盐酸特比萘芬溶液的透皮吸收

目的: 观察1 %盐酸特比萘芬溶液经皮肤给药后药物在体内的吸收性和蓄积性。方法: 6 只新西兰大白兔, 每兔皮肤单次涂药液8 ml·d^-1, 收集24 h 内药时血样。随后连续涂药液7 d, 收集每日峰、谷浓度血样, 用高效液相色谱(HPLC) 测定兔血清特比萘芬血药浓度。结果: 药物透皮吸收3 h C_max 8. 3 ±3. 7 μg·L^-1, 随着血药浓度下降维持一个较低水平。连续7 d, 药峰浓度在d 3 达10. 5 ± 3. 0 μg·L^-1, 随后数日峰浓度维持于一平台水平, 谷浓度无明显变化。结论: 1 %盐酸特比萘芬溶液没有体内累积现象。     

简单灵敏的HPLC法测定人血浆中头孢丙烯浓度

目的: 建立血浆中头孢丙烯的HPLC检测方法。方法: 采用高效液相色谱检测法,分析柱为Hypersil BDS C₁₈ (200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为 20 mmol/L 乙酸铵/10%乙酸(pH=3.7)∶乙腈=92∶8(V/V),流速 1.0 mL/min,柱温 30 ℃,检测波长 282 nm,进样量 20 μL。血浆样品用三氟醋酸直接沉淀后,取上清进样分析。结果: 头孢丙烯在 0.10~10.01 μg/mL 范围内线性关系良好(r=1.0000),最低定量浓度为 0.10 μg/mL,日内日间RSD均<15%(n=15)。结论: 研究建立的HPLC法快速、简便、高效,精密度和准确度高,适合血样中头孢丙烯浓度的检测。     

内皮素受体拮抗剂CPU-0213 血药浓度的HPLC 测定法和药动学研究

目的: 建立内皮素受体拮抗剂CPU-0213 在小鼠和大鼠血清中的检测方法, 测定单次静脉注射(iv) CPU-0213 80 mg·kg^-1后在小鼠和大鼠体内的药代动力学。方法: 用HPLC 测定小鼠和大鼠血清中的药物浓度, 3P97 程序拟合药动学参数。结果: CPU-0213 在0.4～200 μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9998), 最低检测浓度为35 μg·L^-1。日内差小于2.7 %, 日间差小于6.3 %, 方法回收率大于95.9 %。CPU-0213 在小鼠和大鼠体内的药-时数据均符合二室模型, 消除半衰期分别为83.0±1.8 min 和96.6±11.5 min 。结论: 该方法灵敏、简单, 专属性强, 重现性好。单次iv CPU-021380 mg·kg^-1后, 在小鼠和大鼠体内的药代动力学未见种属差异性。     

口服阿昔洛韦片的相对生物利用度

目的 观察两种阿昔洛韦片剂的人体相对生物利用度。方法 9 名健康志愿者随机交叉口服单剂量 400mg 仙居产或丽珠产阿昔洛韦片后, 采用 HPLC 法测定不同时间血药浓度, 并计算生物利用度参数。结果 仙居与丽珠产阿昔洛韦片主要生物利用度参数均值分别为:T_p 为 1.6和 1.7h, AUC 为 3.496和 3.693 μg/ml·h, C_max 为 1.011和 0.997 μg/ml, MRT 为 3.27和 3.53h。结论 经双向单侧检验法分析表明仙居与丽珠产阿昔洛韦片剂生物等效。     

LC-MS 法测定Beagle 犬血浆中苦参碱及其药代动力学

目的: 建立Beagle 犬血浆中苦参碱的LC-MS测定法, 测定其药物动力学及绝对生物利用度。方法: 采用Lichrospher C18 柱, 250 mm×4.6 mm(ID),5 μm, 柱温:25 ℃;流动相:10 mmol·L^-1醋酸胺水溶液∶甲醇(25 ∶75), 流速:1 ml·min^-1 。电喷雾离子化(ESI) 方式, 采用选择性离子检测, 检测离子为正离子, 苦参碱的离子是[M+H] +, m/z 249.2 。结果: 苦参碱在2～5 000 μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9975), 最低检出限达0.3 μg·L^-1。日内和日间误差均小于4.5 %, 方法回收率大于96.6 %;药-时数据符合二室模型, C_max 为3821±705 μg·L^-1, T_max为0.4±0.1 h, T_1/2β为11.2±2.1 h,AUC_0→∞为7446±1456 μg·h·L^-1, 绝对生物利用度为(60.1±19.0) %。结论: 该法灵敏、快速、简单, 专属性强, 苦参碱在Beagle 犬体内有较高的绝对生物利用度。     

