期要求石灰石进厂质量指标（质量百分数） :ｗ（ＣａＯ）＞５０%、ｗ（ＳｉＯ２） ≤３．５ %、ｗ（ＭｇＯ）≤２%。工厂自备石灰石矿位于厂区东部１０ｋｍ外的中甲 ,矿层赋存于石炭系上统船山组灰岩中 ,为一向ＮＥ缓倾的单斜矿层 ,倾角２０°～３０°,依赋存层位和岩性特征自下而上分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三层。全矿区矿石平均品位（夹石全部剔除）ｗ（ＣａＯ）５３．８５ %、ｗ（ＳｉＯ）１．７７ %、ｗ（ＭｇＯ）０．８３ %…     

由菱镁矿制备轻质氧化镁的研究

在硫酸铵摩尔数为１．１，反应温度１０２℃，反应时间２ｈ，沉淀剂配比为７．０ｇ（ＮＨ４）２ＣＯ３／２０ｍｌ浓氨水，沉淀温度８０￣９０℃，灼烧温度６００℃，灼烧时间为１ｈ的条件下，由菱镁矿制备轻质氧化镁，质量达到部颁特级品标准。     

α_1-抗胰蛋白酶制剂的制备及其病毒灭活

目的 从Ｃｏｈｎ　ＦⅣ中提纯α１－抗胰蛋白酶（α１－Ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ　α１－ＡＴ，制备较高纯度α１－ＡＴ制剂。方法 对Ｃｏｈｎ ＦⅣ抽提液经沉淀、超滤、离子交换及凝胶过滤，提纯 α１－ＡＴ用巴氏法（液态，６０℃，１０ｈ加热）作病毒灭活， 并考察其效果。用免疫单扩散、双向交叉免疫电泳、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及合成基质法检测α１－ＡＴ蛋白及生物活性。用区带 扫描法测定α１－ＡＴ制剂的纯度。结果３批试制的α１－ＡＴ制剂的纯度为９１．３±１．５２％，比活０．４９±０．０８μ／ｍｇ，比活性 比抽提液提高了２７．４倍。巴氏法处理可使ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、Ｐｏｌｉｏ　Ｉ型疫苗病毒分别降低１０．０±０．３，１０．０±０．３１及７．１１ ±０．３ｌｇＴＣＩＤ５０／ｍｌ，但仍能检出Ｐｏｌｉｏ型疫苗病毒。结论 可从 Ｃｏｈｎ ＦⅣ中制得较高纯度的 α１－ＡＴ制剂，巴氏法能对 α１－ＡＴ制剂作有效的病毒灭活处理。     

用先锋优质褐煤制取活性炭的研究

利用云南先锋优质褐煤，采用优化工艺制备出碘值大于８００ｍｇ／ｇ，比表面积１３３５．５ｍ＾２／ｇ和孔容积０．７８５ｍｌ／ｇ的活性炭。进行了ＣＯ２气体的饱和吸附，快速吸附和脱附试验；在不同ｐＨ值下对水中Ｃｒ＾６＾＋的吸附能力和Ｆｒｅｕｎｄｌｉｃｈ等温线评价试验：Ｋ＝３６．３，１／ｎ＝０．６９１，最佳ｐＨ＝５。     

顶空气相色谱法测定伊索拉啶中的乙醇残留量

本文用顶空气相色谱法测定了伊索拉啶中的乙醇含量，用ＧＤＸ－１０２色谱柱分离，ＦＩＤ检测。在０．１－２．０ｍｇ／ｍｌ范围内线性良好，样品和标准品的相对标准偏关分别为３．６％和４．５％。     

SiC晶须对Al2O3／TiB2／SiCw陶瓷刀具材料高温断裂韧性的影响

研究了不同ＳｉＣ晶须含量的Ａｌ２Ｏ３／ＴｉＢ２／ＳｉＣｗ陶瓷刀具材料的断裂韧性随温度的变化规律。结果表明：Ａｌ２Ｏ３／ＴｉＢ２／ＳｉＣＷ陶瓷材料的Ｋ１Ｃ在１０００℃内随温度的升高而增大；晶须含量越大，通过计算分析表明，随温度的升高粘裂时拔出的晶须大大增多，当晶须体积含量（下同）为２０％时，Ａｌ２Ｏ３／ＴｉＢ２／ＳｉＣｗ陶瓷在室温时只有长径比小于２．８７的晶须在断裂时才有可能产生拔出，而在９００℃时     

毛细管气相色谱法测定进口鱼油保健品中EPA、DHA含量

用Ｖ（苯）：Ｖ（石油醚）＝１：１的混合溶剂溶解鱼油,加入２ｍＬ０．４ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钾甲醇溶液,室温静置１０ｍｉｎ。加入蒸馏水使全部有机层升至瓶颈上部,上清液注入气相色谱仪分析。分离柱采用交联ＰＣ－ＷＡＸ－５７ＣＢ（５０ｍ×０．２５ｍｍ×０．２μｍ）毛细管色谱柱;分流进样;载气：Ｈｅ;线速度：８０ｃｍ／ｍｉｎ;分流进样,分流比：１：４０;汽化室温度：２２０℃;柱室温度：４０℃恒温２ｍｉｎ,以２０℃／ｍｉｎ升温至１６０℃,再以２℃／ｍｉｎ升温至２００℃恒温１５ｍｉｎ,以１℃／ｍｉｎ升温至２２５℃。检测器：ＦＩＤ,２５０℃;Ｃ－Ｒ４Ａ色谱专用数据处理打印机进行数据处理。采用内标法定量,以Ｃ２１：０脂肪酸甲酯为内标;ＥＰＡ和ＤＨＡ甲酯对内标Ｃ２１：０甲酯的ＲＲＦ分别为１．１６５±０．０１８和１．１８７±０．０２３;重复性试验：ＳＤ＜５％。经对１２份实际样品测定,结果可靠。