乳酸菌质粒的研究进展

乳酸菌是一种公认的食品级微生物,它广泛存在于自然界中。很多编码其独特性状的基因位于游离于基因组DNA之外的质粒上。本文就乳酸菌质粒的提取方法、复制模式与特点以及改造和应用等方面进行概述,旨在揭示乳酸菌质粒的最新研究进展,为今后改造乳酸菌质粒,构建合适的基因工程载体提供参考与借鉴。     

乳酸菌质粒基因表达载体系统

乳酸菌是一类重要的工业菌株。近年来对于乳酸菌的遗传学和分子生物学的研究成为热点，并在一些方面取得了突破性成果。本文介绍了乳酸菌食品级表达载体的安全要求和食品级选择标记以及乳酸菌质粒的研究进展。     

乳酸菌质粒DNA高效快速提取方法的建立

采用酶裂解和碱裂解相结合的方法,并参考质粒DNA提取原理,建立了一种高效快速的乳酸菌质粒DNA提取方法。结果表明,在乳酸菌中可获得一个到多个高质量的质粒DNA,分子大小不等,浓度10mg/mL左右,1.8相似文献   

乳酸菌食品级质粒及应用的研究进展

乳酸菌是食品发酵工业中重要的益生菌,利用分子生物学技术构建的菌种对食品产业发展及人类健康具有重要影响。本文主要通过介绍乳酸菌食品级系统的基本要求、食品级质粒的元件组成、食品级质粒构建策略及其应用的研究进展,展示了乳酸菌食品级分子操作系统的建立对乳酸菌的深层次开发利用所具有的重要意义。     

乳酸菌质粒DNA高效快速提取方法的建立

采用酶裂解和碱裂解相结合的方法,并参考质粒DNA提取原理,建立了一种高效快速的乳酸菌质粒DNA提取方法.结果表明,在乳酸菌中可获得一个到多个高质量的质粒DNA,分子大小不等,浓度10mg/mL左右,1.8＜A260/A280＜2.0.该方法减少了通常乳酸菌质粒DNA提取方法的提取和纯化步骤,减少了乳酸茵质粒DNA提取时间和损失,是一种高效快速的乳酸茵质粒DNA提取方法.     

1种快速高效提取乳酸菌质粒的方法

根据碱裂解提取大肠杆菌质粒的原理与程序,借鉴Anderson和O’Sullivan的乳酸菌质粒提取方法,使酶解破壁和碱破膜变性相结合,通过优化乳酸菌质粒提取中酶浓度、酶解时间、质粒沉淀条件,提出1种高效提取乳酸菌质粒的方法。在此基础上,分析并检验该方法提取乳酸菌质粒的适用性、效率和质粒质量。结果表明:采用该方法可提取乳球菌及乳杆菌中的质粒,所提取的乳酸菌质粒不受质粒大小及拷贝数高低的影响,乳酸菌质粒的检出率和提取的成功率显著提高;提取的乳酸菌质粒达到DNA纯化后的水平,可用于酶切等分子生物学操作。操作实践表明:该方法适合乳酸菌质粒的小量提取(1.5~2 mL菌液)到中量提取(10 mL菌液);其操作周期与大肠杆菌质粒提取检测彼此相当,而比Anderson和O’Sullivan提取检测乳酸菌质粒缩短3~4 h。本文还就乳酸菌质粒提取中的主要原理及注意事项进行探讨,以期为进一步开发乳酸菌质粒分离纯化试剂盒提供理论依据。     

乳酸菌两组分食品级选择标记复制子缺失质粒的构建

乳酸菌NICE系统的两组分食品级选择标记具有显性和互补选择标记的优点。含红霉素抗性选择标记的复制子缺失的伴生型质粒是依赖复制子完全且无选择标记的食品级克隆载体而复制的。构建的伴生型质粒的Emr和rep分别来源于pMG36e和pRAF800,经酶切、缺刻、补平和连接得到只能在红霉素选择压力下与θ型复制子的克隆载体共存的复制子缺失伴生型质粒。     

