麦角酰胺产生菌原生质体的紫外诱变育种

为了提高在一般条件下不易产生分生孢子的雀稗麦角菌的产碱率,对原生质体诱变育种的条件和方法进行了探讨。实验表明,对麦角酰胺产生菌的原生质体用紫外线照射5min、7min9、min进行诱变处理,可获得较稳定的高产突变株。麦角酰胺的产率由原始菌株的58mg.L-1提高到459mg.L-1,增加了约7倍,连续传代培养可以得到稳定的高产菌株,说明用原生质体进行诱变处理,对提高麦角酰胺的产率是可行的。     

美伐他汀产生菌的原生质体诱变育种

以美伐他汀产生菌SIPI-8915为出发菌,研究了影响原生质体形成和再生的各种因素并选出最佳条件,其再生频率达到23.5%;并对原生质体进行紫外诱变育种,筛选到变异株.该菌株摇瓶发酵效价比对照提高30%,传代稳定好.     

原生质体紫外诱变选育纤维素酶高产菌株

以绿色木霉T0为出发菌株,对其进行原生质体紫外谤变,通过刚果红透明圈平板初筛和油菜籽皮固态发酵复筛,得到一株稳定性好的纤维素酶高产菌株UVT12,其CMC酶活达到了1020.24 U·g-1,比出发菌株T0提高了124.3%.     

原生质体紫外诱变技术选育烟酰胺高产菌株

采用紫外线和氯化锂复合诱变技术,对烟酰胺产生菌Rhodococcus.equi的原生质体进行了诱变育种。原生质体制备和再生的最佳条件为:甘氨酸浓度2.6%,菌龄36 h,酶浓度2.0 mg/mL,酶解温度32℃,酶解时间40 min,原生质体的形成率达到94.6%。复合诱变的最佳条件:紫外线照射80 s,氯化锂浓度0.6%。最终获得一稳定高产3-氰基吡啶水合酶的菌株Rhodococcus.equi LY-PM09,其产酶酶活性为1 247 U/mL,比出发菌株提高了91.3%。     

原生质体紫外诱变选育达托霉素高产菌株

研究了达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌D-30原生质体制备及再生的条件。结果显示,D-30原生质体制备及再生的最适条件为:在种子培养基中添加0.6%的甘氨酸,当种子培养30h后,用浓度为2mg·mL-1的溶菌酶破壁,酶解温度为32℃,酶解时间为75min。在最适条件下制得的原生质体经紫外诱变处理后培养,最终筛选得到高产菌株D-35,该菌株的平均发酵单位较出发菌株提高了87.9%。     

紫外诱变季也蒙毕赤酵母原生质体筛选木糖醇高产菌株

目的通过对季也蒙毕赤酵母原生质体进行紫外诱变,筛选遗传性稳定的木糖醇高产菌株。方法制备季也蒙毕赤酵母DQ11的原生质体,计算原生质体生成率及再生率,并对制备过程中的酶浓度(0.5%、1.0%、1.5%和2.0%)、酶解温度(26、28、30、32和34℃)及酶解时间(1、2、3、4和5 h)进行优化。对采用最佳酶解条件制备的原生质体进行紫外诱变,分别检测诱变30、60、90、120和150 s时原生质体的致死率,经重复筛选,采用高效液相色谱法测定菌株发酵液的木糖醇含量,并检测筛选出的木糖醇高产菌株的遗传稳定性。结果最佳酶解条件为:酶浓度1.5%,酶解温度30℃,酶解时间3 h,该条件下制备的原生质体经紫外诱变90 s(最佳诱变时间)后,获得1株高产木糖醇诱变菌株YZ-57,其发酵液的木糖醇含量为9.78 g/L,比出发菌株DQ11提高了186%,且具有良好的遗传稳定性。结论季也蒙毕赤酵母原生质体经紫外诱变,成功获得一株季也蒙毕赤酵母木糖醇高产菌株YZ-57,且具有良好的遗传稳定性。     

康氏木霉的原生质体诱变

康氏木霉作为出发菌株,用溶壁酶对菌丝体进行破壁,提取原生质体再用紫外线做诱变处理,经多次筛选,从中选出一株酶活较高菌株,其FP酶活为36.2g/minmL,是原菌酶活的2.41倍。     

紫外和快中子结合诱变选育杆菌肽产生菌

在杆菌肽产生菌地衣芽孢杆菌的菌种选育中,利用紫外线照射和快中子辐射相结合的方法,获得突变株B-55,其摇瓶效价较出发菌株提高23%。经过5次传代实验,仍具有稳定的产抗生素特性。     

原生质体诱变筛选阿维菌素高产菌株

阿维菌素是阿维链霉菌次级代谢产生的具有抗寄生虫活性的抗生素,菌种的改良是提高阿维菌素产量的关键。通过原生质体诱变,以L-异亮氨酸作为筛选模型来筛选阿维菌素高产菌株。首先制备阿维链霉菌原生质体,之后原生质体细胞在搅拌状态下进行紫外诱变,最后在含有0.5%L-异亮氨酸抗性平板上进行培养,得到了一株比出发菌株阿维菌素B1a效价提高35.4%的新菌株。     

生物表面活性剂产生菌的诱变育种及特性研究

以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)FC-69为出发菌株,以排油圈直径和生物表面活性剂产量为考核指标,采用紫外线和亚硝基胍复合诱变,筛选到一株生物表面活性剂高产菌株FC-69-52,并对其遗传稳定性和特性进行了研究.结果表明,高产菌株FC-69-52的排油圈直径达到7.12 cm、生物表面活性...     