乳大鼠表皮细胞体外培养及环孢素A对其增殖抑制作用

目的 观察无表皮生长因子(EGF)条件下体外培养乳大鼠表皮细胞生长特点, 及不同浓度的环孢表A (CSA)对细胞增殖的影响。方法 用单细胞悬液法体外培养出生24 h 内的乳大鼠的表皮细胞, 观察其生长曲线和CSA 对细胞增殖的抑制作用。结果 在无EGF 条件下, 细胞培养的最长时间为15 天。接种24 h 开始贴壁, 第2 天开始生长, 第5 ~ 7 天达高峰, 第10 天开始在胞浆中出现空泡, 以后逐渐死亡。1 μg/ml CSA 在24 h、48 h 对细胞增殖无明显抑制作用, 72h 时的抑制率为15 %; 3 μg/ml CSA 在24 h 也无抑制作用, 48 h 和72 h 的抑制率分别达18%和30%; 6 μg/ml CSA 培养24 h、48 h、72 h 后抑制率分别为16 %、40 %和65 %。结论 无EGF 时培养的乳大鼠表皮细胞在5 ~ 7 天生长达高峰, 最长培养时间为15 天。CSA 对细胞增殖有抑制作用, 且有明显的浓度和时间依赖性。     

固相萃取HPLC检测生物样品中甲苯磺丁脲和代谢产物及其人体药代动力学研究

目的: 建立固相萃取高效液相色谱测定人血浆和尿液中的甲苯磺丁脲和代谢产物浓度的方法,并用于研究甲苯磺丁脲人体代谢过程。方法: 固相萃取净化和富集样品,建立高效液相色谱法测定人血清和尿中曱苯磺丁脲和代谢产物的浓度。色谱条件:色谱柱为 Waters Spherisorb 5 μm Phenyl 色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-0.02mmol·L^-1 pH 3.3乙酸钠缓冲液(28:72),流速1 ml·min^-1,检测波长:230 nm。用该方法测定10名健康志愿者单次口服500 mg曱苯磺丁脲后血清和尿液中药物及其代谢产物浓度,应用3p97计算其的药动学参数。结果: 血浆曱苯磺丁脲线性范围为2~lOOμmol·L^-1 (r=0.999),回收率为105.1%~103.9%。尿液羧基曱苯磺丁脲、4-羟基甲苯磺丁脲和甲苯磺丁脲的线性范围为 2~50 μmol·L^-1 (r=0.999)、1~50 μmol·L^-1 (r=0.999)和 1~50 μmol·L^-1 (r=0.999),回收率为 98.8%~100.1%、95.4%~103.5%和97.7%~106.6%。各样品的日内、日间精密度均矣15%。健康志愿者单次口服500 mg甲苯磺丁脲的 AUC_0-∞ 为 2644.6±472.8 μmol·h^-1·L^-1,T_max是 1.4±0.6 h,C_max是235.8±47.3 μmol·L^-1,t_1/2为 6.9±2.1 h,MR_0-24=277.5±125.6。结论: 甲苯磺丁脲及其代谢产物的固相萃取高效液相色谱法灵敏、准确,重复性好,可用于甲笨磺丁脲的体内过程研究。甲苯磺丁脲代谢产物主要经尿液排出。     

