乳清蛋白肽对衰老模型小鼠的抗氧化和学习记忆改善作用

目的:探讨乳清蛋白肽对衰老模型C57BL/6N小鼠的抗氧化和学习记忆改善作用.方法:采用SPF级雄性C57BL/6N小鼠72只,随机选取12只作为空白对照组,其余小鼠采用D-半乳糖100 mg/kg BW腹腔注射造模,连续造模6w,期间空白对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水.6w后内眦取血,测定血清MDA水平,并按MDA水...     

乳清蛋白肽抗氧化活性的研究进展

综述了乳源蛋白肽的研究现状和乳清蛋白肽的抗氧化途径。乳清蛋白肽通过清除自由基,螯合金属离子,减少氢过氧化物和改变食品物理性状等方式起到抗氧化作用。探讨了氨基酸组成及乳清蛋白肽的结构与抗氧化活性之间的关系。易于供氢的氨基酸最易被氧化起到抗氧化作用,抗氧化活性还受到多肽空间结构的影响。测定乳清蛋白肽抗氧化活性的方法很多,由于测定条件和测定指标的不同,研究者往往得出截然相反的结论。抗氧化活性肽来源丰富,乳清蛋白肽显示出一定的优势,具有广泛的市场应用前景。     

乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究

采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

扇贝抗氧化肽对衰老小鼠体内抗氧化活性研究

目的研究扇贝副产物抗氧化肽对衰老小鼠体内抗氧化活性。方法采用D-半乳糖构建小鼠衰老动物模型,分别以不同性别小鼠肝脏中特征酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性及丙二醛(alondialdehyde, MDA)含量为指标,评价扇贝抗氧化肽的体内抗氧化功能。结果与模型组比较,灌胃剂量为0.5 mL/kg的样品组能够显著提高模型小鼠(雌性和雄性)中肝脏中SOD、CAT、GSH-Px等特征酶的活性,并降低MDA含量水平。同时以脾脏指数、胸腺指数、吞噬指数为指标评价扇贝抗氧化肽对小鼠免疫能力的影响。结果显示灌胃剂量为0.50mL/kg和1.0mL/kg的扇贝抗氧化肽能够提高小鼠的脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数。结论扇贝抗氧化肽具有良好的增强机体抗氧化功能作用。     

发酵乳清蛋白制取抗氧化肽的研究

为研究乳清蛋白发酵产物的抗氧化能力,采用益生菌对其进行发酵。以DPPH自由基清除率为指标,通过单因素试验和正交试验对发酵条件进行优化,得到发酵工艺的最佳参数为:10%乳清蛋白复原乳在37℃,初始pH值6.8,接种量4%条件下发酵24h。在该条件下,发酵产物对DPPH自由基的清除率为66.95%。     

乳清蛋白水解产物中抗氧化肽的分离纯化及应用

目的：从乳清蛋白水解物中筛选出一种具有较强抗氧化活性的多肽，减少真空冷冻干燥过程中对乳双歧杆菌Probio-M8的细胞损伤。方法：通过碱性蛋白酶水解乳清蛋白，经超滤分离后得到3种分子质量k1(>8 ku)、k2(3～8 ku)和k3(<3 ku)的多肽样品，以强阳离子交换色谱、反向高效液相色谱（RP-HPLC）、液相色谱质谱联用进行分离、纯化和鉴定，以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）清除率、抗超氧阴离子自由基和对氧化自由基的吸收能力作为检测指标，筛选具有较强抗氧化能力的组分作为保护剂，应用于乳双歧杆菌Probio-M8的真空冷冻干燥过程中。结果：经超滤、蛋白层析及液相色谱分离后，k3样品中的3-2和4-6两个组分具有较强抗氧化活性，从组分3-2和4-6中分别鉴定出5条和6条潜在的抗氧化肽序列。在乳双歧杆菌Probio-M8真空冷冻干燥中的应用结果表明，多肽组分3-2能够显著提高菌种存活率至（88.31±0.02）%，同时还能够降低胞内活性氧水平并保护细胞活力。结论：抗氧化多肽组分3-2能够作为冻干保护剂，在真空冷冻干燥过程中减少乳双歧杆菌Probio-M8受到细胞...     

