电沉积法构建AChE/COD@AuNPs共固定化酶生物传感器差分脉冲伏安法快速检测有机磷农药

有机磷农药残留危害环境和人类健康。本文采用电沉积法将乙酰胆碱酯酶(AChE)与胆碱氧化酶(COD)固定化,共修饰于裸金电极表面,构建新型固定化酶生物传感器。通过电子显微镜对固定化酶形貌进行表征,结果表明：当固定化酶生物传感器上,乙酰胆碱酯酶与乙酰胆碱氧化酶的共修饰层数为2层,修饰圈数为35圈,在氯化乙酰胆碱浓度为2 mmol/L,pH 7.8的检测体系中,该生物传感器能够识别有机磷农药信号,且检测性能尚佳。传感器在有机磷农药质量浓度为10^-9～10-7mg/L时电流响应良好,工作曲线方程为y=0.0468x+1.2124(R²=0.9985),最低检出限1.15×10^-11 mg/L(S/N=3)。本研究为现场快速检测有机磷农药提供了新的研究方法。     

基于纳米酶技术检测柑桔果实中葡萄糖

目的建立纳米酶检测体系快速检测葡萄糖含量的技术。方法采用甲烷氧化细菌的发酵代谢产物甲烷氧化菌素(methanobactin,MB)与Cu²⁺、纳米金(AuNPs)、葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,Gox)进行配位结合形成具有过氧化物酶和葡萄糖氧化酶性质的纳米酶检测体系,并对柑桔果实中葡萄糖含量进行测定。结果Gox浓度0.81 U/mL、MB-Cu@AuNPs模拟酶浓度2×10^-5mol/L、对苯二酚浓度5×10^-4mol/L、反应温度60℃、pH 8为最佳检测条件;反应时间5 min,葡萄糖浓度线性范围为1×10^-3-5×10^-2mol/L。结论纳米酶检测体系对柑桔果实中葡萄糖含量的测定具有良好的稳定性,相比较常规快速血糖仪检测速度更快。     

基于Bi2S3/rGO修饰电极对铅离子的检测

本文通过水热法制备了还原氧化石墨烯/硫化铋复合材料(Bi₂S₃/rGO)。利用扫描电子显微镜(SEM)对该材料的形貌进行表征。将制备的Bi₂S₃/rGO复合材料修饰到玻碳电极表面构建电化学传感器用于水中Pb²⁺的检测。在最优条件下,该传感器对Pb²⁺的检测浓度范围为5.00×10^-10-9.00×10^-7mol/L,检出限为2.13×10^-10mol/L。通过加标回收对实际样品进行检测,结果令人满意,为环境中Pb²⁺的检测提供了一种新方法。     

基于相对湿度的小麦淀粉/谷朊粉混合粉失水速率的调控

为探究相对湿度对小麦淀粉/谷朊粉基制品失水速率的影响规律,为失水速率调控奠定理论基础,以小麦面条主要组分富淀粉组分(淀粉)和富蛋白质组分(谷朊粉)为模式试验材料,设计淀粉占比分别为100%,90%,50%,25%和0%的淀粉/谷朊粉混合粉。调节环境的相对湿度构建样品水分活度与环境相对湿度差值逐渐降低(22%～2%)、基本不变(22%～22%)和逐渐增加(22%～37%)3种物理模型。分析混合粉在3种模型下的失水速率。结果表明,在水分活度与相对湿度差值逐渐降低模型、基本不变模型、逐渐增加模型中,淀粉占比100%,90%,50%,25%和0%混合粉的平均失水速率分别为2.26×10^-3～6.41×10^-3,2.20×10^-3～6.83×10^-3,3.06×10^-3～7.39×10^-3,3.74×10^-3～6.79×10^-3[(mg/mg含水量)/min]和4.31×10^-3～7.15×10     

基于方波伏安法的聚多巴胺@纳米银修饰玻碳电极测定畜禽肉中氯丙嗪

基于多巴胺(dopamine,DA)的自聚反应,在纳米银(sliver nanoparticles,AgNPs)和玻碳电极(glassy carbon electrode,GCE)表面形成聚多巴胺(polydopamine,PDA)膜,使AgNPs均匀分散在GCE表面,得到PDA@AgNPs/GCE修饰电极;对DA的自聚时间、氯丙嗪的电化学测试方法及条件等进行考察和优化,构建基于方波伏安法的氯丙嗪快速检测方法;利用循环伏安法、交流阻抗法和扫描电子显微镜对修饰电极进行表征。最佳条件下,氯丙嗪在PDA@AgNPs/GCE上的氧化峰电流与其浓度在5.0×10^-8～1.0×10^-5 mol/L范围内呈良好的线性关系(R²=0.991),检出限(R_SN=3)为1.7×10^-8 mol/L。用该法测定猪肉、鸡肉和牛肉中氯丙嗪的加标回收率分别为84.9%～88.8%、79.8%～93.8%、80.6%～93.9%。该方法所用测试仪器轻巧便携,修饰电极的制备方法简便易行、成本低、便于批量制备,...     