高效液相色谱法测定犬全血中两种基喜树碱活性成份

目的: 建立高效液相色谱法(HPLC)测定犬全血中羟喜树碱两种活性成份羧酸型羟喜树碱(CHCPT)和内酯型羟喜树碱(L-HCPT)含量的方法。方法: 采用HPLC-荧光法, 检测器激发波长为363 nm, 发射波长为550 nm, Discovery C18 色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-三乙胺-0. 05 mol·L^-1 磷酸氢二钾缓冲液(34 ∶5 ∶ 1 ∶60, pH:6. 8), 流速1. 0 ml·min^-1,N2000 色谱工作站采集数据, 外标法计算药物浓度。结果: 全血样品中C-HCPT 、L-HCPT峰分离良好, 内源性杂质不干扰样品峰, 最低检测浓度为2. 5 μg·L^-1。C-HCPT 、L-HCPT 浓度范围在2. 5 ～ 1500 μg·L^-1间呈线性相关, 回归方程分别为y=11196x-921. 56 和y =11840x-5188. 4, 相关系数分别为r =0. 9998 和0. 9991, 绝对回收率分别为85. 5 %～ 98. 6 %和78. 4 %～ 89. 1 %, 相对回收率分别为100. 7 %～ 103. 9 %和96. 8 %～ 102. 0 %, 日内和日间变异均小于15. 0 %, 提取后样品-75 ℃ 冻存7 d 稳定。结论: 本实验方法具有专属性, 且灵敏、可靠, 适用于HCPT 类制剂给药后血药浓度的检测,有助于深入研究HCPT 两种活性成份C-HCPT 和LHCPT在体内的药代动力学特征。     

萘普生缓释胶囊的药代动力学和生物利用度研究

目的 通过健康受试者的双交又试验比较萘普生缓释胶囊与普通片的药物动力学和生物利用度。方法 10位健康受试者一次服用这两种制剂500mg,在稳态试验中8位受试者接受两种制剂5天,缓释胶囊500mg每天一次,普通片每天两次,每次250mg。血药浓度用HPLC方法测定。结果 一次服药试验证明该缓释胶囊血药浓度上升缓慢,浓度变化平稳,C_max为85.9μg/ml,T_peak为6.0h,而普通片的C_max为140.4μg/ml,T_peak为3.2h,两种制剂的生物利用度相当,缓释胶囊与普通片生物等效。通过8位健康受试者交叉连续服用萘普生缓释胶囊与普通片的稳态药代动力学研究表明,到第3天给药后已达到稳态,由第5天给药后的血药浓度测定数据计算其主要的稳态药代动力学参数,缓释胶囊的峰浓度(C_max)、峰谷比和波动度(DF)明显低于普通片,这些参数分别为73.1pg/ml、1.48和37.7%;而普通片的上述参数分别为100.8 ug/ml、2.51和78.2%。结论 奈普生缓释胶囊具有缓释作用,能较好维持血药治疗浓度。     

同时测定人血浆中甲砜霉素和前药甲砜霉素甘氨酸酯浓度及其药代动力学研究

目的: 建立一种简单、灵敏同时测定人血浆中甲砜霉素(TAP)及其前药甲砜霉素甘氨酸酯(TG)的高效液相色谱法。方法: 24名健康志愿者随机分为三组,分别静脉滴注低(0.5 g)、中(1.0 g)、高(1.5 g)三个剂量的注射用盐酸甲砜霉素甘氨酸酯;采用乙酸乙酯萃取法处理血浆,色谱柱为 Hypersil ODS₂(5 μm,4.6 mm×200 mm 大连,依利特),流动相为乙腈-水(0.003 mol/L 四丁基溴化铵与 0.056 mol/L 乙酸铵) =13∶87(pH=6.6),流速为 1 mL/min,检测波长为 224 nm。结果: 血浆中TAP和TG标准曲线线性范围均为 0.78~100 μg/mL,高、中、低(0.78、6.25、100 μg/mL)三种浓度的日间和日内变异均小于 15.0％,血浆经室温 4 h 或者-70 ℃ 冷冻放置,冻融两次均显示TAP稳定性较好。结论: 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于TAP和TG的药代动力学研究。     