紫苏籽抗氧化肽对高脂饮食小鼠脂代谢及氧化应激的影响

文章旨在探究紫苏籽抗氧化肽对高脂饮食小鼠脂代谢及氧化应激的影响。将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、高脂组、高脂饮食+低剂量紫苏籽抗氧化肽、高脂饮食+高剂量紫苏籽抗氧化肽共4组,试验10周后,测定小鼠体质量、血清生化指标、肝脏甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol, TC),并分析脂代谢及肠道紧密连接蛋白的关键基因等指标。紫苏籽抗氧化肽显著降低高脂小鼠体质量及肝脏指数,显著降低血清中谷草转氨酶(Aspartate transaminase, AST)和谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase, ALT)、TG、TC、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein, LDL-C)、D-乳酸(D-lactic acid, D-LA)、二胺氧化酶(Diamine oxidase, DAO)和血糖水平,显著提高了小鼠血清中高密度脂蛋白(High-density lipoprotein, HDL-C)水平,减少肝脏和肠道中活性氧(Reactive oxygen species, ROS)水平,提高了肝脏...     

酶解乳清浓缩蛋白WPC80制备乳清肽的研究

用乳清浓缩蛋白WPC80 为原料,在复合酶A 的作用下,研究乳清肽的制备工艺。复合酶A 的反应条件为[S]12g/100mL、温度50℃、[E]/[S]3%、pH9.0。选用截留分子质量10kD 的磺化聚砜膜,常温并在工作压差0.25MPa 下对水解液进行超滤处理后,选用树脂HZ00x 对水解液进行脱苦,得到的处理液无明显的苦涩味,只有轻微的蛋腥味,最后肽得率36.54%。产品中肽的分子质量分布以二、三和四肽为主,分别占峰面积的27.45%、34.88% 和26.65%。     

复合酶酶解乳清制备抗氧化肽的工艺优化及应用

以鲜牛乳为原料,预热杀菌,采用复合酶(中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)一步酶解乳清蛋白制备抗氧化肽,为乳清的转化利用及提高其附加值提供一条可行的途径。以羟自由基清除率为指标,在单因素试验的基础上采用响应面法分析最佳酶解工艺参数。结果表明,最佳酶解条件为温度55.22℃,pH值为6.46,酶量比(中性蛋白酶∶木瓜蛋白酶)31∶10。在此条件下乳清抗氧化肽的实际羟基自由基清除率为67.70%,与预测值68.08%偏差较小,说明该模型可靠。将制得乳清在羟自由基清除率最高的条件下水解得乳清酶解液与枸杞子、桑葚、蜂蜜、柠檬酸等一起调配得到桑葚枸杞乳清多肽复合饮料。     

乳清蛋白肽对幼年大鼠生长发育的影响

目的：探讨乳清蛋白肽对幼年大鼠体格、长骨发育及血液参数的影响。方法：40 只雄性断乳SD 大鼠随机分为1 个阴性对照组和低(0.225%)、中(0.45%)、高(1.35%)3 个乳清蛋白肽干预组,每组10 只动物。连续喂养42d,期间每周测量体重和身长一次,计算食物利用率,实验结束时对每只大鼠进行血液常规和生化标检测,并测定股骨长度、直径、骨矿物质含量和密度。结果：中、高剂量乳清蛋白肽干预组大鼠体重及食物利用率较对照显著增高;高剂量组大鼠股骨近端骨密度及矿物质含量较对照显著增加;乳清蛋白肽干预组大鼠股骨干重、长度和直径较对照有增加趋势,但尚未见统计学差异;中、高剂量组大鼠血肌酐和血尿酸含量较对照组显著降低。结论：一定剂量的乳清蛋白肽能够促进幼年大鼠体格发育和增加长骨矿物质密度。     

酶解方式对核桃蛋白肽及其抗氧化活性的影响

分别采用7种蛋白酶对核桃蛋白进行单酶水解,并与双酶复合酶解进行比较,考察不同酶解方式对酶解产物水解度、短肽得率和抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶单酶酶解核桃蛋白,产物的水解度和短肽得率显著高于其它单酶处理,分别达到18.94%和76.37%,对DPPH自由基清除能力的IC50值仅为3.23mg/mL,抗氧化活性显著高于其它处理;将碱性蛋白酶分别与其它蛋白酶组合酶解,核桃蛋白酶解产物的水解度和短肽得率均有所提高,其中与木瓜蛋白酶组合处理的水解度可达28.36%,短肽得率可提高至85.62%。双酶酶解产物对提高清除DPPH自由基和羟自由基的活性不显著,碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的组合可以显著提高酶解产物清除超氧阴离子自由基的活性。     

