Lck激酶抑制剂的研究进展

淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase,Lck or p56Lck)是一种在T细胞和自然杀伤细胞中表达的Src家族的细胞质酪氨酸激酶。在T细胞活化中,Lck的激活是一个必要步骤,故选择性抑制Lck可以产生免疫抑制作用。此外,Lck激酶在其他细胞中的异位表达可以诱发细胞发生癌变,因此抑制Lck还能起到抗癌作用。本文综述了Lck激酶作用机理及近年来的Lck激酶抑制剂的最新进展。     

CDK抑制剂的研究进展

周期蛋白依赖性激酶是一类丝/苏氨酸激酶,是一种细胞内重要的信号转导分子。目前以细胞周期蛋白依赖性激酶为靶点的药物可以阻断细胞的周期,控制细胞的增殖,从而达到抗肿瘤的目的。文章简单的对几种与肿瘤相关的CDK抑制剂进行综述,对新的CDK抑制剂研发提供背景分析。     

离子交换树脂分离纯化FDP

磷的有机化合物对生命体有中枢控制作用,近年来受到世界各国科学家的高度重视。1.6-二磷酸果糖(Fructose 1,6-diphosphate,简称FDP)是在1908年由Harden young发现的,是由葡萄糖经细胞中葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶等作用下形成的。FDP临床药用结果表明,它能加强细胞内高能基团的重建作用,有保持红细胞的韧性及向身体组织释放氧气的能力,曾用于外科接受胃肠外营养疗法(TPN)的患者身上,矫正该疗法引起的细胞内有机磷显著减少     

蛋白质组学：一种新兴的杂草学研究技术

蛋白质组指由一个特定细胞表达的所有蛋白质（Wasinger等，1995），它不同于组织、器官、发育阶段及处理后的不同时段，蛋白质组是非常复杂又动态的。与之相反，基因组是指单个生物体的全部DNA分子，且较为稳定。蛋白质组学是对特定细胞、组织或机体内蛋白质组中蛋白质组成、结构、功能及相互作用的研究。     

细胞外信号调节激酶的研究进展

细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)是含有丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白质激酶,目前发现ERK1~ERK5共5个亚族,广泛存在于细胞浆内。ERK是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号转导系统组成部分之一,ERK信号通路可通过磷酸化多种底物蛋白在细胞生长、分化、应激及凋亡中起重要作用。本文就ERK信号通路在心肌细胞、神经细胞、肿瘤细胞及淋巴细胞中调节作用的研究进展作一综述。     

一锅法全细胞催化合成胞苷三磷酸的研究

分别在大肠杆菌BL21(DE3)中构建胞苷激酶(CDK)与乙酸激酶(ACK)的共表达及融合表达体系和胞苷酸激酶(CMK)与乙酸激酶(ACK)的融合表达体系,其中融合菌株SUMO-CDK-L2-ACK与CMK-L2-ACK构成的双融合催化体系具有较好的催化活性。搭建了双融合菌全细胞一锅法催化合成胞苷三磷酸(CTP)反应体系,并对其温度、pH、金属离子、乙酰磷酸投加量及菌粉投加量等进行优化。结果表明,在优化反应体系中,反应75 min时CTP产量达到最高为108 mmol/L,总收率达86.4%,实现了CTP的一锅法高效合成。     

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2在肿瘤中调控作用的研究进展

富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrsosine kinase 2,Pyk2)是一种非受体型酪氨酸激酶,与黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)共同组成黏着斑激酶家族。Pyk2在多种器官及组织中表达,受一系列因子激活,参与多条信号通路的信息传递,能够调节细胞的迁移、增殖、分化及凋亡等。在许多肿瘤中均发现Pyk2的异常表达,因此Pyk2可能成为肿瘤治疗的新靶点。本文就Pyk2的结构与分布、在多种肿瘤(骨髓瘤、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌)中的调控作用及其抑制剂的应用方面作一综述。     

纳豆激酶羟丙基-β-环糊精包合物的制备和鉴定

通过液体发酵、分离纯化生产高纯度纳豆激酶，制备和鉴定纳豆激酶-HP-β-CD包合物，并考察包合物的制备工艺与表征等。采用水溶液搅拌法辅助微波制备纳豆激酶HP-β-CD包合物，采用差热分析、酶活测定等方法对包合物进行鉴定。得到纳豆激酶-HP-β-CD的合格产品。纳豆激酶HP-β-CD包合物制各工艺筒单，包合物水溶性强，稳定性高，适合制成注射制剂。     

微小RNA在恶性肿瘤中对蛋白酪氨酸激酶6调控作用的研究进展

蛋白酪氨酸激酶6(protein tyrosine kinase 6,PTK6)是一种非受体酪氨酸激酶，在各类肿瘤的发生发展中起关键作用，且在肿瘤中的作用具有双重性。微小RNA(microRNA,miRNA)是一种调节转录后基因表达的小非编码RNA。近年来，越来越多的研究表明，miRNA对PTK6的调控作用在肿瘤中起重要作用。本文对在不同癌症中miRNA对PTK6表达的影响作一综述，以期为癌症治疗提供理论依据。     