肾病综合征患者可溶性白介素2受体变化及意义

目的 研究肾病综合征患者可溶性白介素2受体（SIL-2R)变化及临床意义。方法 36例肾病 综合征患者及20例徤康志愿者血、尿标本, 用EL IS A法检測其SI L-2R浓度。结果 肾病综合 征发作期（252 ± 109u/ml, 167 ± 80u/ml, n = 22)血清及尿液SIL-2R浓度明显高于肾病综合征 缓解期（120±26u/ml, 101±46u/ml, w = 14)及徤康对照者（113± 110u/ml, 84± 18u/ml, n = 20, P<0. 01);肾病综合征缓解期和健康对照者无明显差别（P> 0. 05)。血清SIL-2R浓度和 血肌酐浓度呈正相关（r = 0. 44, P< 0. 01);尿液SIL-2R、浓度和來蛋白是呈正相关（r = 0. 48, P< 0. 01)。结论 SIL-2R浓度升高可作为肾病综合征活动及（或）肾功能恶化的指标。     

国产司帕沙星体外抗菌作用研究

目的 比较司帕沙星(SPLX) 与洛美沙星(LMLX)、环丙沙星(CPLX)、氧氟沙星(OFLX) 和依诺沙星(ENX) 的体外抗菌活性。方法 采用琼脂平板稀释法测定MIC, 以NCC Ls 标准判读敏感性。结果 SPLX 对受试菌的抗菌活性最强, MIC₉₀为2 mg·L^-1, 而LMLX、CPLX、OFLX 和ENX 的MIC₉₀ 分别为16、16、16 和32 mg·L^-1。SPLX 的MIC 几何均数(MIC_g) 显著低于LMLX、OFLX 和ENX, 略低于CPLX。SPLX 对革兰氏阳性球菌的敏感率为100%, 明显高于其它对照药物。结论 SPLX 比其他氟喹诺酮类抗菌谱扩大、抗菌活性增强。     

高效液相色谱法定量尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度

目的: 建立高效液相色谱法测定尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度。方法: 用Agilent ZORBAX SB-Aq column色谱柱,ZORBAX-Extend C₁₈预柱,以甲醇和 47 mmol/L KH₂PO₄水溶液作为流动相,流速:1.0 mL/min,检测波长为 260 nm。结果: 血清中尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的线性范围分别是(1.667~166.667)×10³ ng/mL (r=0.9995)、(0.033~3.338)×10³ ng/mL(r=0.9994)和 (0.033~3.338)×10³ ng/mL (r=0.9996),日间与日内精密度均<15%。结论: 该法灵敏度高,精密度和准确度佳,能满足非布司他体内药效学研究。     

神经生长因子颅内注射治疗颅内血肿微创清除术后高血压性脑出血的疗效评价

目的: 对神经生长因子颅内注射治疗颅内血肿微创清除术后高血压性脑出血的疗效进行评价。方法: 将90 例颅内血肿微创清除术后的高血压性脑出血患者随机分为3 组, 每组30 例:对照组, 微创清除术后每日给予生理盐水2 ml 颅内注射, 4 d 后改为每日注射用水2 ml 肌注;治疗1 组, 微创清除术后每日给予生理盐水2 ml 颅内注射, 4 d 后改为每日神经生长因子2 ml 肌肉注射;治疗2 组, 微创清除术后每日给予神经生长因子2 ml 颅内注射, 4 d后改为每日神经生长因子2 ml 肌肉注射, 3 组疗程均为14 d 。采用卒中临床神经功能缺损评分、日常生活活动(ADL) 量表评分及死亡率等方法对治疗1月后进行疗效评定。结果: 3 组病例死亡率分别为对照组(13. 3 %) 、治疗1 组(10. 0 %) 、治疗2 组(10. 0 %) (P >0. 05); 治疗1 组和治疗2 组的显效率和总有效率分别为(40 %, 66. 67 %) 和(70 %, 80 %), 比对照组(20 %、36. 67 %) 高(P<0. 05); 治疗1 组和治疗2 组ADL 量表评分比对照组好(P<0. 05) 。结论: 神经生长因子能提高颅内血肿微创清除术后高血压性脑出血的临床疗效, 降低致残率, 明显提高病人的生活质量, 颅内注射效果更好。     