微波辅助酶解对甲鱼蛋白肽抗氧化活性的影响

在研究微波处理对中性蛋白酶活性的影响基础上,以DPPH·(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)清除率和DH(水解度)为评价指标,设计正交试验,考察微波功率、微波时间、酶添加量、底物含量对甲鱼蛋白酶解产物水解度及抗氧化活性的影响。结果表明,微波功率300 W、微波时间5 min、酶添加量5%、底物含量8%,DPPH·清除率达(88.79±0.68)%,对应的水解度为12.99%,较未被微波处理的肽DPPH·清除率(77.45±0.76)%,提高11.34%。采用红外光谱分析结构与抗氧化活性的关系表明,经微波处理后红外吸收光谱在1 653 cm-1处的C=O伸缩峰,651 cm-1处的-(CH2)n-峰发生偏移,且峰形更为尖锐,显示微波处理后甲鱼小分子肽的二级结构发生改变,有利于提高肽的抗氧化活性。微波处理能提高甲鱼蛋白的酶解效率和抗氧化活性。     

干酪乳清酶解产物抗氧化肽的分离和纯化

干酪乳清Alcalase 2.4L酶解的最优条件,即酶解时间为2 h、pH 9.5、酶与底物比为4%、酶解温度为50 ℃。利用超滤、葡聚糖凝胶层析和三羟甲基氨基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（tricine-sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,tricine SDS-PAGE）等方法从干酪乳清中提取抗氧化性蛋白肽。分别考察操作压力、料液温度、料液pH值、操作时间对超滤膜膜通量的影响。乳清酶解物超滤的最佳条件为：压力0.25 MPa、温度30 ℃、时间120 min、初始pH 9.0。分子质量4 000～6 000 D肽的水解液脂质过氧化抑制率最高,达到47.28%。利用Sephadex G-50型葡聚糖凝胶进行纯化,将分离的组分进行Tricine-SDS-PAGE分析和脂质过氧化抑制率的测定。第34管洗脱液的脂质过氧化抑制率最高,分子质量范围为4 000～4 100 D。     

酶解对乳清蛋白抗原性影响的研究

研究了酶解对乳清蛋白抗原性的影响。选择了7种常见蛋白酶在同一水解模式下水解乳清蛋白，用竞争ELISA法测定水解物的残留抗原性，从而间接测定其过敏性变化。结果表明，酶解能有效降低乳蛋白抗原性，但水解物仍能与特异抗体反应，保留一部分抗原性。不同酶对乳清蛋白过敏原的影响不同，酶的特异性对乳清蛋白水解物的抗原性有较大的影响，碱性蛋白酶降低乳蛋白抗原性的效果最佳，对抗β-乳球蛋白（β-LG）和抗α-乳白蛋白（α-LA）抗体的抗原性分别降低了50．02％和99．72％。     

乳清蛋白源抗氧化肽的酶法制备及评价方法的研究进展

氧化应激可引起细胞损伤和多种慢性疾病,饮食中的抗氧化剂可以帮助人体清除自由基。人工合成的抗氧化剂虽然具有很强的活性,但在机体内存在潜在的风险,因此,人们把目光转向了天然的抗氧化剂。近年来乳清中的乳清蛋白因其衍生肽具有较强的抗氧化活性而备受关注。该文综述了乳清蛋白源抗氧化肽的酶法制备及抗氧化的作用机理,归纳并对比了其抗氧化活性评价方法,指出了目前乳清蛋白源抗氧化肽在动物机体内的活性评价及作用机理方面的研究仍存在不够深入的问题,以期为进一步综合利用乳清蛋白产品提供思路。     

