响应面法优化羊肚菌多糖的提取工艺

针对羊肚菌多糖的提取,通过单因素实验,根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,确定各工艺条件的影响因子,以羊肚菌多糖提取率为响应值作响应面和等高线图。结果表明,羊肚菌多糖水浸提的最佳工艺条件为提取温度85.03℃,浸提时间147.75min,水料比30.58:1,浸提1次时,羊肚菌多糖的提取率为5.305%。     

羊肚菌胞内多糖MEP-II的分离纯化及其性质分析

从羊肚菌发酵的菌丝体中提取粗多糖,经DEAE-Sepharose F.F和Superdex 200柱层析纯化得到MEP-Ⅱ,琼脂糖电泳法和HPLC法鉴定其为均一组分.凝胶过滤法测得其分子质量为2.8×104u,比色法测其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为87.5%、8.4%和23.2%.红外光谱呈现多糖的特征吸收峰,含有β-吡喃糖苷键.气相色谱法得其单糖组分为鼠李糖(Rha)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man),它们的摩尔比为2.111.335.61.0,β-消去反应初步表明其存在O-糖肽键.     

羊肚菌多酚氧化酶性质的研究

本文研究了温度、pH值等对羊肚菌多酚氧化酶(MEPPO)活力的影响及其热稳定性和以邻苯二酚为底物的动力学。结果表明：MEPPO最适反应温度为50℃；温度低于60℃时，MEPPO的稳定性较高，而在70℃保温4h时，活性几乎完全丧失；MEPPO最适pH值为7．0；以邻苯二酚为底物的最大反应速度Vmax=0．02AA／min，Km=0．00588。     

羊肚菌胞内多糖MEP-Ⅱ的分离纯化及其性质分析

从羊肚菌发酵的菌丝体中提取粗多糖,经DEAE-Sepharose F.F和Superdex 200柱层析纯化得到MEP-Ⅱ,琼脂糖电泳法和HPLC法鉴定其为均一组分。凝胶过滤法测得其分子质量为2.8×10~4u,比色法测其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为87.5%、8.4%和23.2%。红外光谱呈现多糖的特征吸收峰,含有β-吡喃糖苷键。气相色谱法得其单糖组分为鼠李糖(Rha)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man),它们的摩尔比为2.1:11.3:35.6:1.0,β-消去反应初步表明其存在O-糖肽键。     

Isolation,Purification, and Characterization of Polysaccharides from Wide Morchella esculenta (L.) Pers

A new polysaccharide (MEP-1) was isolated from fruit body of wide Morchella esculenta (L.) Pers with a stepwise procedure of hot water extraction, removal of the protein, dialysis against water, DEAE-Cellulose A52 and Sephadex G-100 columns. Physicochemical properties of the polysaccharide was determined by chemical methods, high-performance gel permeation chromatography, high performance liquid chromatography, paper chromatography, ultraviolet spectrum, and infrared spectrometry. The polysaccharides were primarily polymers of glucose, mannose, galactose, and arabinose. The average molecular mass was 43625 Da.     

羊肚菌多糖的提取优化及抗氧化活性研究

摘要：目的 对羊肚菌多糖（Morchella esculenta polysaccharides,MEP）的提取工艺进行筛选优化,获得最佳工艺和最佳活性组分。方法 采用热水浸提（Hot water extraction,HWE）、柠檬酸提取（Citric acid extraction,CAE）、碱提（Alkaline solution extraction,ASE）和低共融溶剂提取（Deep eutectic solvent extraction,DESs）4种方法,获得4种多糖（MEP-W、MEP-S、MEP-A和MEP-D）,通过比较选出最佳方法,采用响应面设计获得最佳工艺,采用乙醇分级获得三个组分MEP30、MEP60和MEP80,通过自由基清除试验（DPPH· 和·OH）和还原力测定评估其抗氧化活性。结果 HWE为最佳方法,最佳提取工艺为：时间3 h,液料比44∶1（mL/g）,温度83.6℃,提取得率为（8.13±0.38）%。MEP80在三个组分中清除·OH能力和还原力最强,EC50和RP0.5AU分别为0.44 mg/mL和1.52 mg/mL,高于其前体物MEP-W。结论 热水浸提为最佳方法,MEP80为抗氧化活性的最佳组分,值得进一步研究。     

Structure,conformation and immunomodulatory activity of a polysaccharide from Morchella sextelata

Fungal polysaccharides are novel ingredients in functional foods with diverse medicinal properties. Here, a polysaccharide, MSP2-1, was isolated from Morchella sextelata fruiting bodies and purified using column chromatography. MSP2-1 (371.5 kDa) is a branched (1 → 4)-α-D-glucan with the O-6 or O-3 position occupied by α-D-Glcp. Light scattering analysis revealed that MSP2-1 has a spherical conformation in 0.9% NaCl solution; this was confirmed using transmission electron microscopy. Finally, MPS2-1 was found to promote proliferation, NO release and cytokine secretion in RAW264.7 cells through a mechanism involving Toll-like receptor 4. Collectively, these results highlight the potential application of MSP2-1 as an immunoenhancing compound for hypoimmunity.     