Fe对两株盐生杜氏藻(Dunaliella salina)生长和β-胡萝卜素积累的影响

研究了柠檬酸铁对两株盐生杜氏藻Dunaliella salina OUN04和D.salina OUN09生长和色素积累的影响,结果表明,D.salina OUN04生长最适的Fe浓度为0.05mmol/L,细胞密度达111.5×104cell/mL,0.25mmol/LFe组最低(70×104cell/mL);最大β-胡萝卜素含量(83.2mg/g)出现在0.25mmol/LFe浓度组中;Fe浓度为0.25mmol/L时有最大的叶绿素a含量(98.4mg/g);建立了杜氏藻对Fe吸收的动力学方程。D.salina OUN09生长最适的Fe浓度为0.05mmol/L(密度131×104cell/mL),最大β-胡萝卜素含量为130.2mg/g(0.05mmol/LFe组),对照组仅为70.4mg/g。     

二氢杨梅素对鲢鱼肌球蛋白理化性质及蛋白构象的影响

目的 探究二氢杨梅素对鲢鱼肌球蛋白理化性质及蛋白构象的影响机制,以及不同浓度二氢杨梅素对鲢鱼肌球蛋白的作用效果。方法 向鲢鱼肌球蛋白溶液中加入不同浓度的二氢杨梅素储备液,使溶液中的二氢杨梅素浓度为1×10^-5、2×10^-5、3×10^-5、4×10^-5、5×10^-5 mol/L,并设对照组(二氢杨梅素浓度为0 mol/L)。测定蛋白溶解度、浊度、总巯基含量的变化,检测混合液的傅里叶变换红外光谱、近紫外吸收光谱与内源荧光光谱。结果 鲢鱼肌球蛋白溶液添加二氢杨梅素后的混合液相较于对照组,蛋白溶解度先升高后降低,蛋白聚集程度显著提升,总巯基含量先升高后降低。傅里叶变换红外光谱在1700～1600 cm^-1与1600～1500 cm^-1两个波长区间出现最高的吸收峰,峰的位置略有蓝移,侧链基团受到二氢杨梅素的影响,二级结构发生改变。内源荧光光谱的最大吸收峰位置发生红移,近紫外吸收光谱的酪氨酸与色氨酸吸收峰位置略有红移,三级结构发生改变。综合考虑二...     

分料发酵红酸汤乳酸菌和酵母菌的分离鉴定及应用

为挖掘传统发酵红酸汤功能菌株,从分料发酵的优质番茄酸汤、辣椒酸汤和混合酸汤中分离乳酸菌和酵母菌,对其耐酸、耐胆盐、产酸、产香、抗氧化能力进行评价,通过分子生物学鉴定表明,筛选出两株乳酸菌lt1-6和lc2-1分别是Lentilactobacillus buchneri、Pediococcus ethanolidurans,产酸能力分别为(7.41±0.02) g/kg和(7.92±0.01) g/kg,筛选出一株产浓郁水果香的酵母菌ym1-3是Kazachstania bulderi。用L.buchneri和P.ethanolidurans分别发酵96 h的番茄酸汤和辣椒酸汤按1∶1复配后接种K.bulderi发酵96 h的红酸汤级联发酵体系中,菌株生长情况良好,番茄酸汤中L.buchneri浓度为(4.925±0.020)×10⁷ CFU/mL,辣椒酸汤中P.ethanolidurans浓度为(5.900±0.021)×10⁷ CFU/mL,混合酸汤中K.bulderi浓度为(0.150±0.031)×10⁷ CFU/...     

