鲜切苹果腐败霉菌的分离鉴定及致腐力的研究

对引起鲜切苹果腐败的霉菌进行分离鉴定并通过活体实验比较致腐能力。从鲜切苹果中分离13株霉菌,通过形态学鉴定方法分为5个属,其中青霉菌属(Penicillium)7株,曲霉属(Aspergillus)1株,枝孢属(Cladosporium)3株,枝顶孢属(Acremonium)1株,链格孢属(Alternaria)1株。根据青霉菌在CA、CYA、G25N培养基上的特征及镜检观察,将所分离的青霉菌鉴定为5种:皮落青霉(P.crustosum),扩展青霉(P.expansum),米舒青霉(P.miczynskii),橘灰青霉(P.aurantiogriseum),鲜绿青霉(P.viridicatum)。活体实验进行腐败与非腐败霉菌的分类,得到腐败霉菌有5种,分别为鲜绿青霉、扩展青霉、皮落青霉、互隔交链格孢霉(A.alternata)、黑曲霉(A.niger);非腐败霉菌有5种,分别为橘灰青霉、地生枝顶孢(A.terricola)、球孢枝孢(C.sphaerospermum)、枝状枝孢(C.cladosporioides)和米舒青霉。5种腐败霉菌的致腐能力从大到小依次为:皮落青霉、扩展青霉、鲜绿青霉、互隔交链格孢霉、黑曲霉。     

蓝莓采后主要病原菌的分离鉴定及肉桂精油抑菌效果

为明确山东泰安地区蓝莓采后主要致腐病原菌及肉桂精油对其抑菌效果,从自然腐烂的“晚丰”蓝莓上分离纯化优势菌株,采用传统真菌形态学鉴定方法结合rDNA-ITS序列分析方法进行鉴定,并采用体外熏蒸抑菌实验研究肉桂精油对几种主要致病菌的抑制效果。结果表明,泰安本地蓝莓分离到3 株病原真菌,分别为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、链格孢菌（Alternaria alternata）和灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）。体外抑菌实验表明,肉桂精油对尖孢镰刀菌、链格孢菌和灰葡萄孢菌均有较好的抑制效果,其最小抑菌浓度分别为60、30 μL/L和30 μL/L;通过扫描电镜可以看出,与对照组相比,经肉桂精油处理的3 种病原菌菌丝形态均受到严重破坏,发生凹陷、皱缩、粗糙等一系列变形现象。     

人工贵腐玫瑰蜜葡萄酒的酿造及香气成分分析

以玫瑰蜜葡萄为原料,通过人工接种贵腐菌的方法来获得贵腐葡萄,评价人工酿造贵腐玫瑰蜜葡萄酒技术的可行性。本研究在感染灰霉病的夏黑葡萄果实上分离灰葡萄孢(Botrytis cinerea)菌株,通过形态学和分子鉴定,确定分离菌株为灰葡萄孢(B. cinerea)。然后用喷洒孢子悬浮液的方法对玫瑰蜜葡萄进行人工接种,获得贵腐葡萄,酿造贵腐葡萄酒。用顶空固相微萃取气质联用(HS-SPME-GC-MS)分析人工贵腐酒的香气成分,通过与对照相比,人工贵腐酒一共检测到了42种香气物质,对照检测到了29种。通过分析发现玫瑰蜜人工贵腐酒含有更多种类的酯类和醛酮类化合物,具有典型的香气成分,更加丰富和复杂的香气特征。     

猕猴桃广谱拮抗内生菌分离鉴定及其对樱桃圣女果采后的保鲜作用

筛选具有广谱抑菌效果的内生菌并研究其发酵液对樱桃圣女果采后保鲜效果的影响。采用研磨法从健康猕猴桃的根、茎、叶和果实中分离纯化了18株内生菌,通过平板对峙法选出强活性菌株MR-1,并对其进行菌体、菌落形态的观察、生理生化测定及16S rRNA测序分析,进行菌种鉴定。进一步研究该活性菌株对8种常见致病菌的抑制效果以及樱桃圣女果主要病害菌的抑制作用。结果表明,菌株MR-1对采后致病菌拮抗效果较强,初步鉴定其为解淀粉芽孢杆菌,其对8种植物病原菌均有较强的拮抗作用,对链格孢、灰葡萄孢、辣椒炭疽病菌3种圣女果主要病害菌表现出较强的抑制作用,经内生菌MR-1发酵滤液处理的樱桃圣女果保鲜效果最好,其次为复合果蔬保鲜剂。储藏第8 d,与空白对照组相比,其腐烂直径分别下降了50.6%、50.6%及44.9%。解淀粉芽孢杆菌MR-1次级代谢产物丰富,其在果蔬保鲜中有较好的应用前景。     