小分子布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂专利分析

布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)是B细胞抗原受体信号转导通路中的关键激酶,目前已成为治疗血液恶性肿瘤和自身免疫失调疾病的热门靶标。针对肿瘤治疗与炎症控制而开发的小分子Btk抑制剂受到越来越多的关注。本文从Btk抑制剂的专利申请量趋势、技术目标国分布,主要技术发展脉络等方面,对Btk抑制剂的研发思路进行分析,梳理其各中心环系骨架之间的区别和联系,对多种结构的Btk抑制剂进行了详细介绍。     

RNA干扰整合素连接激酶基因表达对人舌鳞癌Tb细胞生长、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达对人舌鳞癌Tb细胞生长、迁移和侵袭能力的影响。方法将ILK siRNA表达质粒和阴性对照质粒在脂质体介导下转染人舌鳞癌Tb细胞,稳定表达细胞株分别命名为Tb siILK和Tb vector组,并设正常Tb细胞对照组(Tb组)。Western blot法检测细胞中ILK蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测细胞中ILK、p-Akt和p-GSK3β的表达;光镜和HE染色观察细胞的形态学变化;划痕试验检测细胞的迁移能力;Transwell法检测细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞的细胞周期和凋亡情况;MTT法检测细胞的增殖活力;Western blot法检测沉默ILK基因后细胞中p-Akt、Akt、p-GSK3β、GSK3α/β、Snail的表达。结果与Tb和Tb vector组相比,Tb siILK组细胞中ILK蛋白的表达水平显著降低(P<0.01);ILK、p-Akt、p-GSK3β在胞质中的荧光信号明显减弱;大部分细胞的上皮形态特征更为明显;细胞的迁移距离和侵袭细胞数显著减少(P<0.05);G2-M期和G0-G1期细胞比例均显著增加(P<0.01);细胞的增殖活力显著减低;ILK基因沉默后,细胞中p-Akt、p-GSK3β和Snail蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。3组细胞的凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑制ILK基因的表达可通过Akt/GSK3β/Snail途径显著抑制人舌鳞癌Tb细胞的生长、迁移和侵袭能力,ILK有望作为治疗人舌鳞癌的靶基因。     

套细胞淋巴瘤药物Acalabrutinib的合成研究进展

Acalabrutinib是阿斯利康Astra Zeneca公司研发的用于治疗套细胞淋巴瘤药物,属于第2代布鲁顿酪氨酸激酶BTK抑制剂。依据合成路线起始物料的不同,对Acalabrutinib合成工艺进行分析总结,以期为Acalabrutinib原料药生产和仿制药研发提供参考。     

表皮生长因子受体在肿瘤发生、发展中的研究进展

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种具有酪氨酸激酶活性的膜表面蛋白,普遍表达于人体的表皮细胞和基质细胞,并在人类多种肿瘤细胞中高表达。EGFR在一系列恶性肿瘤的发生发展中起重要作用,对促进肿瘤细胞生长、细胞增殖、血管生成、肿瘤细胞侵袭、转移及细胞凋亡均有一定的调节作用。EGFR的表达水平可作为判断多种肿瘤预后的指标。本文主要对EGFR在肿瘤发生和发展中的研究进展作一综述。     

动物病毒的生物化学

动物病毒千差万别，不仅大小形状，而且基因组的形式和组成，以及其表达和复制方式都存在差异。它们侵入细胞后，根据其基因组不同的表达机制可将动物病毒分成几类，其中包括：①一般DNA病毒，它利用寄主细胞的酶在核中转录并复制它的基因组；②细胞质中进行复制的DNA病毒，它自己带有一套酶用于mRNA的合成以及加工和复制等过程。     

肿瘤治疗关键靶点糖原合成酶激酶-3β的研究进展

糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)是一类广泛存在于真核细胞中的一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,广泛参与到多种细胞过程,包括增殖,分化,转移与凋亡等。GSK-3β抑制剂的合成已经成为一个重要的研究热点,虽然GSK-3β在肿瘤的生成与发展中的作用依然存在争议,它可以促进也可以抑制肿瘤的生长,但是GSK-3β在准确的评估下对于肿瘤治疗依然是一个非常有吸引力的靶点。文章对GSK-3β在肿瘤的发生与癌症进展中的作用以及其化学疗法进行了综述。     

PI3K/AKT信号在增强乳腺癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体敏感性中的作用及其机制