两种羊肚菌胞内多糖体外抗氧化性

用水提醇沉法提取北京羊肚菌(MB)和淮阴羊肚菌(MH)菌丝体胞内多糖(IPS1),经脱色及脱蛋白得纯化多糖(IPS2)。采用水杨酸法测定IPS1 和IPS2 对·OH 的清除作用;邻苯三酚自氧化法测定IPS1 和IPS2 对O2·的抑制作用。结果表明： IPS1 和IPS2 均能明显地清除·OH 和抑制O2·的能力,在1～5mg/mL 质量浓度范围,抗氧化活性随质量浓度的增加而增加。MB 和MH 提取的IPS1 和IPS2 清除O2·能力差异不显著,MB 和MH 提取的IPS1清除·OH 能力的差异也不显著,MH 提取的IPS1 和IPS2 之间清除·OH 能力差异显著,质量浓度为5mg/mL 时,IPS1 清除能力只有22.57%,而IPS2 清除能力高达46.27%,表明MH 的胞内多糖的清除·OH 能力明显高于MB 胞内多糖。     

羊肚菌菌丝体锌多糖的体内、体外抗氧化作用

对羊肚菌菌丝体通过液体富锌培养获得锌多糖,对其体内、体外抗氧化作用进行了研究。采用Fenton法、 邻苯三酚自氧化法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）还原法对羊肚菌菌丝体锌多 糖的体外抗氧化性进行了研究。通过腹腔注射D-半乳糖（100 mg/（kg?d））诱导致衰老小鼠为对照组,羊肚菌菌 丝体多糖和羊肚菌菌丝体锌多糖（320 mg/（kg?d））为治疗组。30 d后检测小鼠肝脏、肾脏和血清中超氧化物歧 化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含 量,研究羊肚菌菌丝体多糖体内抗氧化作用。羊肚菌菌丝体多糖和羊肚菌菌丝体锌多糖清除羟自由基半数抑制浓度 （half maximal inhibitory concentration,IC50）分别为0.56 mg/mL和0.36 mg/mL;清除超氧阴离子自由基IC50分别为 0.62 mg/mL和0.46 mg/mL;清除DPPH自由基IC50分别为0.68 mg/mL和0.58 mg/mL。羊肚菌菌丝体锌多糖能够提高 衰老小鼠肝脏中SOD和CAT活力,显著降低MDA含量（P＜0.05）,与羊肚菌菌丝体多糖组相比使SOD活力提高了 9.32%,CAT活力提高了36.73%,MDA含量降低了90.71%。羊肚菌菌丝体锌多糖具有更强的抗氧化活性,并在设 定的质量浓度范围呈剂量效应关系。     

产胞外多糖泰山羊肚菌液体培养条件的优化

对泰山羊肚菌产胞外多糖 (exopolysaccharides,EPS)的液体培养基组成和发酵条件进行了优化 ,最适碳源是葡萄糖 ,最适氮源是NH4NO3 。正交试验确定最佳培养基组成为麸皮 2 0 0 g/L ,葡萄糖 30 g/L ,NH4NO3 1g/L ,KH2 PO42 g/L ,MgSO4·7H2 O 1 5 g/L。最佳发酵条件为 2 5℃ ,起始 pH值 6 5 ,装液量 10 0mL/瓶 ,接种量10 % ,摇床转速 2 0 0r/min ,发酵时间 4d。在此条件下 ,其胞外多糖含量 (2 135 4 4 1mg/L)比对照(14 5 4 6 39mg/L)提高了 4 6 8%。     

甘肃甘南野生羊肚菌液体发酵生长动力学研究

以甘肃甘南地区野生羊肚菌（Morchella esculenta）为研究对象,运用遗传算法进行了羊肚菌M. esculenta液体菌种发酵动力学参数估计,通过对不同初始串集的多次实验,各动力学参数估计收敛值结果基本一致。此外,运用Monod模型、Logistic模型以及1stOpt（FirstOptimization）软件对羊肚菌M.esculenta生长过程进行了拟合,通过对方程模拟结果的误差分析、相关性分析、中位数检验以及数据分布检验最终选择 Logistic 模型和1stOpt拟合模型作为此次实验羊肚菌M.esculenta液体菌种深层发酵生长动力学模型。     

羊肚菌营养强化米酒发酵工艺的优化

以糯米为基质培养羊肚菌菌丝体,将羊肚菌糯米培养产物酿制成一种新型米酒。以酒精含量和感官评价为目标值,获得以糯米为基质的羊肚菌菌丝体适宜培养条件为:45g糯米加40m L营养液,起始p H 7,培养温度26℃,培养时间为6d;羊肚菌米酒的最佳发酵条件为:加曲量2.0%,糖化温度28℃,酵母加量2.5%,发酵时间为4d。羊肚菌营养强化米酒酒精度最高达10.9%vol。该研究获得一种风味独特、营养丰富的新型米酒。      