凤尾兰提取物的抑菌活性及其对蒜薹腐烂的抑制作用

灰葡萄孢和葱腐葡萄孢引起的蒜薹灰霉病是导致蒜薹贮期腐烂的主要病因之一。采用滤纸片扩散法研究了凤尾兰提取液对蒜薹灰葡萄孢和葱腐葡萄孢的抑制作用,用二倍稀释法确定提取液的最小抑菌浓度;在常温条件下贮藏,探讨不同浓度的凤尾兰提取物对蒜薹灰葡萄孢和葱腐葡萄孢引起腐烂的抑制作用。结果表明,凤尾兰提取液对灰葡萄孢和葱腐葡萄孢均有较明显的抑制作用,对两种菌的最小抑菌浓度分别为0.062 5 g/mL和0.125 g/mL。凤尾兰提取物对灰葡萄孢和葱腐葡萄孢引起的蒜薹腐烂具有较好的抑制、治疗作用,2.5 g/L、5 g/L、10 g/L的凤尾兰提取物均能有效抑制蒜薹灰葡萄孢和葱腐葡萄孢的侵染,减少蒜薹腐烂,其中以10 g/L的处理效果最佳。     

贵州望谟板栗冷藏期致腐真菌鉴定及其生物学特性研究

板栗腐烂由多种真菌协同侵染造成,尤其冷藏期栗果腐烂率可达15%～20%。该研究以贵州望谟主产区板栗为实验对象,对其冷藏期进行致腐真菌分离纯化、柯赫氏法则致腐性测定、形态学和分子生物学鉴定。结果表明,分离鉴定出的3株致腐真菌分别为层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)、皮落青霉(Penicillium crustosum)和链格孢菌(Alternaria alternata)。生物学特性试验表明,层出镰刀菌菌丝生长和产孢最适pH值分别为7.0和8.0,最适菌丝生长和产孢碳源为乳糖,氮源为甘氨酸,温度为25℃,光照条件为24 h黑暗;皮落青霉菌丝生长最适碳源为乳糖、pH值为8.0,最利于产孢的碳源为大豆多糖、pH值为7.0,菌丝生长和产孢最适温度为25℃、氮源为尿素、光照条件为24 h黑暗;链格孢菌分别以蔗糖、麦芽糖为碳源时菌丝生长最快、产孢量最大,菌丝生长和产孢最适温度为25℃、氮源为蛋白胨、pH值为9.0、光照条件为24 h黑暗。贵州望谟板栗冷藏期主要致腐真菌的确定,可为板栗腐烂有效防控及致腐机制研究提供科学依据。     

二氧化氯气体对葡萄链格孢菌的抑制作用

该文研究了二氧化氯气体(ClO 2)对链格孢菌的抑制作用,为降低采后葡萄贮藏过程中交链孢霉腐病带来的损失提供依据。用1.5、3.0、4.5、6.0、7.5、9.0μg/L ClO 2分别对离体链格孢菌处理10、20、30 min,以不做任何处理为对照组,通过测定菌落生长、孢子形成、芽管伸长抑制率及倒置显微镜观察菌丝形态来探究ClO 2对其抑制效果。并用3.0、6.0、9.0μg/L ClO 2对接种了链格孢菌的葡萄处理30 min,置于28℃的培养箱中贮藏,通过测定病斑直径、发病率及相关酶活性来探索ClO 2对交链孢霉腐病的抑制作用。结果表明,离体实验中,与对照组相比,ClO 2处理组均能显著抑制链格孢菌菌落生长、孢子形成及芽管伸长。且接种了链格孢菌的活体实验中,ClO 2处理组均能抑制果实的病斑直径及腐烂率,延缓果实中丙二醛含量的积累,维持较高的抗氧化活性,其中采用9.0μg/L ClO 2处理果实30 min效果最好。     