规模化生猪养殖场地土壤和地下水污染分析与评价——以广东省台山市某规模化生猪养殖遗留场地为例

本文以规模化生猪养殖遗留场地为研究对象,通过危害识别、暴露情景分析以及暴露途径分析等方法,建立该场地的污染概念模型。初步采样结果表明,土壤中砷的最大检出含量为2 311 mg/kg,最大超标倍数为37.5倍;六价铬最大检出含量为4.7 mg/kg,最大超标倍数为0.57倍。地下水中砷的最大检出含量为5.99×10^-2 mg/L,最大超标倍数为4.99倍,锰的最大检出含量为2.13 mg/L,最大超标倍数为20.3倍;氨氮的最大检出含量为4.62 mg/L,最大超标倍数为8.24倍,菌落总数的最大检出含量为3.9×10³ CFU/100 mL,最大超标倍数为38倍,总大肠菌群的最大检出含量为2.4×10³ CFU/mL,最大超标倍数为799倍。     

发酵桑葚汁的新型菌种筛选及润肠通便功能研究

桑葚被誉为“21世纪最佳保健果品”,但不耐贮藏,极易腐烂;在新型益生菌发酵桑葚汁功能性产品研发中,缺乏专用菌种/株。以黑珍珠桑葚为原料,以从自然发酵葡萄汁中自行分离并鉴定的12株新型益生乳酸菌为试验菌株,比较其在桑葚汁培养基中的产酸特性与生长能力,对试验菌株进行初筛。品评初筛菌株发酵优化后的桑葚汁培养基的感官品质,对菌株进行复筛。分析复筛菌株纯种发酵桑葚汁产品的质量。研究复筛菌株纯种发酵桑葚汁对小鼠的润肠通便作用。结果表明:经初筛和复筛,获得1株适宜发酵桑葚汁的新型益生菌,即植物乳杆菌P17;用P17菌株纯种发酵的桑葚汁产品组织状态均匀稳定,具有浓郁的果香与发酵香气,理化与营养成分符合相关国家与行业标准,益生菌活菌含量达8.7×10⁸ CFU/mL,富含多酚物质(199.59 g/kg±0.12 g/kg)与花青素(29.12 mg/L±0.06 mg/L)。发酵桑葚汁4℃保质期为25 d,益生菌活菌数为9.5×10⁷ CFU/mL。P17菌株纯种发酵桑葚汁使便秘模型小鼠缩短了排便时间,促进了小肠运动与内容物排放,从而改善了小鼠的便秘状况。     

甲烷氧化菌素模拟酶催化显色法检测小麦粉中过氧化钙

该文基于过氧化钙(CaO₂)与硫酸反应生成过氧化氢(H₂O₂),H₂O₂在甲烷氧化菌素(methanobactin,Mb)模拟酶的催化下,以KI为增敏剂,可快速氧化季胺[4,4’-(对二甲氨基)-二苯基甲烷]显色,测定溶液在462 nm处的吸光度,建立快速、简便的模拟酶催化显色法检测小麦粉中CaO₂。研究铜合甲烷氧化菌素(Mb-Cu)浓度、季胺用量、KI用量、反应温度、pH值以及反应时间对显色的影响。结果表明,Mb-Cu浓度4.5×10^-5mol/L、季胺用量60 μL,、KI用量12 μL、反应温度50℃、反应时间10 min时,CaO₂浓度在0～10 mg/L时与462 nm处吸光度呈线性关系,线性方程为y=0.078 1x+0.019 6,相关系数R²=0.997 6。该方法检出限为1.82×10^-2mg/L(相当于2.25 mg/kg小麦粉),平均加标回收率为9...     

高效毛细管区带电泳法同时检测3个产地沙棘果粉中的活性物质

利用高效毛细管区带电泳法,对3个产地沙棘果粉中的芦丁、山柰酚、异鼠李素、槲皮素4种活性物质进行同时分离测定。考察不同电泳条件对分离效率的影响,得出最佳电泳条件:缓冲溶液20 mmol/L Na_2B_4O_7-H_3BO_3(质量浓度为1.5 mg/mL的β-环糊精),pH 9.55,检测波长370 nm,分离电压25 kV,进样时间5 s。在该条件下,芦丁、山柰酚、异鼠李素、槲皮素4种活性物质在11 min内得到分离,线性范围分别为0.01~0.51、0.05~0.93、0.02~0.65、0.03~0.81 mg/mL,相关系数在0.997 1~0.999 1之间,检出限分别为5.05×10~(-5)、2.10×10~(-5)、3.75×10~(-5)、1.31×10~(-5) mg/mL(RSN=3),各物质线性关系良好。日内及日间精密度范围为0.08%~4.72%,平均回收率在95.51%~104.66%之间,相对标准偏差不大于3.92%(n=3)。在优化条件下,对4种活性物质标准品的混合物进行测定,并用相同方法对3个产地沙棘果粉中活性物质的提取液进行检测。结果表明:不同产地沙棘中,4种被检测化合物的含量各不相同。沙棘中被测4种化合物总量最高的产自新疆乌鲁木齐,最低的产自甘肃武威,而槲皮素含量以产自山西吕梁的最高,山柰酚和异鼠李素以产自新疆乌鲁木齐最高。本方法快速简便、准确可靠,可用于沙棘果粉中多种活性物质的同时检测。     