乳酸菌冻干特性的研究

对乳酸菌冻干存活率的影响因素及质粒稳定性进行研究。结果表明,乳酸菌冷冻干燥过程中,残余水分质量分数在2％～3％,菌体的相对存活率较高;悬浮液中菌体密度降低,存活率降低;在冷冻干燥过程中,存在两个最大冰晶生成带,即:0～-3.7℃和-30～37.4℃。快速通过最大冰晶生成带可以减小菌体的冷冻损伤。复水介质中营养组分对菌株的存活性影响不显著（P>0.05）。LDB菌株在冻干前后质粒保持了很好的稳定性。液态发酵剂、冻干发酵剂、冻藏发酵剂的生长迟滞期分别为0.61,1.26,0.84h;对数生长末期每小时pH值分别为0.5992,0.3968,0.5159。冻藏发酵剂比冻干发酵剂更利于保持菌体活力。     

乳酸菌隐蔽性质粒pEV105复制子的鉴定

将Tnl541转座子的红霉素抗性rRNA甲基化酶基因克隆至pUCl9的EcoO109 I位点 ,构建成能够确定乳酸菌质粒复制子所在片段的复制检测载体pUB380.将乳酸菌隐蔽性质粒pEV105 3个酶切片断(4.5、3.5、3 kb)分别连接至此载体,并电转化至原宿主菌.试验结果显示,连接了3.5 kb片段的栽体能够使原宿主菌表达红霉素抗性的片段,即复制子所在片段.以Southern杂交对质粒pEV105复制模式进行分析.结果显示pEV105为O型复制.用400μg/mL吖啶橙对菌株KLDS6.0718处理50代后没有质粒丢失,说明pEVl05在宿主菌内十分稳定.该复制子在构建乳酸菌食品级克隆表达载体中可作为稳定的复制子使用.     

乳制品乳酸菌遗传学概述

研究并分析了乳业工业相关的多种乳酸菌中基因转移的过程和遗传应用,以创造更适合于乳制品生产的新型发酵菌株。文中主要论述了乳制品相关乳酸菌基因组成和基因转移过程的全新研究,对乳酸菌遗传学分析的方法进行了概述,同时对乳酸菌遗传学在乳制品研究领域的应用进行了分析和展望。     

森永乳酸菌糖

生产企业：森永制菓株式会社关键字：乳酸菌在本期焦点选题中,饮料行业年度总结对乳酸菌饮料做了较高的肯定,而乳酸菌这一品类势必能成为今后食品的一项主要发展方向,森永制菓株式会社生产的乳酸菌糖,正在成为日本流行的全民热销品。一颗一颗,晶莹剔透,透着诱人光泽的乳酸菌糖味道酸酸甜甜,     

乳酸菌细胞固定化发酵的研究进展

乳酸菌足能利用糖发酵产生乳酸的一类细菌,在食品、医药、工业、农业和科研等领域均有广泛的应用。本文综述了利用乳酸菌进行细胞固定化发酵生产乳酸、乳制品以及Nisin的国内外研究进展情况。并对乳酸菌固定发酵技术的应用前景进行了简要论述。     

乳酸菌发酵核桃乳工艺及物性学研究

本研究以新疆特产核桃为主要原料,以嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)为菌种生产核桃酸乳,旨在开发新型功能性食品--乳酸菌发酵核桃乳,并对其发酵前后物性学进行分析,以期获得兼具核桃和乳酸菌发酵食品双重优点的乳酸菌发酵核桃乳,提高核桃蛋白质的营养价值,增加核桃蛋白的附加值.     

乳酸菌的适酸性调节

探讨了乳酸菌适酸机制有助于抗酸菌株的筛选、发酵过程中工序的优化以及培养基的优化等,进而大大提升发酵产品品质.对质子泵、产碱、细胞膜变化、大分子保护修复以及耐酸调节在内的适酸性调节机制进行了一一阐述.     