黑腹果蝇和斑翅果蝇对‘玫瑰香’葡萄酸腐病的影响

为了明确葡萄采收期致腐病菌与黑腹果蝇、斑翅果蝇的关系,模拟田间条件,将8种与葡萄酸腐病相关的真菌分别与两种果蝇联合侵害葡萄果实,观察葡萄的发病率与病情指数。结果表明,黑腹果蝇和8种真菌在有损伤‘玫瑰香’葡萄上的发病率均为100%;黑腹果蝇和真菌联合侵害初期,黑腹果蝇显著降低桔青霉、层生镰刀菌、青霉菌、米曲霉的病情指数;但在侵染第7天时,8种真菌的病情指数在黑腹果蝇的取食后均显著增加。在侵染新鲜完整葡萄的初期,尖孢枝孢菌和黑曲霉的发病率明显低于斑翅果蝇;斑翅果蝇的取食增加桔青霉、层生镰刀菌、青霉菌、细极链格孢和棘孢曲霉的病情指数,降低黑曲霉的发病率。因此,黑腹果蝇促进8种真菌的发育与侵染,斑翅果蝇的产卵与取食为桔青霉、层生镰刀菌、青霉菌、细极链格孢和棘孢曲霉5种真菌侵染新鲜葡萄创造更为有利的条件。     

桑椹采后致腐真菌的分离鉴定及其内生酵母保鲜效果

从腐烂桑椹中分离致腐真菌,通过形态学观察及内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列分析进行种属鉴定,初步研究桑椹内生酵母对桑椹致腐真菌的体内外拮抗效果。结果表明,从腐烂桑椹中分离得到3 株真菌,分别鉴定为链格孢菌（Alternaria alternata）、黑曲霉（Aspergillus niger）和富克尔核盘菌（Botryotinia fuckeliana）,它们对桑椹均有致腐性。体外拮抗实验显示,拟粉红锁掷孢酵母对链格孢菌（Alternaria alternata） 和富克尔核盘菌（Botryotinia fuckeliana）具有较好的抑制活性;葡萄汁有孢汉逊酵母和异常威克汉姆酵母对3 种致腐真菌具有较好的抑制活性。体内拮抗实验表明,拟粉红锁掷孢酵母和葡萄汁有孢汉逊酵母对桑椹具有较好的保鲜作用。     

烟台地区引起甜樱桃采后腐烂霉菌的分离鉴定

为明确引起烟台地区甜樱桃采后腐烂的主要霉菌,对烟台采后腐烂甜樱桃中的霉菌进行分离,应用内部转录间隔区序列分析方法和形态学观察将分离的霉菌进行鉴定。选出代表性霉菌菌株回接樱桃,进行致腐性检测。结果表明:从烟台不同区县收集的腐烂樱桃中分离出的60株霉菌分属于6个种:燕麦赤霉菌(Gibberella avenacea)、总状毛霉菌(Mucor racemosus)、三线镰刀菌(Fusarium tricinctum)、互生链格孢菌(Alternaria alternate)、奥桑青霉菌(Penicillium polonicum)和烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus),其中互生链格孢菌和总状毛霉数量较多,分别为14株和15株。将这些霉菌中的代表菌株重新接回到甜樱桃,均能引起甜樱桃的腐烂。     

西藏林芝地区不同品种葡萄果实表皮微生物群落结构组成分析

基于高通量测序技术对西藏林芝地区不同品种葡萄果实表皮细菌和真菌菌群的多样性及群落组成进行分析。结果表明,不同品种葡萄果实表皮微生物群落多样性差异明显,‘夏黑’葡萄果实表皮微生物丰富度和多样性指数最高,‘火焰无核’葡萄果实表皮最低。优势细菌属（相对丰度>1%）主要有伯克霍尔德氏菌属（Burkholderia-Caballeronia-Paraburkholderia）、慢生根瘤菌属（Bradyrhizobium）、SJA-15、劳尔氏菌属（Ralstonia）、异样根瘤菌属（Allorhizobium-Neorhizobium-Pararhizobium-Rhizobium）、寡养单胞菌属（Stenotrophomonas）、甲基杆菌属（Methylobacterium）和阿菲波菌属（Afipia）,优势真菌属主要为球腔菌属（Mycosphaerella）、曲霉属（Aspergillus）、枝孢属（Cladosporium）和枝顶孢属（Acremonium）。结果显示,不同品种葡萄果实表皮微生物群落结构组成及相对丰度差异明显,说明葡萄品种影响葡萄果实表皮微生物群落结构组成。     