罗丹明6G荧光猝灭法测定大米中过氧化氢酶活度

建立了荧光猝灭测定过氧化氢酶(CAT)活度的新方法，并完成测试条件优化。过氧化氢酶分解过氧化氢具有专一性，酶分解反应后剩余的过氧化氢与罗丹明6G发生荧光猝灭反应，Fe²⁺能够加速猝灭反应进程，荧光猝灭程度与酶活度有关联，根据酶分解反应前后荧光强度变化值(ΔF)确定过氧化氢酶活度(E)。结果表明，酶分解反应在15 min内完成，E在5×10^-5～3×10^-2 U/mL范围内与ΔF呈良好的线性关系：ΔF=2.64 2+6 155E,r=0.998 2,检测限为4.87×10^-6 U/mL。荧光猝灭法的各项指标均优于甲基红褪色光度法，在大米过氧化氢酶活度检测中得到应用。     

乳杆菌对肠内分泌细胞胰高血糖素样肽1分泌的影响

胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide 1,GLP-1)是一种由肠道内分泌细胞产生的具有血糖调节作用的肠促胰岛素激素,肠道内乳杆菌(Lactobacillus)可能影响其分泌。该研究采用简单易操作的体细胞(有氧)-黏液层-细菌(微需氧)共培养体系分析3种乳杆菌[鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、植物乳杆菌(L.plantarum)和约翰氏乳杆菌(L.johnsonii)]对肠道内分泌细胞GLP-1分泌的影响。同时研究了菌株的剂量效应以及O₂和黏液层对共培养系统的影响。结果显示,1×10⁹、1×10⁸、1×10⁷ CFU/1 000 mL的L.rhamnosus可增加细胞GLP-1的分泌。低浓度的L.plantarum和L.johnsonii(<1×10⁷ CFU/1 000 mL)不影响细胞GLP-1产生,但在浓度高于1×10⁸ CFU/1 000 mL时则会显著降低(P<0.05)GLP-1的分泌。黏液层是存在于...     

氯化血红素对CdS量子点荧光的猝灭研究及分析应用

以巯基乙酸为稳定剂及表面修饰剂,在水溶液中合成了平均粒径为2.9nm 左右的CdS 量子点,该量子点在512.4nm 波长处有强的源于表面阱的空穴电子重组形成的表面态发射峰,加入的氯化血红素通过扩散和碰撞作用可将电子转移至CdS 量子点的空穴中导致量子点荧光发生动态猝灭,并在此基础上建立了测定氯化血红素的新型荧光分析法。在最佳测定条件下,当氯化血红素的质量浓度为5.0 × 10^-6～25.0 × 10^-6g/mL 时,体系的相对荧光强度(F)与氯化血红素的质量浓度(ρ)呈线性关系,线性回归方程为：F=719.09 － 14.01 × 10^-6ρ,检出限为3.35 × 10^-8g/mL。测定血清样品基底中氯化血红素的含量并获得满意结果。     

闪式提取沙棘总黄酮工艺及其抗氧化活性研究

以沙棘为原料，在单因素试验基础上利用响应面法优化沙棘总黄酮的闪式提取工艺，并与回流法对比分析总黄酮得率及其抗氧化活性。结果表明：闪式提取最佳工艺为转速6 060 r/min、料液比1∶80(g/mL)、乙醇体积分数80%、提取时间92 s,在此工艺条件下总黄酮得率为4.11%±0.03%,与回流法(2.70%±0.03%)相比，总黄酮得率提高；当沙棘总黄酮质量浓度达到100μg/mL时，闪式提取沙棘总黄酮总还原力的吸光度为1.25±0.03,而回流提取的吸光度为0.90±0.02;闪式提取和回流提取对沙棘总黄酮·OH IC₅₀分别为(1.35±0.07)、(1.66±0.06)μg/mL,对DPPH·IC₅₀分别为(80.68±0.04)、(90.35±0.03)μg/mL,对ABTS⁺·IC₅₀分别为(48.78±0.03)、(88.63±0.02)μg/mL。表明闪式提取法具有较高的得率和较强的抗氧化活性。     