单一及混合乳酸菌发酵对番木瓜汁品质的影响

目的：探讨植物乳杆菌Lactobacillus plantarum （Lp）、鼠李糖杆菌Lactobacillus rhamnosus （Lr）、嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus （La）及两两混合菌（Lp+Lr、Lp+La、Lr+La）对番木瓜汁发酵后植物化学、微生物学、风味特性和功能特性的影响,并开发出一种具有改善功能和促进健康特性的番木瓜益生菌发酵饮料。方法：通过测定发酵过程中pH值、可溶性固形物、可滴定酸、活菌数、葡萄糖、果糖、蔗糖、有机酸和挥发性化合物的变化,考察各菌发酵过程中总酚、总黄酮含量和抗α-葡萄糖苷酶、抗酪氨酸酶的能力。结果：在72 h的发酵过程中,单一菌株培养和混合菌株培养的变化相似,pH值显著降低,酸度显著提高;乳酸和琥珀酸含量均显著提高,柠檬酸和苹果酸含量显著降低。发酵后,木瓜汁中总酚类物质和总黄酮含量均有所增加。Pearson相关分析表明,酚类物质的代谢可能有助于增强α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶的抑制作用。所有发酵组中,由植物乳杆菌单菌发酵的番木瓜汁乳酸、总酚、总黄酮含量最高,对α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶的抑制作用最强。未经发酵的番木瓜原汁中主要检出6种挥发性化合物,丁酸含量最大为89.742%,其次为芳樟醇。发酵后,从6组发酵果汁中共鉴定出25种主要挥发性成分,其中丁酸含量显著降低,减少了番木瓜不愉快气味的产生。所有发酵中,Lp单菌产生的挥发性成分最多（18种）,混合菌Lp+Lr的较少（5种）。虽然混合菌Lp+Lr存在的活菌数最多[7.61 lg（CFU/mL）],但总体看来,单一菌种Lp可能更可取。结论：单菌种植物乳杆菌发酵可以改善番木瓜汁的感官特性,并增强其潜在的功能特性。     

活性乳稳定性的研究

研究了影响活性乳稳定性的主要因素，确定用比色率来比较活性乳的稳定性。探讨了单独使用ＣＭＣ－Ｎａ和ＸＧ作为稳定剂以及ＣＭＣ－Ｎａ分别与ＸＧ和ＰＧＡ配合使用对活性乳稳定性的影响。研究了均质压力对稳定性的影响，确定了最佳的稳定剂配比和均质压力。     

乳酸菌及乳酸菌发酵食品

介绍了乳酸菌的生理功能、乳酸发酵食品及其开发应用前景。     

Lactic acid bacteria from fermented table olives

Table olives are one of the main fermented vegetables in the world. Olives can be processed as treated or natural. Both have to be fermented but treated green olives have to undergo an alkaline treatment before they are placed in brine to start their fermentation. It has been generally established that lactic acid bacteria (LAB) are responsible for the fermentation of treated olives. However, LAB and yeasts compete for the fermentation of natural olives. Yeasts play a minor role in some cases, contributing to the flavour and aroma of table olives and in LAB development.     

Lactic acid bacteria decarboxylation reactions in cheese

Fermentation in cheese comprises oxidation-reduction of carbohydrates to yield organic acids, alcohols and carbon dioxide. Furthermore, organic acid and amino acid metabolism produces a series of compounds that positively or negatively affect final cheese quality. Under the strong selective pressure of the acidic environment of cheese ripening, lactic acid bacteria have developed multiple stress-resistant strategies, including decarboxylase and deiminase reactions that play a main physiological role during the ripening process of cheese production. The control of the expression and activity of these enzymes is one active strategy for intracellular acid-base homeostasis. This review covers relevant pathways and aspects related to gene regulation of gene clusters present in starter or non-starter lactic acid bacteria that are involved in sensory changes such as flavour development. From the point of view of food safety the main decarboxylation pathways that lead to the formation of biogenic amines are described.