产白藜芦醇葡萄内生菌的分离与鉴定

从酿酒葡萄梅洛特的葡萄皮、葡萄穗轴及梗中分离出30株葡萄内生菌,经过摇瓶液体发酵后检测发酵液提取物,发现有7株内生真菌具有产白藜芦醇的能力。其中菌株MG1发酵产白藜芦醇的能力稳定、产量高,达97μg/L,其他几株菌株白藜芦醇产量较低且不稳定。对菌株MG1的分类鉴定进行重点研究,结合形态学特征及分子生物检测结果,鉴定其为链格孢属菌。     

洋葱霍尔德氏菌对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抑制活性

为研究生防菌洋葱霍尔德氏菌B-1的生防潜力,并为其生产性应用奠定基础,研究洋葱霍尔德氏菌B-1的生物量最大值的培养时间、浓度和发酵时间对玫瑰香葡萄采后病害的抑制效果。结果表明,在接种后24 h,拮抗菌B-1的抑菌效果最好,抑菌圈直径达2.81 cm。在液体培养基中,生防菌可有效抑制灰葡萄孢霉孢子萌发和芽管伸长,稀释5倍发酵液和发酵原液可完全抑制灰葡萄孢霉孢子萌发,稀释40倍发酵液孢子萌发率下降60.39%。在0,16℃和26℃温度条件下,拮抗菌均可显著降低葡萄采后自然腐烂率。菌株B-1不论是在离体条件还是在活体条件下,均有抑制灰葡萄孢霉的作用,能有效防治葡萄采后灰霉病的发生,是一株生防潜力较好的菌株。     

茉莉酸甲酯对脆红李采后病原菌的抑制作用

为确定脆红李果实采后主要病原菌的种类及茉莉酸甲酯对其抑制效果,从脆红李贮藏期病果中分离纯化病原菌,通过致病性检测、形态学鉴定和rDNA-ITS序列分析对病原菌进行鉴定;并采用体外实验研究不同浓度的茉莉酸甲酯（0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L）对脆红李采后主要致病菌的抑制效果及室内毒力测定。结果表明,引起脆红李采后腐烂的病原菌主要为灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）和链格孢菌（Alternaria alternata）;经体外实验得出,不同浓度的茉莉酸甲酯能抑制两株病原菌菌丝的生长,其中,0.4 mmol/L及0.5 mmol/L的茉莉酸甲酯能够有效抑制脆红李采后病原菌的生长,但其对病原菌的抑制作用无显著差异（P>0.05）;在体外培养5 d时,0.4 mmol/L的茉莉酸甲酯对灰葡萄孢菌和链格孢菌的抑制率分别为89.3%、86.3%;在培养2 d时,茉莉酸甲酯对灰葡萄孢菌和链格孢菌的EC50分别为0.154、0.228 mmol/L,而在5 d时为0.193、0.348 mmol/L。由此得出适宜浓度的茉莉酸甲酯能够有效抑制脆红李贮藏期病原菌的生长,后期可将其用于脆红李采后病害的防治及贮藏保鲜的研究。     

香茅精油对果蔬采后主要致病真菌的抑菌活性

以链格孢菌、炭疽菌、灰霉菌、蒂腐菌、串珠镰刀菌为供试菌株,采用带药介质法对香茅精油时果蔬采后主要致病真菌的抑菌活性进行了研完.结果表明,香茅精油对受试的致病菌均有不同程度的抑制作用,其中,灰霉菌对香茅精油最为敏感,浓度为300μL/L香茅精油即可完全抑制灰霉病菌菌丝直径的扩增,蒂腐菌次之;对于链格孢菌、串珠镰刀菌和炭疽菌,香茅精油浓度为500μL/L时,可达到完全抑制.     