模拟消化对乳清肽结构和抗氧化活性的影响

为开发乳清肽在抗氧化食品方面的应用,该研究通过酶解乳清蛋白获得乳清肽,以分子质量分布、紫外全波长扫描及圆二色光谱表征乳清肽在经模拟胃肠液消化后结构方面的变化;对比模拟胃肠液消化前后乳清肽的DPPH自由基清除率、ABTS＋自由基清除率、铁离子还原能力（ferric ion reducing antioxidant power,FRAP）及氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）。结果表明,乳清肽主要由分子质量为150 Da～1 000 Da的小肽组成,所占比例均高于80%;紫外全波长扫描显示模拟胃肠液消化以后乳清肽的氨基酸芳香杂环电子跃迁发生变化;圆二色光谱结果表明乳清肽对胃蛋白酶和胰蛋白酶的消化均具有一定的稳定性。此外4个抗氧化指标中除了DPPH自由基清除率外,其余3个指标在模拟胃肠液消化后抗氧化活性均有所提高,ORAC值在经模拟胰液消化后提升最明显（p＜0.05）。     

双歧杆菌脂磷壁酸对衰老小鼠脑Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的：研究双歧杆菌脂磷壁酸对D-半乳糖致衰老小鼠Bcl-2、Fas蛋白表达的影响,探讨双歧杆菌脂磷壁酸的抗衰老机制。方法：建立D-半乳糖衰老小鼠模型,以双歧杆菌脂磷壁酸治疗,免疫组化法观察小鼠脑海马区Bcl-2、Fas蛋白的表达。结果：与正常对照组比较,模型组Bcl-2蛋白表达降低,Fas蛋白表达增强（p〈0．01）,治疗组则无显著性差异;与模型组比较,治疗组Bcl-2蛋白表达增加,Fas蛋白表达降低（p〈0．01）。结论：双歧杆菌脂磷壁酸能降低衰老小鼠Fas表达水平,增加Bcl-2表达,具有抗衰老作用。     

谷氨酰胺转氨酶对酸奶乳清蛋白抗氧化活性的影响

以酸奶乳清为原料,将添加或不添加谷氨酰胺转氨酶(TG)分为TG组和空白组,通过3种截流分子质量的超滤膜对酸奶乳清蛋白进行分级分离,各自得到4种分子质量的超滤酸奶乳清蛋白(UFMP)。以DPPH·及还原力抗氧化体系研究各组分的抗氧化活性,采用SDS-PAGE和氨基酸自动分析技术研究各组分肽组成和游离氨基酸组成及其含量变化。结果表明:TG组各UFMP组分的抗氧化活性大于空白组;一些乳清蛋白肽组成和游离氨基酸种类及含量的显著变化(P0.05),这是导致组间抗氧化活性提高的主要原因。在空白组和TG组内,UFMP的抗氧化活性与其分子质量呈显著负相关(P0.05),这可能与小分子蛋白质活性基团的暴露及其空间结构的反应灵活性有关。     

高压均质对乳清蛋白糖基化产物抗氧化的影响

通过干法糖基化,以一定质量比例乳清蛋白和岩藻多糖(1︰3)作为糖基化反应原料,研究不同均质压力(0, 70和120 MPa)条件下乳清蛋白和岩藻多糖糖基化产物反应特性以及体外抗氧化活性。试验结果表明,高压均质可促进蛋白质和多糖的糖基化反应,乳清蛋白-岩藻多糖混合物在294 nm和420 nm的吸光度随着均质压力的增加而显著变化(p0.05), 120 MPa条件处理下的样品的褐变程度要远大于未处理组。DPPH自由基清除率试验结果表明,乳清蛋白-岩藻多糖混合物经高压均质处理后可提高其抗氧化能力,但是随着糖基化反应进行,乳清蛋白-岩藻多糖糖基化产物DPPH自由基清除率无显著差异(p0.05)。     

客家娘酒对衰老小鼠免疫功能及抗氧化的影响

目的:研究客家娘酒对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠抗氧化能力及免疫功能的影响。方法:采用腹腔注射D-半乳糖建立亚急性衰老小鼠模型,分别灌胃蒸馏水和不同浓度的黄酒,每天1次,连续灌胃45 d,测定小鼠肝、脑中的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,血清白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)以及胸腺、脾脏指数。结果:客家娘酒能显著提高衰老小鼠肝脏、脑SOD、GSH-Px活性,降低肝脏、脑中的MDA含量,能显著抑制衰老小鼠胸腺和脾脏指数的下降,显著降低血清IL-6、TNF-α水平。结论:客家娘酒具有增强衰老小鼠抗氧化能力以及调节免疫功能的作用。