羊肚菌液体深层发酵条件

以羊肚菌为材料，研究了发酵过程中碳源、氮源、无机盐、培养条件对菌丝体生物量、胞外多糖的影响，以及发酵过程中菌丝体生物量、胞外多糖、总糖及还原糖质量浓度、培养基PH值的动态变化，并在此基础上确定了羊肚菌液体深层发酵的最佳条件。结果表明：羊肚菌液体深层发酵的最优培养基配比为：玉米粉4．0g／dL、葡萄糖1．0g／dL、黄豆粉2．0g／dL、酵母粉0．3g／dL、KH2PO4 0．2g／dL、MgSO4 0．1g／dL、CaSO4 0．1g／dL；最优培养条件为：24℃，起始pH5．8，250mL的摇瓶装液量为100mL，接种量10mL，摇瓶转速140r／min，发酵时间为108h。     

羊肚菌多糖提取、分离条件的选择

为了提高羊肚菌液体深层培养的多糖得率，本文研究了影响羊肚菌胞内、胞外多糖得率的各种因素。经试验确定羊肚菌胞外多糖分离优化条件为：沉淀温度-15℃，沉淀乙醇倍数3倍，沉淀时间24h，沉淀pH值为7。羊肚菌胞内多糖的浸提优化条件为：采用热水浸提，浸提温度85℃，浸提时间2h，浸提加水比50：1，浸提pH值为7，浸提次数两次。对比试验说明，优化效果显著。经SephadexG-150柱层析结果表明，羊肚菌胞外多糖由5种大分子多糖组成，而胞内多糖仪由2种组成。     

羊肚菌菌丝体液体培养富锌条件的优化

通过对蛹虫草（Cordyceps militaris）、大球盖菇（Stropharia rugoso-annulata）、铆钉菇（Gomphidiaceae）、杏鲍菇（Pleurotus eryngii）、美味牛肝菌（Boletus edulis）、羊肚菌（Morehella esculenta）、灵芝（Ganoderma lucidum）和真姬菇（Hypsizygus marmoreus）等食用菌富锌能力的考察,筛选出具有较强的耐锌和富锌能力的羊肚菌做为富锌菌种,并采用液体发酵技术对羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源、锌浓度和发酵条件进行了优化。结果表明:羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源是Zn（CH3COO）2,在100～800mg/L的锌浓度范围内菌丝体都可以生长,菌丝体对锌的最适富集浓度为600mg/L。羊肚菌菌丝体最优富锌条件为:发酵温度25℃,起始pH7,振荡转速150r/min,250mL三角瓶装液50mL,锌添加量为600mg/L,接种量5%（V∶V）培养时间4d时,羊肚菌菌丝体的生物量及含锌量达最高,总富锌率可达23.20%,富集锌的有机化程度为37.71%。      

羊肚菌营养素、功能成分和保健功能研究进展

羊肚菌是一种珍稀野生食用药用菌,其味道鲜美,含有丰富的蛋白质、维生素等营养素和多糖、多酚等功能成分,具有保肝、降血脂、增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化、消食、抗疲劳、抗菌等保健功能,可作为原料用于开发食品风味配料、营养补充剂和营养保健品。本文综述了羊肚菌的营养素、功能成分及保健功能。     

不同烹饪方式的羊肚菌在体外消化过程中营养成分溶出差异比较

为研究不同烹饪方式对羊肚菌营养品质的影响,采用体外消化方法对煮制、蒸制以及烤制处理的不同粒度羊肚菌粉（粗粉、超微粉）进行消化。比较了消化后的羊肚菌粉显微形态,模拟胃、肠消化液中还原糖、蛋白质、游离氨基酸、总酚含量以及DPPH（1,1-Diphenryl-2-Picrylhydrazyl）自由基清除能力、铁离子还原能力（Ferric Ion Reducing Antioxidantpower,FRAP）、阳离子自由基清除能力2-azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulfphonate,ABTS）。结果表明：经过体外胃、肠消化后,烤制处理的羊肚菌粉还原糖、蛋白质、多酚溶出量最高,蒸制其次,煮制最低,烤制比煮制平均依次高62.87%、58.58%、4.69倍;蒸制处理的羊肚菌,溶出的游离氨基酸含量在所有处理中最高,粗粉、细粉平均为40.40 mg/g,分别比烤制、蒸制高出18.77%,19.81%。超微粉碎不能有效提高还原糖、多酚的溶出,但可以显著提高蛋白质、游离氨基酸的溶出（P<0.05）;模拟消化液的DPPH值没有显著差异,但FRAP和ABTS值差异显著（P<0.05）,烤制处理的最高,其次是蒸制,煮制最低;超微粉碎不能有效提升羊肚菌模拟消化液的抗氧化水平。该研究为羊肚菌的科学食用提供了参考。