用原生质体法诱变选育林可霉素高产菌株

去壁后的微生物原生质体外层仅存原生质体膜,在诱变过程中,直接与诱变剂接触,诱变剂迅速内溶并与核作用.弥补了常规诱变育种表型延迟和严重的遗传分离现象的缺点,我们以林可霉素生产菌G4为出发菌株,首先制备原生质体,再通过对原生质体进行紫外诱变,经过平皿再生,再经过摇瓶初筛、复筛,得到一株生产性能比出发菌株提高3.2%的突变株Y19.     

谷氨酸产生菌诱变技术的研究进展

谷氨酸是工业发酵领域重要的氨基酸之一,由于菌种开发技术较为落后,使得谷氨酸产生菌的产酸率低。其中技术难度最高的是改变菌株特性,如何通过诱变技术使产酸率提高是目前该领域的研究热点。依据目前的研究成果,综述了物理诱变技术、化学诱变技术、复合诱变技术、常压室温等离子体诱变技术等四类技术的基本原理和应用进展,并对其今后的发展趋势进行了展望。     

60Co-γ对Cl.beijerinckii原生质体的辐照诱变

以产丁醇菌Cl.beijerinckii为出发菌株,将其原生质体化后进行60Co-γ辐照诱变,筛选出了一株稳定高产的变异株.原生质体的最优制备条件为:将培养至15 h的细胞添加1 g·L-1甘氨酸和0.3 U·L-1青霉素培养2 h后,37℃下,2×104 U·L-1溶菌酶作用8 h脱壁.经平板计数,原生质体形成率可达99.82%,原生质体再生率达10.12%.采用60Co-γ射线进行辐照诱变,当辐照剂量率5 Gy·min-1,辐照剂量为500 Gy时,原生质体致死率可达99.3%.经反复筛选,获得一株丁醇高产菌株R3,该菌具有较高的遗传稳定性.在P2半合成液体培养基中,37℃下静置培养72 h,总溶剂产量较出发菌株提高81.46%,丁醇产量提高85.41%.     

应用原生质体诱变技术筛选井冈霉素高产菌种的研究

诱变育种是抗生素菌种选育中最常规而又最有效的方法，对微生物原生质体进行诱变育种是目前人们为获取高产菌种和保持高产菌种特性的一种行之有效的方法。本文研究井冈霉素产生菌原生质体制备及再生条件，并通过对原生质体进行紫外线诱变处理，筛选得到井冈霉素高产菌种PU-922，摇瓶发酵水平可达到每毫升26 586单位（以A组份计，补足蒸发量后数据，下同），比出发菌株提高34.5%。 1 材料与方法 1.1 菌株 井冈霉素产生菌UV-199，浙江钱江生物化学股份有限公司菌种室提供。 1.2 培养基及试剂 1.2.1 斜面及培养基 葡萄糖1.0%，L-天冬…     

复合诱变原生质体选育重金属去除菌

微生物对重金属具有一定的积累作用。但由于不同吸附菌株在生理生化特性上，如对生长、处理条件的耐受性，对重金属的抗性和解毒能力等均具有一些不足，限制了生物法在重金属废水处理中的应用。通过诱导育种构建具有良好的生长性能和重金属处理性能，并对环境无害的工程菌是实现该工艺实际应朋的关键因素之一。     

虾青素产生菌单线态氧NTG诱变育种

采用了单线态氧和亚硝基胍相结合对法夫酵母进行三次诱变处理，经过多次的初筛、复筛，得到了高产虾青素的菌株3-139，和出发菌株L-01相比，其类胡萝卜素总量提高了40％，从7μg.mL^-1提高到9．83μg.mL^-1。虾青素的比率也从72％提高到78％，并且稳定性良好。     

截断侧耳素菌微波诱变育种方法研究

通过研究间隔微波对截断侧耳素菌种诱变的影响,以截断侧耳素PL-32菌液为试验对象,对不同微波诱变剂量进行对比试验,得到最佳微波诱变火力和时间,并成功诱变出一株高产菌株PL-32-02。     

原生质体复合诱变选育刺芹侧耳木质素降解酶高产菌株

通过对刺芹侧耳(Pleurotus eryngiiGIM5.280)原生质体开展复合诱变及传代培养,以期得到遗传稳定的木质素降解酶高产菌株。结果表明,通过25s紫外诱变刺芹侧耳原生质体,正突变率达16%。对紫外诱变正突变株进行60Coγ二次复合诱变再生,获得五株正突变突出菌株。经过摇瓶发酵实验,发现这五株菌株产木质素降解酶能力较出发菌株明显提高。同时开展高产菌株的传代培养,检验其传代稳定性。连续传代四代测试结果表明,007号和167号菌株遗传的稳定性表现突出,发酵液中木质素降解酶产量稳定。尤其是007号菌株产酶可达到110U·mL-1,比出发菌株的酶活表达量提高54.3%。复合诱变能明显提高刺芹侧耳产木质素降解酶能力。     

东方拟无枝酸菌原生质体激光诱变选育

为了选育去甲基万古霉素高产菌,以东方拟无枝酸菌07-8-32为出发菌株,制作原生质体,经氦氖激光处理后分离。经过21批次的筛选得到的突变株08-8-48效价比出发株高27.3%,且菌丝状态、传代稳定性好。