寡雄腐霉与氟噻唑吡乙酮协同防治烟草黑胫病研究

为了探究寡雄腐霉(Pythium oligandrum,PO)与氟噻唑吡乙酮(Oxathiapiprolin,OX)联合防控烟草黑胫病的可行性,采用菌丝生长速率法和平板对峙法分别测定了PO和OX的生物相容性,及OX、PO和OX+PO对黑胫病菌的毒力,并通过盆栽试验分别测定了OX、PO和OX+PO对烟草黑胫病菌的防效,以及对烟草幼苗的促生效应。生物相容性试验结果表明,不同浓度OX处理下,PO的生长速率与空白对照无显著差异。室内毒力结果显示,8.0×10^-3 mg/L OX对烟草黑胫病菌的抑制率为91%,EC₅₀为2.19×10^-3 mg/L,而OX(1.0×10^-3 mg/L)与PO联用的抑制率达96.31%。盆栽试验结果表明,OX+PO处理对烟草黑胫病的防效最高(84.57%),比OX(77.76%)或PO(76.54%)单独处理防效分别提高8.76%和10.49%。OX和PO联用对烟草促生效果显著,其株高、茎粗、叶长、叶宽分别比对照处理提高了57.10%、20.21%、33.62%、35.08%。...     

猕猴桃籽油微胶囊在Caco-2单细胞层的吸收特性

以玉米肽为壁材,猕猴桃籽油为芯材,吐温-20为乳化剂,采用喷雾干燥法制备猕猴桃籽油微胶囊。MTT试验结果表明,当微胶囊浓度≤400μg/mL时,其对Caco-2细胞生长无明显抑制作用,且质量浓度为100~400μg/mL的微胶囊对细胞的生长有促进作用。对微胶囊在Caco-2单细胞层的吸收特性进行研究,结果表明,微胶囊在高、中、低3个浓度时,微胶囊的生物利用率均高于25%。当质量浓度为100μg/mL时,微胶囊的生物利用率达到最高,为41.70%±1.65%。微胶囊溶液从AP侧到BL侧的表观渗透系数Papp在1×10^-7~1×10^-6cm·s^-1之间,吸收水平较好。     

元素分析-稳定同位素质谱法结合化学计量学鉴别橄榄油掺假

为建立快速鉴别橄榄油掺假的检测方法,以特级初榨橄榄油、玉米油、猪油、牛油和鸭油为实验材料,通过元素分析-稳定同位素质谱仪测定油脂的δ¹³C、δ¹⁸O和δ²H,并结合化学计量学鉴定橄榄油掺假。采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)两种统计分析方法建立不同油脂的鉴别模型和橄榄油掺假鉴别模型。结果表明：橄榄油的δ¹³C、δ¹⁸O和δ²H范围分别在-30.411×10^-3～-28.996×10^-3、23.583×10^-3～25.581×10^-3、-163.611×10^-3～-132.251×10^-3之间;橄榄油与玉米油、猪油、牛油和鸭油的OPLS-DA鉴别模型准确性稍好,3个变量δ¹³C、δ²H和δ¹⁸O对不同油脂区分的贡献度VIP值分别为...     

耐高渗青春双歧杆菌的筛选及发酵工艺优化

为解决青春双歧杆菌在生产中发酵密度低的问题,该文测定了94株青春双歧杆菌的耐渗能力,同时评价了耐高渗菌株耐渗能力的遗传稳定性,最后通过解析培养基底物和发酵工艺探究了耐高渗菌株的最适发酵条件,从而提高其生产中的发酵活菌数。筛选得到两株最高可耐受1 400 mOsm/kg的菌株CCFM1302和CCFM1066,其最优氮源为复合氮源(胰酪蛋白胨和酵母浸粉FM528以质量比1∶1复合),最优碳氮比分别为(2.71±0.23)∶1和(2.53±0.11)∶1。以达到完全抑制渗透压为发酵终点推算底物最适浓度,进一步优化微量元素的添加量,得到最优培养基：复合氮源21.0 g/L、葡萄糖57.0 g/L(CCFM1302),复合氮源22.4 g/L、葡萄糖56.5 g/L (CCFM1066);此外添加MgSO₄·7H₂O 0.25 g/L,半胱氨酸1 g/L、吐温80 1 mL/L。恒pH 5.5培养至稳定期发酵液活菌数可达(1.82±0.08)×10¹⁰ CFU/mL和(1.70±0.03)×10¹⁰ CFU...