市售草莓腐败菌的分离鉴定及拮抗酵母的筛选

为了分离纯化并鉴定市售草莓主要的腐败污染菌,分析筛选拮抗能力良好且具有较大生物防治潜能的酵母。通过菌落形态和显微形态初筛出主要腐败菌,并采用28S rDNA序列分析鉴定到属。针对典型腐败菌做对峙实验,筛选出有明显拮抗作用的酵母,26S rDNA序列分析鉴定到属种。酵母和腐败菌同时反接在有伤冬枣上,验证酵母拮抗能力,分析酵母作为生防菌的应用效果。本研究显示草莓携带的致腐败的微生物主要是空气中常见的5种霉菌为枝孢霉属(Cladosporium spp.)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、链格孢属(Alternaria sp.)、毛霉(Mucor sp.)和白地霉(Geotrichum candidum)。从191株酵母中筛选出对腐败菌有拮抗作用的菌株23株,属于17种酵母,在体内体外实验中均表现出良好拮抗效果的酵母为美极梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)S4-1。     

番茄采后病原鉴定及百里香精油生物活性研究

对引起保护地番茄采后腐烂的4株病原真菌进行形态和分子水平鉴定。以ITS1和ITS4为引物扩增ITS区r DNA片段。经Gen Bank进行BLAST分析,依据邻接法法构建系统发育树,确定4个菌株中SF-1为串珠镰刀菌,SF-2属细极链格孢,SF-3为灰葡萄孢霉,SF-4为粉红单端孢霉。百里香精油对该4株真菌的抑菌活性:4种病原真菌中SF-3和SF-4对百里香精油最敏感,在熏蒸条件下其EC50值分别为22.84μL/L和27.87μL/L。在精油浓度相同时,熏蒸方式较接触方式可获得有更高的抑菌活性。采用扫描电子显微镜(SEM)研究百里香精油对灰葡萄孢霉和粉红单端孢霉的抑制作用,结果表明,对照菌丝光滑,饱满,而经百里香处理的灰葡萄孢霉菌丝表面形态受到严重破坏,发生皱缩,有不正常缢缩,且有大量渗出物,而粉红单端孢霉表面形成许多结节,菌丝粗细不均匀。     

山西葡萄中链格孢菌分离鉴定与污染水平分析

本研究对山西葡萄主产区的巨峰葡萄（Kyoho grapes）和红提葡萄（Redglobe table grapes）上的主要病原真菌（链格孢菌）进行纯化分离、真菌形态学鉴定、分子生物学鉴定,并对链格孢菌产毒能力进行检测分析。研究表明,链格孢菌（Alternaria alternata）侵染山西葡萄具有一定的品种选择性。链格孢菌菌株产生的毒素主要以细交链孢菌酮酸（TEA）为主。本研究初步明确了山西葡萄（巨峰葡萄和红提葡萄）中链格孢菌的污染水平。     

鲜食葡萄表皮生物性危害因子及链格孢毒素分析

为确定链格孢属真菌发酵液和鲜食葡萄中链格孢酚(AOH)、链格孢酚甲基乙醚(AME)、链格孢霉素(ALT)和细交链孢菌酮酸(TeA)4种链格孢霉毒素的含量,对我国两个鲜食主栽品种‘巨峰’‘红地球’的50份样品表皮的生物性危害因子进行分离鉴定。结果表明,鲜食葡萄表皮的生物性危害因子主要为曲霉属、链格孢属和青霉属真菌,其中链格孢属真菌主要为Alternaria alternata,而A. alternata的产毒发酵液中能检测到AOH、AME和TeA,其中TeA的含量较高。基于链格孢毒素的毒性,要加强葡萄及其制品的风险监测。     

甜樱桃果实采后病原菌及植物精油对其抑制效果研究进展

植物精油对果蔬采后病原微生物具有较强的抑制作用,其在果蔬防腐保鲜上的应用已成为研究热点。本文主要介绍了易引起甜樱桃果实采后腐烂的链核盘菌(Monilinia sp.)、葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、根霉菌(Rhizopus sp.)、炭疽菌(Colletotrichum sp.)和链格孢菌(Alternaria alternata),以及植物精油对上述病原菌的抑菌效果,以期为植物精油在甜樱桃果实防腐保鲜上的应用提供参考。