正交实验建立蛇毒抗瘤蛋白生物活性测定方法

目的: 建立蛇毒抗瘤蛋白生物活性测定方法。方法: 用正交实验确定实验条件, 求细胞 50%死亡时的样品浓度, 即 IC 50 值。结果: 此法使细胞死亡率与样品 的 Log 浓 度具 有良好 的线 性关 系 (r =0.9515, P <0.01), 重复性实验结果:板内 RSD 值为12.3%, 板间 RSD 值为 16.6%;不同实验次数 RSD值为 17.8%, 灵敏度为 36 μg°L^-1, 并能反应出蛇毒抗瘤蛋白的抗肿瘤特异性。结论: 此方法特异, 简便且具有良好的重复性, 可以作为蛇毒抗瘤蛋白生物活性的测定方法。     

格列嗪及二甲双胍对Ⅱ型糖尿病人血清胰岛素样生长因子-1,2的影响

目的 探讨临床常用的口服降糖药物格列吡嗪及二甲双胍和对Ⅱ型糖尿病人血清胰岛素样生长因子-1, 2(IG F-1, 2)的影响。方法 采用治疗前后自身对照研究, 分别给予格列吡嗪或二甲双胍治疗2w k, 比较两种药物对Ⅱ型糖尿病患者空腹IGF-1,IGF-2 血清水平的影响。结果 二甲双胍治疗组(25例)空腹血清IGF-1, IGF-2 治疗后无明显变化;格列吡嗪(40 例) 治疗后空腹血清IGF-1 升高[ (181.8±104.5)v s (209.0 ±88.2)ng·ml^-1 ,(P <0.05)], IGF-2 治疗后无明显变化;治疗后2组血糖均明显下降(P 均<0.01), 格列吡嗪组治疗后C 肽水平明显升高(P <0.05), 二甲双胍组治疗后C 肽水平无明显变化。结论 格列吡嗪和二甲双胍对Ⅱ型糖尿病患者血清IGF-1 水平有不同的影响。     

汉族儿童N-乙酰化代谢表型分布及其与21-三体综合征和假肥大性肌营养不良症相关性研究

目的 以咖啡因为代谢探针,研究汉族儿童N-C酰化代谢表型分布规律及其与21-三体综合征（DS)和假肥大性肌营养不良症（DMD)相关性。方法 根据参试者尿中咖啡因代谢物5-已酰II基-6-甲酰II基-3-甲基尿嘧啶（AFMU)和甲磺嘌呤（IX)峰高比的对数值（IgAFMU/lX)绘制频率分布直方图,寻找区分快、慢乙酰化代谢表型的截点,确定患儿和健康儿童的N-乙酰化代谢表型分布。结果 正常儿童乙酰化代谢表型分布直方图呈双态性,截点明显,为0.25 (IgAFMU/lX),慢乙酰化代谢表型个体为16.9%,而DS和DMD患儿則分别为41.9%和50%(x²分别为8.287和11.387,P<0.05)。男、女和>6岁与≤6岁儿童快、慢乙酰化代谢表型分布差异无显著性。结论 汉族儿童乙酰化代谢表型分布呈多态性,与成人相似。年龄和性别对结果无显著影响。     

复方861对大鼠肝星状细胞增殖及胶原合成的影响1

目的 观察中药复方861对体外培养肝星状细胞增殖及胶原合成的影响。方法 分离培养大鼠肝星状细胞, 传一代后加入不同浓度的复方861 作用48 小时, 以MT T 比色法检测对细胞增殖的作用。传一代细胞以10 mg/ml复方861作用48小时后, 以ELISA法、斑点杂交法检测胶原蛋白分泌及相应mRNA 水平的变化。结果 1.56~100 mg/ml 复方861(经0.45 μm 滤膜过滤)可使MTT转化率下降, 细胞增殖受抑, 呈明显的剂量依赖性;10 mg/ml 复方861 可使I 、III 、IV 型胶原及转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA 水平及相应蛋白分泌量下降。结论 复方861 抗纤维化的部分机理在于抑制活化肝星状细胞的增殖及胶原蛋白的合成, 从而减少胶原纤维在肝脏内的沉积。