目的分析磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)通路是否通过长细胞caspase-8样抑制蛋白(cellular FLICE inhibitory protein,c-FLIP-L)的介导来影响乳腺癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)的敏感性,并探讨其机制。方法用40 nmol/L wortmannin(AKT活化的特异性抑制剂)、100 ng/ml TRAIL、40 nmol/L wortmannin+100 ng/ml TRAIL处理人乳腺癌MDA-MB-231细胞,并设空白对照组。MTT法检测药物作用24、48、72 h后的细胞增殖抑制率;流式细胞术检测药物作用48 h后的细胞凋亡率;Western blot法检测细胞中磷酸化AKT(pAKT)和c-FLIP-L的表达。结果TRAIL+wortmannin组24、48和72 h细胞增殖抑制率与其他组比较,均明显升高(P0.05);TRAIL+wortmannin组与TRAIL组和wortmannin组比较,可明显促进细胞凋亡(P0.05);随着wortmannin作用时间的延长,pAKT的表达水平明显降低,同时c-FLIP-L的表达水平也随之下降,而TRAIL对pAKT和c-FLIP-L的表达无明显影响。结论抑制PI3K/AKT通路可增强乳腺癌细胞对TRAIL的敏感性,这种作用可能是通过c-FLIP-L的介导来实现的。     

佛波醇十九步全合成

佛波醇,惕各烷二萜家族的成员,从发现到现在已经有80a,并已经吸引了许多科学家的注意。它形成的佛波酯(十四烷酰佛波醇乙酸酯,TPA或PMA)在医学方面有着不小的药用潜力。TPA是T淋巴细胞激活剂和皮肤粘膜潜在致癌剂,可在体内外激活蛋白激酶C,促进肝细胞i NOS的表达,抑制由Fas诱导的细胞凋亡,也可诱导HL-60白血病细胞凋亡,有着高度致癌活性及丝裂原活性。     

小鼠丝氨酸/精氨酸蛋白特异激酶2基因真核重组表达质粒的构建及其对微管蛋白聚合的影响

目的构建小鼠丝氨酸/精氨酸蛋白特异激酶2(serine/arginine-rich protein specific kinase 2,SRPK2)基因(srpk2)的真核重组表达质粒,并分析其对微管蛋白α-Tubulin聚合的影响。方法利用RT-PCR法扩增srpk2的全长cDNA序列,通过分子克隆技术构建真核重组表达质粒pLV-EGFP(2A)Puro-srpk2;在脂质体Lipofectamine 2000的介导下,将真核重组表达质粒及空载体pLV-EGFP2(A)Puro分别转染人胚肾HEK293T细胞,同时设空白对照组(未转染)。采用RT-PCR及Western blot法分别检测HEK293T细胞中srpk2基因mRNA转录及SRPK2蛋白的表达情况;Western blot法分析HEK293T细胞中聚合态和游离态α-Tubulin的含量。结果双酶切及DNA序列鉴定证明真核重组表达质粒pLV-EGFP2(A)Puro-srpk2构建正确,且在HEK293T细胞中实现了srpk2基因过表达。真核重组表达质粒转染组HEK293T细胞中游离态α-Tubulin含量显著低于空载体转染组及空白对照组(P0.05),而聚合态α-Tubulin水平明显高于空载体转染组及空白对照组(P0.05)。结论成功构建了srpk2基因的真核重组表达质粒,SRPK2可促进α-Tubulin微管蛋白聚合。     

细胞色素P—450在水稻和水莎草中的O—脱烷基化作用的不同活性

细胞色素P-450单氧化酶在所有的生物有机体中是重要的多蛋白质酶系统，其催化着内生的及异种有机基质的单氧化作用。在较高级植物中，植物微粒体细胞色素P-450构成了选择性除草剂的代谢和解毒作用的主要氧化途径，特别是，包括吡嘧磺隆在内的磺酰脲类除草剂的O-脱烷基化反应为影响选择性的主要因素，然而，在度管内，研究植物细胞色素P-450对除草剂代谢作用是很困难的，因为它比动物体中的细胞色素P-450水平低得多，另外，除草剂分子可能有比自然生成的基质细胞色素P450更少的基质，在试管内，这些阻碍常导致构成除草剂单氧化作用较低亦不易测得，有几种试验方法用来从植物体中获得较高微粒体细胞色素P-450活性，Weck-Reichhart等人最早报道了在植物体中细胞色素P-450的活性对乙氧基香豆素和乙氧基试卤灵的O-脱烷基化作用，这个敏感试验允许对细胞色素P-450的活性及其可能的诱导作用和抑制作用进行简单的测定，通常这些测定在试管内被用于预先处理的从发白植物组织中分离出来微粒体。     

默沙东和辉瑞开发出新型抗艾药物

辉瑞maraviroc抗艾药物。HIV必须和人体T细胞受体中的CXCR4或者CCR5接触，病毒被T细胞吸收到细胞内，变成细胞基因的一部分，利用T细胞来繁殖病毒。病毒繁殖以后，T细胞破裂，艾滋病毒再去感染其他细胞。maraviroc的作用机制就是阻断CCR5通道，辉瑞公司对1000多名病人进行了研究，受试者至少对3种ARVs产生耐药，maraviroc治疗组人数为安慰剂对照组的1倍，8个月后，治疗组的HⅣ水平基本检测不到。研究结果坚定了辉瑞提出上市申请的决心，预计在4月24日，FDA的一个顾问小组将对maraviroc进行讨论。如果得到批准，maraviroc最早可在今年夏天上市。